Base de dados : LILACS
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Id: biblio-889211
Autor: Lima, Matheus Thomaz Nogueira Silva; Santos, Larissa Batista dos; Bastos, Rafael Wesley; Nicoli, Jacques Robert; Takahashi, Jacqueline Aparecida.
Título: Antimicrobial activity and acetylcholinesterase inhibition by extracts from chromatin modulated fungi
Fonte: Braz. j. microbiol;49(1):169-176, Jan.-Mar. 2018. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: ABSTRACT Major health challenges as the increasing number of cases of infections by antibiotic multiresistant microorganisms and cases of Alzheimer's disease have led to searching new control drugs. The present study aims to verify a new way of obtaining bioactive extracts from filamentous fungi with potential antimicrobial and acetylcholinesterase inhibitory activities, using epigenetic modulation to promote the expression of genes commonly silenced. For such finality, five filamentous fungal species (Talaromyces funiculosus, Talaromyces islandicus, Talaromyces minioluteus, Talaromyces pinophilus, Penicillium janthinellum) were grown or not with DNA methyltransferases inhibitors (procainamide or hydralazine) and/or a histone deacetylase inhibitor (suberohydroxamic acid). Extracts from T. islandicus cultured or not with hydralazine inhibited Listeria monocytogenes growth in 57.66 ± 5.98% and 15.38 ± 1.99%, respectively. Increment in inhibition of acetylcholinesterase activity was observed for the extract from P. janthinellum grown with procainamide (100%), when compared to the control extract (39.62 ± 3.76%). Similarly, inhibition of acetylcholinesterase activity increased from 20.91 ± 3.90% (control) to 92.20 ± 3.72% when the tested extract was obtained from T. pinophilus under a combination of suberohydroxamic acid and procainamide. Concluding, increases in antimicrobial activity and acetylcholinesterase inhibition were observed when fungal extracts in the presence of DNA methyltransferases and/or histone deacetylase modulators were tested.
Descritores: Antibacterianos/farmacologia
Inibidores da Colinesterase/farmacologia
Penicillium/química
Talaromyces/química
-Acetilcolinesterase/química
Acetilcolinesterase/metabolismo
Antibacterianos/química
Antibacterianos/metabolismo
Proteínas de Bactérias/química
Proteínas de Bactérias/metabolismo
Inibidores da Colinesterase/química
Inibidores da Colinesterase/metabolismo
Cromatina/metabolismo
Listeria monocytogenes/efeitos dos fármacos
Listeria monocytogenes/enzimologia
Listeria monocytogenes/crescimento & desenvolvimento
Penicillium/metabolismo
Talaromyces/metabolismo
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: biblio-847078
Autor: Bonatto, José Matheus Camargo.
Título: Caracterização da proteína quinase C Beta I nuclear em células tronco embrionárias / Characterization of protein kinase C beta I in embryonic stem cell nucleus.
Fonte: São Paulo; s.n; 2014. 181 p. tab, graf, ilus.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Instituto de Química para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: As proteína quinases C (PKC) pertencem à família das serina/treonina quinases, que vem sendo apontadas como importantes enzimas para os processos de proliferação e diferenciação das células tronco embrionárias (CTE), todavia, a função exata de cada isoforma dessa família ainda não está clara. Dados anteriores do nosso laboratório indicam que dentre as PKCs expressas em CTE, formas cataliticamente ativas da PKCßI são altamente expressas no núcleo das CTE murinas. Estas ao se diferenciarem expressam essa quinase no seu citoplasma ou deixam de expressar a mesma, e que a maioria dos alvos da PKCßI em CTE indiferenciada estão envolvidos em processos de regulação da transcrição de proteínas envolvidas em processos de proliferação/ diferenciação. Dando continuidade aos resultados anteriores do laboratório, no presente trabalho, com técnicas de proteômica e fosfoproteômica identificamos outros alvos nucleares da PKCßI em CTE indiferenciadas. Vimos que de fato inibindo-se a PKCßI diminuiu-se a fostorilação de fatores envolvidos com a indiferenciação das CTE. Dentre os alvos da PKCßI encontramos a proteína adaptadora, TIF1 que recruta proteínas remodeladoras de cromatina. Essa proteína é essencial para a manutenção do estado indiferenciado das CTE. In vitro a PKCßI foi capaz de fosforilar a TIF1ß e inibindo-se a PKCßI por RNAi vimos uma diminuição na expressão da TIF1ß e no fator de indiferenciação Nanog cuja expressão já foi demonstrada ser regulada pela TIF1ß. Além disso vimos que inibindo-se a PKCßI com o peptídeo inibidor da PKCßI aumentou a expressão de proteínas reguladas pelo c-Myc. E que o RNAi para a PKCßI aumentou a expressão de proteínas que regulam a expressão do c-Myc. Não vimos nenhum efeito na fosforilação ou expressão do c-Myc após a inibição da PKCßI o que sugere que a PKCßI ative proteínas repressoras do c-Myc. Nossos estudos sugerem que a PKCßI regula a manutenção do estado indiferenciado das CTE regulando a expressão e atividade da Tif1ß um possível alvo direto da PKCßI. Levando a modificações da cromatina e regulação da expressão de genes que mantém as CTE indiferenciadas. Outro ponto de regulação da PKCßI parece ser a nibição da atividade de c-Myc o que seria importante para a manutenção do estado indiferenciado visto que o c-Myc é um amplificador das vias de sinalização que mantém as células proliferando. Desta forma a PKCßI parece ter um papel central na regulação da expressão gênica de CTE à nível de modificações epigenéticas e a nível transcricional mantendo as CTE indiferenciadas

The Protein kinase C (PKC) family of serine/treonine kinases, are being described as important enzymes for proliferation and diferentiation of embryonic stem cells (ESC), however, the exact function of the different isoenzymes of this family still is unclear. Previous data from our laboratory indicates that amongst the PKCs expressed in ESC, catalytically active forms of PKCßI are highly expressed in nucleus of murine ESC. When these cells differentiate this kinase can be found in the cytoplasm or not expressed at all, and that the majority of PKCßI targets in undifferentiated ESC are involved in the regulation of proteins involved in transcription of proteins involved in proliferation/ diferentiation. Continuing our previous work herewith using proteomics and phosphoproteomics techniques we identified other nuclear PKCßI targets in undifferentiated ESC. We indeed saw that inhibiting PKCßI decreased the phosphorylation of factors involved with maintainance of the undifferentiated state of ESC. Amongst the targets of PKCßI we found the adaptor protein, TIF1ßI, that recruits cromatin remodeling proteins. This protein is essential for the maintenance of the undifferentiated state of ESC. In vitro PKCßI phosphorylated TIF1ß and inhibiting PKCßI with RNAi decreased the expression of TIF1ß and of the undifferentiation factor Nanog whose expression has been shown to be regulated by TIF1ß. We also saw that inhibiting PKCßI with a peptide inhibitor increased the expression of proteins regulated by c-Myc, and that RNAi for PKCßI increased the expression of proteins that regulate the expression of c-Myc. We did not see any effect on the phosphorylation or expression of c-Myc after inhibition of PKCßI suggesting that PKCßI activates c-Myc repressor proteins. Our studies sugest that PKCßI regulates the maintenance of the undiferentiated state of ESC regulating the expression and activity of Tif1ß a possibly a direct target of PKCßI, leading to chromatin modifications and regulation of genes that maintain ESC undiferentiated. Another form of regulation of PKCßI seems to be by inhibiting the activity of c-Myc which is importante to maintain ESC undifferentiated since c-Myc is na an amplifyer of signaling patheways that maintain ESC proliferating. Together PKCßI has a central role in the regulation of the gene expression of ESC at the level of epigenetic modifications and transcriptional regulation
Descritores: Células-Tronco Embrionárias/citologia
Proteína Quinase C/metabolismo
-Diferenciação Celular
Cromatina/genética
Espectrometria de Massas/métodos
Fosforilação
Proteína Quinase C beta/análise
Proteômica/instrumentação
Proteínas Repressoras/genética
Substratos/classificação
Tipo de Publ: Técnicas In Vitro
Responsável: BR40.1 - DBD - Divisão de Biblioteca e Documentacão do Conjunto das Químicas
BR40.1; T 574.192, B699c. 30100025419-Q


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Lopes, Maria Denise
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Id: lil-789908
Autor: Pereira, Leda Maria Costa; Bersano, Paulo Ricardo de Oliveira; Lopes, Maria Denise.
Título: Influence of stages anestrous and diestrus in chromatin configuration in germinal vesicle of canine oocytes / Influência das fases de anestro e diestro sobre a configuração da cromatina em vesícula germinativa de oócitos caninos
Fonte: Braz. j. vet. res. anim. sci;50(6):474-481, 2013. ilus, tab.
Idioma: pt.
Resumo: In canine specie, oocyte maturation rates are low and the percentage of oocytes that remain in the stage of germinal vesicle (GV) regardless of culture conditions is high. During maturation oocyte undergoes modification and the GV chromatin remodeling manifested by changes in the configuration and positioning. The objective of this work is to evaluate the configuration and positioning of chromatin of oocytes in GV stage during anestrus and diestrus bitches. The ovaries of 33 females (20 bitches in anestrous and 13 in diestrus) were isolated, sliced and only cumulus-oocyte complexes (COCs) grade 1 were subjected to solution of 0.2% hyaluronidase for release in cumulus cells. After this process, the selected oocytes were stained and evaluated. From a total of 920 oocytes, 566 were classified as grade 1 and the stages of chromatin configuration identified as GV-1, GV-2, GV-3 and GV-4. The observed changes in chromatin configuration been characterized as a transition dispersed chromatin (GV-1, GV-2) for partially condensed (GV-3) until it reaches a fully condensed stage (GV-4). The data analyzed from the chromatin configuration showed a significant difference between the stages with a higher proportion of GV-1 and GV-2 for the anoestrus and GV-3 and GV-4 during diestrus. There is need for further studies to be able to have a proper understanding of the influence of chromatin configuration of oocytes in GV stage in resumption of meiosis and consequently in oocyte meiotic competence...

Na espécie canina as taxas de maturação oocitária são baixas e a porcentagem de oócitos que permanecem em estagio de vesícula germinativa (VG), independente das condições de cultivo, e alta. Durante a maturação oocitária, a VG sofre modificação e remodelamento da cromatina, que se manifesta por alterações na sua configuração e posicionamento. Assim, o objetivo deste trabalho e avaliar a configuração e o posicionamento da cromatina de oócitos em estagio de VG durante o anestro e diestro de cadelas. Os ovários de 33 fêmeas (20 cadelas em anestro e 13 em diestro) foram isolados, fatiados e os complexos cumulus-oócitos (COCs) foram submetidos à solução de hialuronidase 0,2% para a liberação das células do cumulus. Apos esse processo, os oócitos selecionados foram corados, avaliados e apenas COCs grau 1 foram utilizados. De um total de 920 oócitos, 566 foram classificados como grau 1 e os estágios de configuração da cromatina identificados como VG-1, VG-2, VG-3 e VG-4. As alterações observadas na configuração da cromatina foram caracterizadas como transição de uma cromatina dispersa (VG-1, VG-2) para parcialmente condensada (VG-3) ate atingir um estagio totalmente condensado (VG-4). Os dados analisados da configuração da cromatina mostraram uma diferença significativa entre as fases de anestro e diestro, com maior proporção de VG-1 e VG-2 durante o anestro e de VG-3 e VG-4 durante o diestro. Ha necessidade de novos estudos para uma compreensão adequada da influencia da configuração da cromatina de oócitos no estagio de VG na retomada da meiose e na competência meiótica do oócito...
Descritores: Anestro
Cromatina/fisiologia
Diestro
Oócitos/crescimento & desenvolvimento
-Técnicas Reprodutivas/veterinária
Limites: Animais
Feminino
Cães
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


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Id: lil-769530
Autor: Mendaçolli, Paola Jung; Brianezi, Gabrielli; Schmitt, Juliano Vilaverde; Marques, Mariângela Esther Alencar; Miot, Hélio Amante.
Título: Nuclear morphometry and chromatin textural characteristics of basal cell carcinoma
Fonte: An. bras. dermatol;90(6):874-878, Nov.-Dec. 2015. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: FAPESP.
Resumo: Abstract: Histological subtypes of basal cell carcinoma have biological, evolutionary and distinct prognostic behavior. The analysis of characteristics of the nucleus can provide data on their cellular physiology and behavior. The authors of this study evaluated nuclear morphological parameters and textural patterns of chromatin from different subtypes of basal cell carcinoma: nodular (n=37), superficial (n=28) and sclerodermiform (n=28). The parameters were compared between neoplasms' subtypes and with unaffected adjacent basal epithelium. Nuclear area and diameter of sclerodermiform neoplasms were superior to the other subtypes. Chromatin's color intensity and fractal dimension were less intense in superficial subtypes. Nuclear roundness and chromatin's entropy presented lower values in tumors than in normal epithelium. There was significant correlation between morphological and textural variables of normal skin and tumors. Morphometric elements and textural chromatin's homogeneity of basal cell carcinomas may be related to evolutionary, biological and behavior particularities related to each histotype.
Descritores: Carcinoma Basocelular/patologia
Cromatina/patologia
Neoplasias Cutâneas/patologia
-Estudos Transversais
Carcinoma Basocelular/classificação
Núcleo Celular/patologia
Epitélio/patologia
Estatísticas não Paramétricas
Neoplasias Cutâneas/classificação
Carga Tumoral
Limites: Seres Humanos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-763046
Autor: Khosravanian, Hajar; Razi, Mazdak; Farokhi, Farah; Khosravanian, Narges.
Título: Simultaneous Administration of Dexamethasone and Vitamin E Reversed Experimental Varicocele-induced Impact in testicular tissue in Rats; Correlation with Hsp70-2 Chaperone Expression
Fonte: Int. braz. j. urol;41(4):773-790, July-Aug. 2015. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: ABSTRACTPurpose:This study aimed to investigate the protective effects of isolated and co-administration of vitamin E (VitE) and dexamethasone (DEX) on varicocele (VCL)-induced damages in testicular tissue.Materials and Methods:Wistar rats were divided into five groups (n=6), including; control-sham, non-treated VCL-induced, VitE-treated VCL-induced (VitE, 150 mg/kg, orally), DEX-administrated VCL-induced (DEX, 0.125 mg/kg, i.p.), VitE+DEX-received VCL-induced animals. The antioxidant status analyses, histopathological examinations, hormonal assay and tissue levels of alkaline phosphatase (ALP) were analyzed. The germinal epithelium RNA damage and Leydig cells steroidogenesis were analyzed. Moreover, the Hsp70-2 protein expression was examined based on immunohistochemical and western blot analyses. The sperm parameters, DNA integrity and chromatin condensation were investigated.Results:VitE and DEX in simultaneous form of administration significantly (P<0.05) down-regulated the tissue ALP level and attenuated the VCL-decreased GSH-px, SOD and TAC levels and remarkably (P<0.05) down-regulated the testicular malondialdehyde (MDA) and nitric oxide (NO) contents. The VCL-induced histopathological alterations significantly (P<0.05) improved in VitE and DEX-administrated animals. The VitE and DEX co-administration reduced the VCL-increased RNA damage and elevated the Leydig cells steroidogenic activity. The Hsp70-2 protein level completely (P<0.05) increased in VitE and DEX alone–and-simultaneous-administrated animals. Finally, the VitE and DEX could significantly (P<0.05) improve the VCL-decreased semen quality and improved the sperm DNA integrity and chromatin condensation.Conclusion:Our data suggest that Vit E by up-regulating the antioxidant status and DEX by reducing inflammation-dependent oxidative and nitrosative stresses could improve the VCL-reduced Hsp70-2 chaperone expression and ultimately protected the testicular endocrine activities and promoted the spermatogenesis process.
Descritores: Anti-Inflamatórios/administração & dosagem
Antioxidantes/administração & dosagem
Dexametasona/administração & dosagem
/metabolismo
HSPACCOUNTING HEAT-SHOCK PROTEINS/metabolismo
Varicocele/tratamento farmacológico
Vitamina E/administração & dosagem
-Western Blotting
Cromatina/fisiologia
Modelos Animais de Doenças
Dano ao DNA
Interações Medicamentosas
Glutationa Peroxidase/análise
Imuno-Histoquímica
Malondialdeído/análise
Estresse Oxidativo/efeitos dos fármacos
Substâncias Protetoras
Ratos Wistar
Contagem de Espermatozoides
Motilidade Espermática/efeitos dos fármacos
Espermatozoides/efeitos dos fármacos
Superóxido Dismutase/análise
Testículo/efeitos dos fármacos
Testículo/enzimologia
Testículo/patologia
Testosterona/sangue
Varicocele/fisiopatologia
Limites: Animais
Masculino
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-756635
Autor: Santos Junior, Gilson Costa dos.
Título: Estudo da cromatina nos sítios de fixação à matriz nuclear no domínio do gene TP53 e das modificações epigenéticas e no modelo de progressão tumoral mamária 21T / MARs chromatin study on TP53 gene domain and epigenetic modifications in a breast cancer progression model.
Fonte: Rio de Janeiro; s.n; 2014. 137 f p.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade do Estado do Rio de Janeiro para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: Dentre os diversos tipos de câncer agressivos, o câncer de mama é o mais comum em mulheres. Mutações hereditárias e adquiridas, assim como alterações epigenéticas atuam em sinergia na carcinogênese mamária e na progressão tumoral. A proteína P53 é uma supressora de tumor e possui uma atuação fundamental na integridade genômica. Apesar do vasto conhecimento sobre o controle da P53 a nível de proteína, ainda pouco se sabe sobre o controle transcricional do gene TP53. A série 21T, uma série de 4 linhagens celulares originadas da mama da mesma paciente, representando diferentes estágios de progressão tumoral mamária, é um eficiente modelo para investigação das alterações epigenéticas e suas influências na expressão gênica ao longo da progressão do câncer de mama. Nós analisamos a organização do domínio do gene TP53 através da técnica de arranjo de DNA, em diversas linhagens celulares de câncer de mama e linhagens controle, e realizamos uma tentativa de caracterizar estes elementos de DNA nas linhagens controle não-tumorais HB2 e MCF10A e nas tumorais MCF-7, MDA-MB-231, T47D, através dos marcadores epigenéticos de eucromatina, H4Ac, e heterocromatina, H3K9me3. Ainda analisamos a ligação de proteínas à região associada à matriz nuclear (MAR), denominada MAR 2, e a possível ligação da proteína ligante à matriz nuclear (MARBP), PARP-1, através de ensaios de gel shift (EMSA). Detectamos que na linhagem controle epitelial mamária, HB2, o gene TP53 está posicionado num domínio de DNA relativamente pequeno, aproximadamente 50 kb, delimitado por dois sítios de fixação à matriz nuclear. Interessantemente, esta estrutura de domínio se apresentou radicalmente diferente nas linhagens de câncer de mama estudadas, MCF7, T47D, MDA-MB-231 e BT474, nos quais o tamanho do domínio estudado estava aumentado e a transcrição do TP53 diminuída...

Breast cancer is the most common aggressive cancer type in women. Inherited and acquired mutations as well as epigenetic alterations act together in breast carcinogenesis and tumor progression. P53 is a tumor suppressor protein critical for genome integrity. Although its control at the protein level is well known, the transcriptional regulation of the TP53 gene is still unclear. The 21T series, a series of 4 breast cell lines originating from the same patient and representative of the breast tumor progression stages, is a suitable model to investigate epigenetic alterations and their influences upon gene expression during breast tumor progression. We have analyzed the organization of the TP53 gene domain using DNA arrays in several breast cancer and control cell lines and we made an attempt to characterize these DNA elements in breast non-cancerous cell lines HB2 and MCF-10, and cancerous MCF-7, MDA-MB-231 and T47D, through the determination of epigenetic markers of euchromatin, H4Ac, and heterochromatin, H3K9me3. We further analyzed the matrix attachment region (MAR), named MAR 2, protein binding, and possible MAR 2 binding of the important MAR binding protein (MARBP), PARP-1, by Electrophoretic mobility Shift Assay (EMSA). We have found that in the control breast epithelial cell line, HB2, the TP53 gene is positioned within a relatively small DNA domain, encompassing 50 kb, delimited by two nuclear matrix attachment sites. Interestingly, this domain structure was found to be radically different in the studied breast cancer cell lines, MCF7, T47D, MDA-MB-231 and BT474, in which the domain size was increased and TP53 transcription was decreased...
Descritores: Neoplasias da Mama
Cromatina/genética
/genética
GENES PDIPETALONEMA INFECTIONS/genética
Matriz Nuclear
-Biologia Computacional/métodos
Linhagem Celular
DNA
Epigênese Genética
Microscopia Confocal
Limites: Seres Humanos
Responsável: BR1365.1 - Biblioteca Biomédica A - CB/A


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Texto completo SciELO Saúde Pública
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Id: lil-746682
Autor: Velásquez, Germán.
Título: Alternativas al modelo de investigación y desarrollo de medicamentos / Alternatives to the drug research and development model
Fonte: Salud colect;11(1):23-34, ene.-mar. 2015. tab.
Idioma: es.
Resumo: Un tercio de la población mundial carece de acceso a los medicamentos y la situación es peor en los países pobres, en los que hasta un 50% de la población carece de acceso. El fracaso de los sistemas actuales de incentivos, basados en la propiedad intelectual, para ofrecer los productos farmacéuticos necesarios, especialmente en los países del sur, llama a la acción. Los problemas relacionados con el acceso a medicamentos no pueden ser resueltos tan solo a través de mejoras o adaptaciones de los modelos de incentivos existentes. El modelo del sistema de propiedad intelectual no ofrece la innovación necesaria para los países en desarrollo, se necesitan nuevos mecanismos que de forma simultánea y eficaz promuevan la innovación y el acceso a los medicamentos. Un tratado internacional vinculante sobre investigación y desarrollo, que se negocie bajo los auspicios de la Organización Mundial de la Salud, puede proporcionar el marco adecuado para garantizar el establecimiento de prioridades, la coordinación y la financiación sostenible de los medicamentos a precios asequibles para los países en desarrollo.

One-third of the global population lacks access to medications; the situation is worse in poor countries, where up to 50% of the population lacks access. The failure of current incentive systems based in intellectual property to offer the necessary pharmaceutical products, especially in the global south, is a call to action. Problems related to drug access cannot be solved solely through improvements or modifications in the existing incentive models. The intellectual property system model does not offer sufficient innovation for developing countries; new mechanisms that effectively promote innovation and drug access simultaneously are needed. A binding international agreement on research and development, negotiated under the auspices of the World Health Organization, could provide an adequate framework for guaranteeing priority-setting, coordination, and sustainable financing of drugs at reasonable prices for developing countries.
Descritores: Cromatina/metabolismo
Mediadores da Inflamação/metabolismo
Estresse Oxidativo/fisiologia
Poli(ADP-Ribose) Polimerases/metabolismo
-Morte Celular/fisiologia
Cromatina/genética
Reparo do DNA
Ativação Enzimática
Poli(ADP-Ribose) Polimerases/genética
Transdução de Sinais
Transcrição Genética
Limites: Animais
Seres Humanos
Camundongos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Revisão
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-692075
Autor: Giudice, Fernanda Salgueiredo.
Título: O envolvimento da remodelação da cromatina no controle do comportamento agressivo dos carcinomas epidermoides de cabeça e pescoço / The involvement of chromatin remodeling in the control of head and neck squamous cell carcinoma behavior.
Fonte: São Paulo; s.n; 2012. 135 p. ilus, tab, graf. (BR).
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Faculdade de Odontologia para obtenção do grau de Doutor.
Símbolo: BR.
Resumo: Modificações nas histonas são conhecidas por regular a estrutura conformacional da cromatina e a expressão gênica em células adultas e células-tronco pluripotentes. Tem sido postulado que a acetilação e deacetilação das histonas podem influenciar a expressão de genes envolvidos na iniciação, progressão e metástase tumoral, além de contribuir para o desenvolvimento de resistência à quimioterapia. Assim, buscou-se avaliar a influência das modificações nas histonas sobre a biologia do carcinoma epidermoide de cabeça e pescoço (CECP) e sua respectiva subpopulação de células semelhantes às células-tronco (CSC). Inicialmente, foi checado os níveis de acetilação da histona H3 (membro das histonas nucleares associado à compactação da cromatina) em um painel representativo de linhagens celulares de CECP. Posteriormente, para estudar a influência do estroma tumoral no padrão de acetilação da histona H3, o microambiente do tumor foi mimetizado através da utilização de meio condicionado derivado do cultivo de fibroblastos e cultura primária de células endoteliais humanas. Além disso, validamos esses resultados in vitro por meio de amostras humanas de CECP. Finalmente, a acetilação e deacetilação da cromatina foi induzida, respectivamente, pela administração dos inibidores das enzimas histona deacetilase tricostatina A (TSA) e histona acetiltransferase curcumina, em linhagens celulares de CECP. Foi feita a análise da formação de esferas (ensaio funcional de células-tronco), juntamente com a verificação dos níveis de ALDH, marcador de células-tronco (citometria de fluxo - FACS), além da determinação do índice de proliferação tumoral (Ki-67) e realização dos ensaios de invasão e migração celular. Linhagens celulares de CECP apresentaram níveis baixos de acetilação da histona H3 e demonstraram capacidade de retenção de uma subpopulação de CSC. Apenas o meio condicionado de células endoteliais humanas foi capaz de alterar a conformação da cromatina, uma vez que induziu o aumento da acetilação da histona H3. Interessantemente, foi também notado um concomitante aumento da agressividade de linhagens celulares de CECP (aumento dos níveis de BMI-1 e vimentina). Esses resultados foram confirmados em amostras humanas de CECP que mostraram, apenas no fronte de invasão, células com cromatina acetilada. Curiosamente, essas mesmas células também expressaram vimentina. Os tratamentos com TSA e curcumina resultaram na diminuição significativa da subpopulação de CSC, interrompendo a formação de esferas e reduzindo os níveis de ALDH. Além disso, o tratamento com curcumina mostrou resultados muito interessantes, uma vez que gerou uma redução evidente da invasão celular e impactou por completo o potencial de migração tumoral, sendo nesse sentido mais eficiente que a cisplatina, droga antineoplásica bem estabelecida. Por outro lado, o tratamento com TSA induziu a transição epitélio-mesenquimal nas linhagens celulares de CECP, detectada pelo aumento da expressão de vimentina e indução de um fenótipo fusiforme, juntamente com o aumento da invasão tumoral e os níveis de BMI-1.

Histone modifications are known to regulate chromatin conformation structure and gene expression in adult cells and pluripotent stem cells. It has been postulated that histone acetylation and deacetylation could influence the expression of genes involved in cancer initiation, progression, metastasis, and development of resistance to chemotherapies. Here, we sought to evaluate the influence of histone modifications over the biology of head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) and its stem cell-like subpopulation (CSC). Initially, we checked the status of histone H3 acetylation (a member of the core histones associated to chromatin compaction) in a representative set of HNSCC cell lines. Subsequently, to analyze the influence of tumor stroma over the histone H3 acetylation, we mimicked the tumor microenvironment by using conditioned medium from fibroblasts and primary human endothelial cells. Further we validated these in vitro findings through human samples of HNSCC. Finally, we induced chromatin acetylation and deacetylation by the administration of the histone deacetylase inhibitor trichostatin A (TSA) and histone acetyltransferase inhibitor curcumin, respectively, in HNSCC cell lines. The analysis of spheres formation (stem cell functional assay), along with the levels of stem cells marker ALDH (showed by flow cytometry - FACS), tumor proliferation index (Ki-67), invasion and migration cellular potencial were verified. HNSCC cell lines showed lower levels of histone H3 acetylation and ability to retain a subpopulation of CSC.
Descritores: Carcinoma de Células Escamosas/diagnóstico
Células-Tronco/fisiologia
Cromatina/ultraestrutura
Limites: Seres Humanos
Masculino
Feminino
Responsável: BR97.1 - Serviço de Documentação Odontológica
BR97.1; T4.776


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Texto completo SciELO Chile
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Id: lil-676823
Autor: Leonova, Olga G; Karajan, Bella P; Ivlev, Yuri F; Ivanova, Julia L; Skarlato, Sergei O; Popenko, Vladimir I.
Título: Quantitative analysis of nucleolar chromatin distribution in the complex convoluted nucleoli of Didinium nasutum (Ciliophora)
Fonte: Biol. Res;46(1):69-74, 2013. ilus, tab.
Idioma: en.
Projeto: Russian Foundation for Basic Research.
Resumo: We have earlier shown that the typical Didinium nasutum nucleolus is a complex convoluted branched domain, comprising a dense fibrillar component located at the periphery of the nucleolus and a granular component located in the central part. Here our main interest was to study quantitatively the spatial distribution of nucleolar chromatin structures in these convoluted nucleoli. There are no "classical" fibrillar centers in D.nasutum nucleoli. The spatial distribution of nucleolar chromatin bodies, which play the role of nucleolar organizers in the macronucleus of D.nasutum, was studied using 3D reconstructions based on serial ultrathin sections. The relative number of nucleolar chromatin bodies was determined in macronuclei of recently fed, starved D.nasutum cells and in resting cysts. This parameter is shown to correlate with the activity of the nucleolus. However, the relative number of nucleolar chromatin bodies in different regions of the same convoluted nucleolus is approximately the same. This finding suggests equal activity in different parts of the nucleolar domain and indicates the existence of some molecular mechanism enabling it to synchronize this activity in D. nasutum nucleoli. Our data show that D. nasutum nucleoli display bipartite structure. All nucleolar chromatin bodies are shown to be located outside of nucleoli, at the periphery of the fibrillar component.
Descritores: Nucléolo Celular/ultraestrutura
Cromatina/metabolismo
Cilióforos/citologia
-Nucléolo Celular/metabolismo
Cromatina/ultraestrutura
Cilióforos/metabolismo
Microscopia Eletrônica de Varredura
Região Organizadora do Nucléolo/metabolismo
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
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Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Id: lil-668690
Autor: Tsakmakidis, Ioannis A; Khalifa, Tarek AA; Boscos, Costas M.
Título: Age-related changes in quality and fertility of porcine semen
Fonte: Biol. Res;45(4):381-386, 2012. ilus.
Idioma: en.
Resumo: The aim of this study was to investigate the effect of boar age on quality traits and fertility of liquid-stored semen. Boars were allocated into 3 age groups: 7-10 months (young), 18-33 months (mature), 51-61 months (old). Ejaculates of > 200x10(6) sperm/ml and 85% total motile sperm were extended to 30x10(6) sperm/ml, stored at 17-18 °C and used within 12-24 h for artificial insemination (AI) of 2062 multiparous sows. After 24 h of storage, aliquots of diluted semen were assessed for sperm progressive motility (SPM), incidence of sperm chromatin instability (SCI), proportion of live morphologically normal sperm (LMNS) and head morphometry of LMNS. The results showed that young boars had higher percentages of SCI and lower proportions of LMNS than those of the mature (p < 0.05) and old (p < 0.001) boars, respectively. Sperm head dimensions of young and old boars were greater (p < 0.03-0.001) than those of mature boars. The farrowing rate of young boars (65%) was significantly lower (p < 0.001; χ2= 30-61) than those of the mature (87.2%) and old (84.7%) boars. The relationship between sperm head dimensions and boar fertility was non-significant. In conclusion, boar age is an important physiological factor contributing to the success of swine AI.
Descritores: Fertilidade/fisiologia
Inseminação Artificial/veterinária
Sêmen/fisiologia
Motilidade Espermática/fisiologia
Espermatozoides/fisiologia
-Fatores Etários
Cromatina/fisiologia
Taxa de Gravidez
Suínos
Limites: Animais
Feminino
Masculino
Gravidez
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central



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