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Id: biblio-988472
Autor: Espitia Corredor, Jenaro Antonio; Cuca Suárez, Luis Enrique; Guerrero Pabón, Mario Francisco.
Título: Assesment of platelet antiaggregant activity of a fraction from an ethanolic extract of the bark of Nectandra amazonum Nees / Evaluación de la actividad antiagregante plaquetaria de una fracción del extracto etanólico de corteza de Nectandra amazonum Nees
Fonte: Vitae (Medellín);23(2):119-123, 2016. Ilustraciones.
Idioma: en.
Resumo: Background: Some species of the Lauraceae family are known to produce secondary metabolites that have antiplatelet properties. Studies on the leaves of Nectandra amazonum Nees. have shown antiaggregant activity but the bark of this species has not been studied. Objectives: To assess the antiplatelet effect of the ethanolic fraction obtained from the bark of Nectandra amazonum Nees. [N.V. "laurel amarillo", Lauraceae] applying the "Born" turbidimetric method. Methods: The screening test compared the effects of a fraction of N. amazonum (0.1 mg/mL), acetylsalicylic acid (ASA, 0.5 mM, as reference standard) and dimethylsulphoxide (DMSO, 0.1%, as control) on human platelets stimulated with adenosine diphosphate (ADP, 2 µM), epinephrine (EPI, 1 uM (one micromolar)), collagen (COLL, 1 µg/mL) and arachidonic acid (AA, 0.2 mg/mL). Subsequently, the study focused on determining the antiaggregant potency of the N. amazonum fraction through concentration - response curves (from 1 µg/mL to 0.4 mg/ mL), obtaining pIC50 (-log IC50) values against the platelet agonists. Results: Control platelets attained the highest percentage values of aggregation (96% AA, 89% EPI, 85% COLL, and 77% ADP). The N. amazonum fraction significantly reduced the aggregation effects (6% AA, 45% EPI, 10% COLL, 21% ADP), with values close to those obtained with ASA (17% AA, 21% EPI, 10% COLL, 20% ADP). According to concentration - response curves, the pIC50 values of the ethanolic fraction indicated the following order of potency: AA, 4.90 > ADP, 4.51 > COLL, 4.33 > EPI, 3.85. Conclusions: These results suggest that the N. amazonum Nees. ethanolic fraction elicited antiplatelet effects mainly related to the inhibition of the arachidonic acid pathway.

Antecedentes: Algunas especies de la familia Lauraceae poseen metabolitos secundarios que ejercen efectos antiplaquetarios. Estudios de las hojas de Nectandra amazonum Nees. han mostrado esa actividad, pero no se conoce sobre las propiedades antiagregantes de su corteza. Objetivos: Evaluar el efecto antiagregante plaquetario de la fracción etanólica obtenida de la corteza de Nectandra amazonum Nees. [N.V. "laurel amarillo", Lauraceae] aplicando el método turbidimétrico de Born. Métodos: En el tamizaje antiagregante se comparó la fracción de N. amazonum (0,1 mg/mL) con ácido acetil salicílico (ASA 0,5 mM, como estándar de referencia) y dimetilsulfóxido (DMSO, 0,1%, como control) en plaquetas humanas estimuladas con adenosin difosfato (ADP, 2 µM), epinefrina (EPI, 1 uM (uno micromolar)), colágeno (COLL, 1 µg/mL) y ácido araquidónico (AA, 0,2 mg/mL). Posteriormente, el estudio se enfocó en la determinación de la potencia antiagregante de la fracción mediante curvas de concentración - respuesta (desde 1 µg/mL hasta 0,4 mg/mL) para obtener los valores respectivos de pIC50 (-log CI50). Resultados: En el grupo control se alcanzaron altos valores de agregación plaquetaria (96% AA, 89% EPI, 85% COLL, 77% ADP). La fracción de N. amazonum redujo significativamente la agregación (6% AA, 45% EPI, 10% COLL, 21% ADP), con valores próximos a los obtenidos con ASA (17% AA, 21% EPI, 10% COLL, 20% ADP). De acuerdo con las curvas de concentración ­ respuesta, los valores de pIC50 arrojaron el siguiente orden de potencia: AA, 4,90 > ADP, 4,51 > COLL, 4,33 > EPI, 3,85. Conclusiones: Estos resultados sugieren que la fracción etanólica de N. amazonum Nees ejerce efectos antiplaquetarios relacionados especialmente con la cascada metabólica del ácido araquidónico.
Descritores: Agregação Plaquetária
Lauraceae
-Epinefrina
Difosfato de Adenosina
Colágeno
Ácido Araquidônico
Limites: Humanos
Tipo de Publ: Artigo Clássico
Responsável: CO56.3 - Biblioteca


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Id: lil-671973
Autor: Falcone, Marinela; Granero, Ricardo.
Título: Intervalos de referencia para agregación plaquetaria en individuos sanos / Platelet aggregation reference interval for healthy individuals / Intervalos de referência para agregação plaquetária
Fonte: Acta bioquím. clín. latinoam;46(4):656-659, dic. 2012. graf, tab.
Idioma: es.
Resumo: La agregación por transmisión de luz (ATL) es el método más usado por laboratorios clínicos y de investigación para evaluar la función plaquetaria y es considerado actualmente el estándar de oro; no obstante, la ATL aún no es un método estandarizado, pese a los esfuerzos de organismos internacionales como la International Society of Thrombosis and Hemostasis (ISTH). Organismos regulatorios recomiendan que cada laboratorio clínico determine e informe sus intervalos de referencia (IR) para cada agonista que utiliza. Se presenta los IR de este laboratorio en la determinación de agregación plaquetaria mediante ALT utilizando adenosin difosfato (ADP), colágeno y adrenalina como agonistas. Para ello se diseñó un estudio de corte transversal sobre una muestra a conveniencia de voluntarios(as) aparentemente sanos; se usó un agregómetro óptico y se emplearon los siguientes agonistas y concentraciones finales: ADP 5 µM, colágeno 2 µM y adrenalina 10 µM. Se definió IR como los percentiles 2,5 y 97,5 (P2,5 y P97,5) del Porcentaje de Agregación Plaquetaria Máxima APM%. Participaron 63 individuos, rango de edad 18 a 66 años, 79,4% sexo femenino. Los valores de APM% fueron: ADP P2,5=49% y P97,5=87%; colágeno P2,5=43% y P97,5=86%; adrenalina P2,5=42% y P97,5=85%. Atendiendo a recomendaciones internacionalmente aceptadas, se presentan los IR de APM (%) por el método ATL en este laboratorio (ASCARDIO, Barquisimeto, Venezuela), lo que permite al clínico basar sus decisiones en evidencia válida y pertinente.

Platelet aggregation tests by means of light transmission (LTA), the current gold standard, are the most commonly used methods used to evaluate platelet function at clinical and research laboratories. However, LTA has not been determinastandardized despite the work from international organizations such as the International Society of Thrombosis and Homeostasis (ISTH). Regulatory agencies recommend that each clinical laboratory establishes and informs its own Reference Internal (RI) for all agonists they use. RI are presented for our laboratory using the following agonists: diphosphate (ADP), collagen y adrenaline and the pertaining methodology. To assess our RI for platelet aggregation tests by LTA, a cross-sectional study was designed with a convenience sample of healthy volunteer men and women using an optical aggregometer with the following agonist and final concentration: adenosine diphosphate (ADP) 5 µM, collagen 2 µM and adrenaline 10 µM. The RIs were defined as Percentiles 2.5 (P2,5) and 97.5 (P97.5) of the percentage of maximal aggregation (%MA). 63 subjects participate, age range 18 to 66,79.4% were female. The IR for %MA were: ADP P2,5=49% and P97.5=87%; collagen P2,5=43% and P97.5=86%; adrenaline P2,5=42% and P97.5=85%. In agreement with international accepted recommendation guidelines, RIs for the %MA values were presented by LTA done in our clinical laboratory (ASCARDIO, Barquisimeto, Lara State, Venezuela), that allows physicians to base their clinical decision process on valid and pertinent information.

A agregometria por transmissão de luz (ATL) é o método mais utilizado pelos laboratórios clínicos e de pesquisa para avaliar a função plaquetária e é atualmente considerada o padrão-ouro; no entanto, a ATL ainda não é um método padronizado, apesar dos esforços das agências internacionais como a International Society of Thrombosis and Hemostasis (ISTH). Agências reguladoras recomendam que cada laboratório clínico determine e comunique seus intervalos de referência (IR) para cada agonista utilizado. São apresentados o IR de nosso laboratório para determinar a agregação plaquetária através de ALT usando Difosfato de Adenosina (ADP), Colágeno e Adrenalina como agonistas. Para isso foi elaborado um estudo de corte transversal em uma amostra de conveniência de voluntários(as) aparentemente saudáveis , foi usado agregômetro ótico e foram utilizados os seguintes agonistas e concentrações finais: 5µ M ADP, Colágeno 2µM e Adrenalina 10µM. Definiu-se o IR com os percentis 2,5 e 97.5 (P2,5 e P97.5) do Percentual de Agregação Plaquetária Máxima APM%. Participaram 63 indivíduos, na faixa etária 18-66 anos, 79,4% do sexo feminino. Os valores de APM% foram: ADPP2,5=49% e P97.5=87%; Colágeno P2,5=43% e P99,5=86%, Adrenalina P2,5=42% e P97.5=85%. Atendendo às recomendações aceitas internacionalmente, apresentam-se os IR de APM% pelo método ATL em nosso laboratório (ASCARDIO, Barquisimeto, Venezuela), o que permite ao médico basear as suas decisões em evidências válidas e pertinentes.
Descritores: Agregação Plaquetária/fisiologia
-Difosfato de Adenosina/agonistas
Agonistas Colinérgicos/sangue
Transtornos Hemorrágicos/diagnóstico
Valores de Referência
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Tipo de Publ: Técnicas In Vitro
Responsável: AR1.2 - Instituto de Investigaciónes Epidemiológicas


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Texto completo SciELO Brasil
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Rodrigues, Alfredo José
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Id: lil-492970
Autor: Discigil, Berent; King, R. Michael; Pearson, Paul J; Capellini, Verena K; Rodrigues, Alfredo José; Schaff, Hartzell V; Evora, Paulo Roberto Barbosa.
Título: Ondas ultra-sônicas de alta freqüência causam disfunção endotelial em artérias coronárias caninas epicárdicas / High-frequency ultrasonic waves cause endothelial dysfunction on canine epicardial coronary arteries
Fonte: Rev. bras. cir. cardiovasc;23(2):190-196, abr.-jun. 2008. ilus, graf.
Idioma: en; pt.
Resumo: OBJETIVO: Aplicação de energia por ultra-som pode facilitar a remoção da placa ateromatosa, mas o efeito desse procedimento em vasos próximos ainda é matéria de estudos experimentais. MÉTODOS: Para determinar se a energia ultra-sônica compromete a produção de óxido nítrico, segmentos de artérias coronárias caninas foram expostos a baixos (0-10 W) e altos (25 W) níveis de energia por 15 segundos, utilizando-se protótipo de aparelho para a realização de endarterectomia. Após exposição, segmentos das artérias coronarianas foram estudados em organ chambers. Para os ensaios farmacológicos foram utilizadas as seguintes drogas:difosfato de adenosina (ADP), acetilcolina (Ach) e fluoreto de sódio (NaF) para a avaliação do relaxamento dependente do endotélio. O nitroprussiato de sódio (NPS) e o isoproterenol foram utilizados para a avaliação do relaxamento independente do endotélio. RESULTADOS: A aplicação de alta energia ultra-sônica comprometeu o relaxamento dependente do endotélio induzido por ADP (10-9 - 10-4 M), Ach (10-9 - 10-4 M) e NaF (0,5 -9,5 mM) em artérias coronarianas epicárdicas. Entretanto, baixos valores de energia ultra-sônica não alteraram o relaxamento dependente do endotélio (nem o relaxamento máximo e nem a EC50) induzido pelos mesmos agonistas. O relaxamento da musculatura lisa vascular induzido por isoproterenol (10-9 - 10-5 M) ou NPS (10-9 - 10-6 M) não foi comprometido, tanto por baixos, quanto por altos níveis de energia ultra-sônica. CONCLUSÃO: Os experimentos demonstram que altas energias ultra-sônicas alteram a função endotelial. Entretanto, o ultra-som não altera a habilidade de relaxamento da musculatura lisa vascular de artérias caninas epicárdicas.

OBJECTIVE: Application of ultrasound energy by an endarterectomy probe can facilitate the removal of atheromatous plaque, but the effect of this procedure on surrounding vessel structure and function is still a matter of experimental investigations. METHODS: To determine whether ultrasound energy impairs the production of nitric oxide or damages vascular smooth muscle function, isolated canine epicardial coronary artery segments were exposed to either high (25 W) or low (0-10 W) ultrasonic energy outputs, for 15 seconds, using an endarterectomy device prototype. After exposure, segments of epicardial coronary artery were studied in organ chambers. The following drugs were used: adenosine diphosphate (ADP), acetylcholine (Ach) and sodium fluoride (NaF) to study endothelium-dependent relaxation and sodium nitroprusside (SNP) and isoproterenol to evaluate endothelium-independent relaxation. RESULTS: Application of high ultrasonic energy power impaired endothelium-dependent relaxation to ADP (10-9 - 10-4 M), Ach (10-9 - 10-4 M) and NaF (0.5 - 9.5 mM) in epicardial coronary arteries. However, low ultrasound energy output at the tip of the probe did not alter the endothelium-dependent relaxation (either maximal relaxation or EC50) to the same agonists. Vascular smooth muscle relaxation to isoproterenol (10-9 - 10-5 M) or SNP (10-9 - 10-6 M) was unaltered following exposure to either low or high ultrasonic energy outputs. CONCLUSION: These experiments currently prove that ultrasonic energy changes endothelial function of epicardial coronary arteries at high power. However, ultrasound does not alter the ability of vascular smooth muscle of canine epicardial coronary arteries to relax.
Descritores: Endotélio Vascular/lesões
Músculo Liso Vascular/lesões
Óxido Nítrico/biossíntese
Terapia por Ultrassom/efeitos adversos
Ultrassonografia de Intervenção/efeitos adversos
-Análise de Variância
Acetilcolina/farmacologia
Difosfato de Adenosina/farmacologia
Vasos Coronários/lesões
Vasos Coronários/metabolismo
Endarterectomia/métodos
Endotélio Vascular/efeitos dos fármacos
Endotélio Vascular/fisiopatologia
Isoproterenol/farmacologia
Modelos Animais
Músculo Liso Vascular/efeitos dos fármacos
Músculo Liso Vascular/fisiopatologia
Nitroprussiato/farmacologia
Fluoreto de Sódio/farmacologia
Ultrassonografia de Intervenção/métodos
Vasodilatação/efeitos dos fármacos
Vasodilatação/fisiologia
Limites: Animais
Cães
Feminino
Masculino
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-419192
Autor: Zapata, Mario; Dussaillant, Gastón; Fardella, Patricia; Conte, Guillermo; Cuneo, Marianela.
Título: La resistencia a aspirina en pacientes cardiovasculares chilenos es frecuente / Aspirin resistance is frecuent in chilean cardiovascular patients
Fonte: Rev. chil. cardiol;23(4):337-342, oct.-dic. 2004. tab.
Idioma: es.
Resumo: Introducción: La aspirina se usa frecuentemente para la prevención y tratamiento de eventos isquémicos cardiovasculares. Estudios en población anglosajona han mostrado que entre 5-9 por ciento de los pacientes presentan resistencia total a la acción antiplaquetaria de aspirina. Objetivos: Conocer la prevalencia de resistencia a aspirina en enfermos cardiovasculares chilenos. Evaluar factores asociados a la resistencia. Pacientes y Métodos: Se estudian 68 pacientes (21 mujeres, ± 10 años) con enfermedades cardiovasculares estables usuarios de aspirina (100-325 mg/día). Se evalúan variables clínicas y de coagulación básica. Se estudió la agregación plaquetaria con agregómetro óptico en plasma rico en plaquetas con 3 agonista. Se definió Resistencia Total a la aspirina como. 1) agregación (20 por ciento con ácido araquidónico y 2) agregación > 70 por ciento con ADP y/o colágeno. Resultados: Siete pacientes (10,3 por ciento, IC 95 por ciento = 4,2-20,1 por ciento) cumplieron ambos criterios y se consideraron como resistentes totales, 34 (50 por ciento, IC 95 por ciento = 37,6-62,4 por ciento) cumplieron con sólo un criterio y se consideraron como resistentes parciales, y los 27 pacientes restantes (39,7 por ciento, IC 95 por ciento = 28,0-52,3 por ciento) no cumplieron con ninguno de los criterios y se clasificaron como respondedores a AAS. Hubo una mayor frecuencia de fumadores (55,6 vs 23,7 por ciento) en los pacientes con Resistencia Total, pero no alcanzó significación estadística (p = 0,06). Conclusiones: La mayoría de los pacientes cardiovasculares presentan algún grado de resistencia al AAS y un 10,3 por ciento presentan Resistencia Total. No encontramos diferencias significativas entre los los pacientes con y sin resistencia total a aspirina.
Descritores: Aspirina/uso terapêutico
Resistência a Medicamentos
Doenças Cardiovasculares/tratamento farmacológico
-Difosfato de Adenosina
Ácido Araquidônico
Agregação Plaquetária
Aspirina/administração & dosagem
Aspirina/agonistas
Aspirina/sangue
Chile
Colágeno
Relação Dose-Resposta a Droga
Tempo de Sangramento/métodos
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Pessoa de Meia-Idade
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Id: lil-319815
Autor: Barcellos, C. K; Schetinger, M. R. C; Battastini, A. M; Silva, L. B; Dias, R. D; Sarkis, J. J. F.
Título: Inhibitory effect of cadmium acetate on synaptosomal ATP diphosphohydrolase (EC 3.6.1.5; apyrase) from adult rat cerebral cortex
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;27(5):1111-1115, May 1994.
Idioma: en.
Resumo: ATP diphosphohydrolase (EC 3.6.1.5; apyrase) is an enzyme that can promote ATP and ADP hydrolysis to AMP plus inorganic phosphate and depends on divalent cations such as Ca2+ or Mg2+. In previous papers we described this enzyme in the synaptosomal fraction from the central and peripheral nervous system. The present report examines whether cadmium acetate could affect the in vitro activity of the enzyme in the synaptosomal fraction from the cerebral cortex of adult male Wistar rats. Cadmium (Cd2+), a heavy metal with neurotoxic effects, inhibited the enzyme in a concentration-dependent manner. All concentrations tested (0.05-1.0 mM) significantly inhibited the hydrolysis of both substrates (ATP and ADP), with the exception of 0.05 mM on ATP hydrolysis. The kinetic data indicate a noncompetitive inhibition between the cations Cd2+ and Ca2+.
Descritores: Apirase
Cádmio
Córtex Cerebral/enzimologia
Sinaptossomos
-Difosfato de Adenosina
Adenosina Trifosfatases
Trifosfato de Adenosina
Apirase
Hidrólise
Cinética
Ratos Wistar
Especificidade por Substrato
Limites: Animais
Masculino
Ratos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Texto completo SciELO Brasil
Battastini, A. M. O
Bernard, E. A
Texto completo
Id: lil-299840
Autor: Casali, E. A; Silva, T. R. da; Gelain, D. P; Kaiser, G. R. R. F; Battastini, A. M. O; Sarkis, J. J. F; Bernard, E. A.
Título: Ectonucleotidase activities in Sertoli cells from immature rats
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;34(10):1247-1256, Oct. 2001. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: Sertoli cells have been shown to be targets for extracellular purines such as ATP and adenosine. These purines evoke responses in Sertoli cells through two subtypes of purinoreceptors, P2Y2 and P A1. The signals to purinoreceptors are usually terminated by the action of ectonucleotidases. To demonstrate these enzymatic activities, we cultured rat Sertoli cells for four days and then used them for different assays. ATP, ADP and AMP hydrolysis was estimated by measuring the Pi released using a colorimetric method. Adenosine deaminase activity (EC 3.5.4.4) was determined by HPLC. The cells were not disrupted after 40 min of incubation and the enzymatic activities were considered to be ectocellularly localized. ATP and ADP hydrolysis was markedly increased by the addition of divalent cations to the reaction medium. A competition plot demonstrated that only one enzymatic site is responsible for the hydrolysis of ATP and ADP. This result indicates that the enzyme that acts on the degradation of tri- and diphosphate nucleosides on the surface of Sertoli cells is a true ATP diphosphohydrolase (EC 3.6.1.5) (specific activities of 113 + or - 6 and 21 + or - 2 nmol Pi mg-1 min-1 for ATP and ADP, respectively). The ecto-5'-nucleotidase (EC 3.1.3.5) and ectoadenosine deaminase activities (specific activities of 32 + or - 2 nmol Pi mg-1 min-1 for AMP and 1.52 + or - 0.13 nmol adenosine mg-1 min-1, respectively) were shown to be able to terminate the effects of purines and may be relevant for the physiological control of extracellular levels of nucleotides and nucleosides inside the seminiferous tubules
Descritores: 5'-Nucleotidase
Nucleotídeos de Adenina
Células de Sertoli
-Adenosina Desaminase
Difosfato de Adenosina
Monofosfato de Adenosina
Trifosfato de Adenosina
Cromatografia Líquida de Alta Pressão
Hidrólise
Ratos Wistar
Limites: Animais
Masculino
Ratos
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Texto completo SciELO Brasil
Cavalcante, José Wilson S
Texto completo
Id: lil-269929
Autor: Cavalcante, José Wilson S; Santos Júnior, Paulo Roberto M; Menezes, Marcus G. F. de; Marques, Hedylamar Oliveira; Cavalcante, Leonardo Pessoa; Pacheco, Walewska S.
Título: Influência da cafeína no comportamento da pressäo arterial e da agregaçäo plaquetária / Influence of caffeine on blood pressure and platelet aggregation
Fonte: Arq. bras. cardiol;75(2):97-105, Aug. 2000. tab, graf.
Idioma: pt; en.
Resumo: OBJECTIVE: Studies have demonstrated that methylxanthines, such as caffeine, are A1 and A2 adenosine receptor antagonists found in the brain, heart, lungs, peripheral vessels, and platelets. Considering the high consumption of products with caffeine in their composition, in Brazil and throughout the rest of the world, the authors proposed to observe the effects of this substance on blood pressure and platelet aggregation. METHODS: Thirteen young adults, ranging from 21 to 27 years of age, participated in this study. Each individual took 750mg/day of caffeine (250mg tid), over a period of seven days. The effects on blood pressure were analyzed through the pressor test with handgrip, and platelet aggregation was analyzed using adenosine diphosphate, collagen, and adrenaline. RESULTS: Diastolic pressure showed a significant increase 24 hours after the first intake (p<0.05). This effect, however, disappeared in the subsequent days. The platelet aggregation tests did not reveal statistically significant alterations, at any time during the study. CONCLUSION: The data suggest that caffeine increases diastolic blood pressure at the beginning of caffeine intake. This hypertensive effect disappears with chronic use. The absence of alterations in platelet aggregation indicates the need for larger randomized studies.
Descritores: Pressão Sanguínea/efeitos dos fármacos
Cafeína/efeitos adversos
Estimulantes do Sistema Nervoso Central/efeitos adversos
Inibidores de Fosfodiesterase/efeitos adversos
Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos
-Difosfato de Adenosina/efeitos adversos
Monofosfato de Adenosina/metabolismo
Análise de Variância
Colágeno/efeitos adversos
Epinefrina/efeitos adversos
Hipertensão/induzido quimicamente
Receptores Purinérgicos P1/antagonistas & inibidores
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Adulto
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Texto completo SciELO Brasil
Texto completo
Id: lil-262672
Autor: Kettlun, A. M; Espinosa, V; Zanocco, A; Valenzuela, M. A.
Título: Studies on ATP-diphosphohydrolase nucleotide-binding sites by intrinsic fluorescence
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;33(7):725-9, July 2000. graf.
Idioma: en.
Conferência: Apresentado em: Annual Meeting, 28, Caxambu, 22-25 May 1999.
Projeto: FONDECYT; . Universidad de Chile.
Resumo: Potato apyrase, a soluble ATP-diphosphohydrolase, was purified to homogeneity from several clonal varieties of Solanum tuberosum. Depending on the source of the enzyme, differences in kinetic and physicochemical properties have been described, which cannot be explained by the amino acid residues present in the active site. In order to understand the different kinetic behavior of the Pimpernel (ATPase/ADPase = 10) and Desirée (ATPase/ADPase = 1) isoenzymes, the nucleotide-binding site of these apyrases was explored using the intrinsic fluorescence of tryptophan. The intrinsic fluorescence of the two apyrases was slightly different. The maximum emission wavelengths of the Desirée and Pimpernel enzymes were 336 and 340 nm, respectively, suggesting small differences in the microenvironment of Trp residues. The Pimpernel enzyme emitted more fluorescence than the Desirée apyrase at the same concentration although both enzymes have the same number of Trp residues. The binding of the nonhydrolyzable substrate analogs decreased the fluorescence emission of both apyrases, indicating the presence of conformational changes in the neighborhood of Trp residues. Experiments with quenchers of different polarities, such as acrylamide, Cs+ and I- indicated the existence of differences in the nucleotide-binding site, as further shown by quenching experiments in the presence of nonhydrolyzable substrate analogs. Differences in the nucleotide-binding site may explain, at least in part, the kinetic differences of the Pimpernel and Desirée isoapyrases.
Descritores: Difosfato de Adenosina/metabolismo
Apirase/metabolismo
Nucleotídeos/metabolismo
Solanum tuberosum/enzimologia
-Apirase/química
Apirase/isolamento & purificação
Césio/química
Césio/metabolismo
Iodo/química
Iodo/metabolismo
Isoenzimas/química
Solanum tuberosum/química
Espectrometria de Fluorescência
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Id: lil-228547
Autor: Schäfer, H. J; Schuhen, A.
Título: Photoaffinity labeling and photoaffinity crosslinking of enzymes
Fonte: Biol. Res;29(1):31-46, 1996.
Idioma: en.
Resumo: Photoaffinity labeling is a special type of chemical modification, where the label is activated by the action of light. This article presents the general principles and limitations of this technique, its application to the study of Micrococcus luteus ATPase and the use of photoaffinity crosslinking to probe the structure of this enzyme
Descritores: Difosfato de Adenosina/química
Trifosfato de Adenosina/química
Marcadores de Afinidade/química
Ativação Enzimática/fisiologia
Radicais Livres/química
Ligantes
Micrococcus luteus/enzimologia
Peptídeos/química
Conformação Proteica
ATPases Translocadoras de Prótons/química
-ATPases Translocadoras de Prótons/ultraestrutura
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-224912
Autor: Boveris, Alberto.
Título: Regulacion de la respiracion mitocondrial por ADP, O2 y NO / Regulation of mitochondrial respiration by ADP, O2 and NO
Fonte: Medicina (B.Aires);58(5,pt.2):559-60, 1998.
Idioma: es.
Conferência: Apresentado em: Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, 43 e Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología, 46, Mar del Plata, 26-29 nov. 1998.
Descritores: Difosfato de Adenosina
Depuradores de Radicais Livres
Mitocôndrias/fisiologia
Óxido Nítrico
Oxigênio
-Respiração Celular/fisiologia
Responsável: BR1.1 - BIREME



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