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Id: lil-317059
Autor: Prieto da Silva, Álvaro Rossan de Brandäo.
Título: Clonagem, expressäo e estudo de alguns cDNAs codificando proteínas estruturalmente relacionadas às alfa neurotoxinas da glândula de veneno da cobra coral Micrurus corallinus (Serpentes, Elapidae) / Cloning, expression and study of some cDNAs conding proteins structurally related to alpha-neurotoxins of venom gland coral snake Micrurus corallinus (Serpentes, Elapidae).
Fonte: Säo Paulo; s.n; 2002. 165 p. ilus, tab, graf.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de Säo Paulo. Instituto de Química para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: De uma bibliteca de cDNA da glândula de veneno da cobra coral brasileira Micrurus corallinus foi isolada uma seqüência denominada NXH8. Esta seqüência de cDNA apresenta similaridade estrutural com a família de toxinas de serpentes em "três dígitos" ricas em pontes dissulfeto. A subclasse melhor conhecida nesta família säo as alfa-neurotoxinas. Uma outra seqüência distinta, denominada NXH1 e suas isoformas NXH3 e NXH7, foram isoladas anteriormente, pertencem à mesma família de toxinas e estäo presentes na mesma biblioteca. Alguns resultados da caracterizaçäo da NXH1, säo utilizados neste estudo, em comparaçäo com NXH8. Algumas características estruturais tornam a seqüência NXH8 diferente da classe usual...
Descritores: Fosfolipases Tipo C
Venenos de Serpentes
Biblioteca Gênica
Neurotoxinas
-Bioensaio
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
Western Blotting
Análise de Sequência de DNA
Limites: Animais
Ratos
Responsável: BR40.1 - DBD - Divisão de Biblioteca e Documentacão do Conjunto das Químicas
BR40.1; 574.88, P949c


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Id: lil-466350
Autor: Pinto Júnior, Hermides; Bica, Claudia Giuliano; Palaci, Moisés; Dietze, Reynaldo; Basso, Luiz Augusto; Santos, Diógenes Santiago.
Título: Deteção de Mycobacterium tuberculosis em amostras clínicas por reação em cadeia da polimerase utilizando primers baseados na região intergênica plcB-plcC / Using polymerase chain reaction with primers based on the plcB-plcC intergenic region to detect Mycobacterium tuberculosis in clinical samples
Fonte: J. bras. pneumol;33(4):437-442, jul.-ago. 2007. ilus, tab.
Idioma: pt.
Projeto: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico; . Brasil. Ministério da Ciência e Tecnologia; . Financiadora de Estudos e Projetos; . Programa de Núcleos de Excelência.
Resumo: OBJECTIVE: To develop a system for the molecular diagnosis of tuberculosis by polymerase chain reaction (PCR), constructing primers based on the difference in gene organization of the intergenic region of phospholipase C (plcB-plcC region), which differentiates Mycobacterium tuberculosis from other mycobacteria. METHODS: A PCR product of the expected size (432 bp) was obtained from M. tuberculosis and M. africanum only. A total of 33 mycobacterial isolates and 273 clinical samples from patients suspected of having tuberculosis were examined. These were used in the comparative study of the PCR technique versus culture. RESULTS: For PCR versus culture, the data showed 93.8 percent accuracy (p < 0.0001), 93.1 percent sensitivity (CI: 88.7-96.0), and 96.4 percent specificity (CI: 96.1-99.4). The Kappa value (0.82) shows that there was a near-perfect concordance between the two tests. CONCLUSION: The use of the plcB-plcC region in PCR amplification was found to be an important and reliable tool for the specific diagnosis of tuberculosis in the samples analyzed.

OBJETIVO: Desenvolver um sistema para o diagnóstico molecular da tuberculose por reação em cadeia da polimerase, do inglês polymerase chain reaction (PCR), pela construção de primers baseados na diferença da organização de uma região intergênica da fosfolipase (phospholipase) C (região plcB-plcC), que diferencia Mycobacterium tuberculosis das outras micobactérias. MÉTODOS: Um produto de PCR com o tamanho esperado (432 pb) foi obtido somente de M. tuberculosis e M. africanum. Um total de 33 isolados micobacterianos e 273 amostras clínicas de pacientes com suspeita de tuberculose foram examinados. Estes foram submetidos ao estudo comparativo da técnica de PCR contra o cultivo. RESULTADOS: Os dados mostraram 93,8 por cento de exatidão para PCR contra o cultivo (p < 0,0001), 93,1 por cento de sensibilidade (IC: 88,7-96,0) e especificidade de 96,4 por cento (IC: 96,1-99,4). O valor de Kappa foi de 0,82, demonstrando um alinhamento perfeito para a verificação do grau de concordância entre os testes. CONCLUSÃO: O uso da região plcB-plcC para a amplificação por PCR é mostrado como uma ferramenta importante e de confiança para o diagnóstico específico de tuberculose nas amostras clínicas analisadas.
Descritores: Primers do DNA/química
Mycobacterium tuberculosis/genética
Reação em Cadeia da Polimerase/métodos
Tuberculose/diagnóstico
-Distribuição de Qui-Quadrado
Primers do DNA
Mycobacterium tuberculosis/enzimologia
Mycobacterium tuberculosis/isolamento & purificação
Valor Preditivo dos Testes
Análise de Sequência de DNA
Tuberculose/genética
Tuberculose/microbiologia
Fosfolipases Tipo C/genética
Limites: Humanos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-437828
Autor: Picanço-Diniz, D. L. W; Valença, M. M; Antunes-Rodrigues, J.
Título: Adenosine A1 receptor-mediated inhibition of in vitro prolactin secretion from the rat anterior pituitary
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;39(11):1493-1499, Nov. 2006. graf.
Idioma: en.
Projeto: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo; . Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico.
Resumo: In previous studies, we demonstrated biphasic purinergic effects on prolactin (PRL) secretion stimulated by an adenosine A2 agonist. In the present study, we investigated the role of the activation of adenosine A1 receptors by (R)-N6-(2-phenylisopropyl)adenosine (R-PIA) at the pituitary level in in vitro PRL secretion. Hemipituitaries (one per cuvette in five replicates) from adult male rats were incubated. Administration of R-PIA (0.001, 0.01, 0.1, 1, and 10 æM) induced a reduction of PRL secretion into the medium in a U-shaped dose-response curve. The maximal reduction was obtained with 0.1 æM R-PIA (mean ± SEM, 36.01 ± 5.53 ng/mg tissue weight (t.w.)) treatment compared to control (264.56 ± 15.46 ng/mg t.w.). R-PIA inhibition (0.01 æM = 141.97 ± 15.79 vs control = 244.77 ± 13.79 ng/mg t.w.) of PRL release was blocked by 1 æM cyclopentyltheophylline, a specific A1 receptor antagonist (1 æM = 212.360 ± 26.560 ng/mg t.w.), whereas cyclopentyltheophylline alone (0.01, 0.1, 1 æM) had no effect. R-PIA (0.001, 0.01, 0.1, 1 æM) produced inhibition of PRL secretion stimulated by both phospholipase C (0.5 IU/mL; 977.44 ± 76.17 ng/mg t.w.) and dibutyryl cAMP (1 mM; 415.93 ± 37.66 ng/mg t.w.) with nadir established at the dose of 0.1 æM (225.55 ± 71.42 and 201.9 ± 19.08 ng/mg t.w., respectively). Similarly, R-PIA (0.01 æM) decreased (242.00 ± 24.00 ng/mg t.w.) the PRL secretion stimulated by cholera toxin (0.5 mg/mL; 1050.00 ± 70.00 ng/mg t.w.). In contrast, R-PIA had no effect (468.00 ± 34.00 ng/mg t.w.) on PRL secretion stimulation by pertussis toxin (0.5 mg/mL; 430.00 ± 26.00 ng/mg t.w.). These results suggest that inhibition of PRL secretion after A1 receptor activation by R-PIA is mediated by a Gi protein-dependent mechanism.
Descritores: Adenosina/análogos & derivados
Adenosina/farmacologia
Adeno-Hipófise
Prolactina
Receptor A1 de Adenosina/metabolismo
Transdução de Sinais
-Toxina da Cólera/farmacologia
CMP Cíclico/farmacologia
Relação Dose-Resposta a Droga
Toxina Pertussis/farmacologia
Fosfolipases Tipo C/farmacologia
Adeno-Hipófise/efeitos dos fármacos
Prolactina/efeitos dos fármacos
Radioimunoensaio
Ratos Wistar
Limites: Animais
Masculino
Ratos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Texto completo SciELO Chile
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Id: lil-437520
Autor: Taylor, Colin W; Moneer, Zahid.
Título: Regulation of capacitative and non-capacitative Ca2+ entry in A7r5 vascular smooth muscle cells
Fonte: Biol. Res;37(4):641-645, 2004. ilus, graf.
Idioma: en.
Resumo: A capacitative Ca2+ entry (CCE) pathway, activated by depletion of intracellular Ca2+ stores, is thought to mediate much of the Ca2+ entry evoked by receptors that stimulate phospholipase C (PLC). However, in A7r5 vascular smooth muscle cells, vasopressin, which stimulates PLC, empties intracellular Ca2+ stores but simultaneously inhibits their ability to activate CCE. The diacylglycerol produced with the IP3 that empties the stores is metabolized to arachidonic and this leads to activation of nitric oxide (NO) synthase, production of NO and cyclic GMP, and consequent activation of protein kinase G. The latter inhibits CCE. In parallel, NO directly activates a non-capacitative Ca2+ entry (NCCE) pathway, which is entirely responsible for the Ca2+ entry that occurs in the presence of vasopressin. This reciprocal regulation of two Ca2+ entry pathways ensures that there is sequential activation of first NCCE in the presence of vasopressin, and then a transient activation of CCE when vasopressin is removed. We suggest that the two routes for Ca2+ entry may selectively direct Ca2+ to processes that mediate activation and then recovery of the cell.
Descritores: Cálcio/metabolismo
Canais de Cálcio/metabolismo
Fosfolipases Tipo C/metabolismo
Músculo Liso Vascular/metabolismo
Sinalização do Cálcio/fisiologia
Vasopressinas/metabolismo
-Linhagem Celular
GMP Cíclico/metabolismo
Óxido Nítrico/biossíntese
Limites: Animais
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Id: lil-430380
Autor: Soares, Maria Taciana Cavalcanti Vieira.
Título: Purificacão da ALPHA - Toxina (fosfolipase C) obtida a partir de Clostridium perfringens tipo A utilizando sistemas de duas fases aquosas de modo descontínuo e contínuo / Purification ALPHA - Toxin (phospholipase C) obtained by Clostridium perfringens type A using aqueous two-phase systems of discontinue and continue mode.
Fonte: Sao Paulo; s.n; 2005. 131 p. ilus, tab, graf.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Faculdade de Ciências Farmacêuticas para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: O objetivo deste trabalho foi a purificacao da toxina alfa produzida por Clostridium perfringens tipo A em sistemas de duas fases aquosas (SDFA) PEG/fosfato nos modos contínuo e descontínuo. Dois planejamentos fracionários seqüenciais foram aplicados para estudar a partição da toxina alfa em SDFA, em função de 4 variáveis: massa molar e concentração do PEG, concentração do fosfato e pH. Os melhores resultados para o fator de purificação, rendimento em atividade e coeficiente de partição foram obtidos com PEG 8000 g/mol (15 porcento, w/w), fosfato 20 porcento (w/w) e pH 8.0...
Descritores: Biotecnologia
Clostridium perfringens
Imunização
Microbiologia Industrial
Fosfolipases Tipo C
-Adsorção
Cromatografia em Gel
Eletroforese
Limites: Animais
Bovinos
Responsável: BR40.1 - DBD - Divisão de Biblioteca e Documentacão do Conjunto das Químicas
BR40.1; 660.63e, S676p


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Id: lil-419282
Autor: Niero, Cristina Viana.
Título: Análise de polimorfismos genéticos afetando os quatro genes de fosfolipase C (plc) em isolados clínicos do complexo Mycobacterium tuberculosis / Analysis of genetic polymorphisms affecting the four phospholipase C (plc) genes in Mycobacterium tuberculosis complex clinical isolates.
Fonte: São Paulo; s.n; 2004. [119] p.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade Federal de São Paulo. Escola Paulista de Medicina. Curso de Microbiologia e Imunologia para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: 0 genoma de Mycobacterium tuberculosis contém quarto genes relacionados, que apresentam significante similaridade com os genes de fosfolipase C de Pseudomonas aeruginosa. Três destes genes, plcA, plcB, e plcC são organizados em "tandem" (locus plcABC). 0 quarto gene, plcD, está localizado em uma região diferente. Este estudo investiga variações nos genes plcABC e pleD em isolados clínicos de M. tuberculosis (MTB), M. africanum (MAF) e M. canettii (MC). Polimorfismos genéticos foram examinados por PCR, Southern blot, seqüenciamento e RT-PCR. Sete isolados MTB contém inserções do elemento IS6110 nos genes plcA, plcC, ou plcD. Em 19 de 25 isolados de MTB examinados, foram identificadas deleções genômicas, resultando na perda parcial ou completa dos genes plcABC e/ou pleD. Deleção completa do gene plcD foi observada em um isolado de MAR Em cada caso, as deleções foram associadas à presença de uma cópia do elemento IS6110 e, em todos os casos a 156110 apresenta a mesma orientação. 0 mecanismo de deleção resultou da recombinação homóloga entre duas cópias de IS6110 e foi reconhecido em um grupo de isolados de MTB geneticamente relacionados. Cinco isolados de MTB apresentaram extenso polimorfismo nas regiões plcABC e plcD, com perda de expressão afetando os quarto genes plc. Fosfolipase C é um fator de virulência bem conhecido em bactérias. 0 papel preciso da fosfolipase C na patogenicidade de M. tuberculosis não está estabelecido, mas considerando o potencial que os genes plc podem ter na virulência do bacilo da tuberculose, o estudo de isolados provenientes de pacientes com tuberculose ativa contendo variações genéticas afetando estes genes podem fornecer indícios da significância da fosfolipase C na patogênese da tuberculose
Descritores: Genes
Mycobacterium tuberculosis
Polimorfismo Genético
Fosfolipases Tipo C
Responsável: BR1.2 - Biblioteca Central
BR1.2; 8531


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Id: lil-405521
Autor: Scarlata, S.
Título: The effect of hydrostatic pressure on membrane-bound proteins
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;38(8):1203-1208, Aug. 2005. ilus.
Idioma: en.
Conferência: Apresentado em: International Conference on High Pressure Bioscience and Biotechnology, 3, Rio de Janeiro, Sept. 26-30, 2004.
Resumo: Many cellular proteins are bound to the surfaces of membranes and participate in various cell signaling responses. Interactions between this group of proteins are in part controlled by the membrane surface to which the proteins are bound. This review focuses on the effects of pressure on membrane-associated proteins. Initially, the effect of pressure on membrane surfaces and how pressure may perturb the membrane binding of proteins is discussed. Next, the effect of pressure on the activity and lateral association of proteins is considered. We then discuss how pressure can be used to gain insight into these types of proteins.
Descritores: Pressão Hidrostática
Proteínas de Membrana/metabolismo
-Isoenzimas/química
Isoenzimas/metabolismo
Bicamadas Lipídicas/química
Bicamadas Lipídicas/metabolismo
Proteínas de Membrana/química
Fosfolipase C delta
Ligação Proteica
Eletricidade Estática
Fosfolipases Tipo C/química
Fosfolipases Tipo C/metabolismo
Limites: Humanos
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-316227
Autor: Fonovich de Schroeder, Teresa M.
Título: Mecanismos de acción de xenobióticos en ovocitos de anfibios / Xenobiotic mechanisms of action in amphibian oocytes
Fonte: Acta bioquím. clín. latinoam;36(2):269-278, jun. 2002.
Idioma: es.
Resumo: Comprender los procesos que determinan la toxicidad de diversas sustancias a nivel celular constituye un desafío para el desarrollo tecnológico actual. Los ovocitos de diversas especies son utilizados con distintos propósitos en investigación. El tamaño de los ovocitos de anfibios y la facilidad con que puede obtenerse un gran número de ellos como células aisladas, hacen de los mismos el sistema de elección para múltiples propósitos, tales como: estudios de las etapas tempranas de la reproducción, técnicas de fertilización in vitro, expresión y caracterización de receptores de membranas plasmática, mecanismos de acción de agonistas, vías metabólicas, etc. El objetivo del presente trabajo con ovocitos de sapo Bufo arenarum es estudiar los mecanismos de acción de sustancias xenobióticas a nivel bioquímico y molecular, en relación con la capacidad de éstas gametas de ser fertilizadas y avanzar a través de los estadios tempranos del desarrollo embrionario. Se ha trabajado con diversos biomarcadores que permitieron reconocer los mecanismos de toxicidad de compuestos organoclorados y más recientemente de algunos metales pesados. Se demostró que la activación de una fosfolipasa C específica por el Dieldrin provoca depleción de mediadores lipídicos y como consecuencia inhibición de la fertilización (desarrollo hasta 4-8 células). Actualmente se estudian los efectos del Zn sobre la fertilización y su probable relación con alteraciones en la actividad de enzimas de la vía de las pentosas, directamente ligada a los mecanismos de detoxificación en presencia de stress oxidativo. El estudio de los mecanismos de citotoxicidad de diversas sustancias resulta de gran utilidad cuando se lleva a cabo en gametas, porque permite también evaluar los efectos de dichas sustancias sobre la reproducción de la especie. Los ovocitos de anfibios son además células de gran interés, por su utilidad en el estudio de la citotoxicidad de una amplia variedad de contaminantes hídricos
Descritores: Exposição a Produtos Químicos
Dieldrin
Fertilização In Vitro
Oócitos
Xenobióticos/efeitos adversos
Zinco
-Anfíbios
Bufo arenarum
Poluentes Químicos da Água/efeitos adversos
Glucosefosfato Desidrogenase
Inseticidas Organoclorados
Biomarcadores
Reprodução
Testes de Toxicidade
Fosfolipases Tipo C
Limites: Animais
Responsável: AR144.1 - CIBCHACO - Centro de Información Biomedica del Chaco


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Id: lil-299016
Autor: Caruso Moreno, Enzo Fernando.
Título: La aspirina vs. extracción dental / Aspirin vs. tooth extraction
Fonte: Rev. Círc. Argent. Odontol;29(189):16-20, ago. 2001. ilus, tab.
Idioma: es.
Resumo: Se describen los efectos de la aspirina vinculada a la extracción dental simple, para lo cual se expone una revisión bibliográfica con fines didácticos. Se exponen los efectos fisiopatológicos, con el fin de conocer y así poder llegar a determinar un posible enfoque terapéutico
Descritores: Aspirina
Extração Dentária
Hemostasia
-Doenças Cardiovasculares
Complexo Glicoproteico GPIb-IX de Plaquetas/farmacologia
Interações Medicamentosas
Hemostasia
Hemostáticos/farmacologia
Inositol
Fosfolipases Tipo C
Vasoconstrição/fisiologia
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: AR29.1 - Biblioteca


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Texto completo SciELO Brasil
Carneiro, C. R. W
Leäo, S. C
Texto completo
Id: lil-273222
Autor: Matsui, T; Carneiro, C. R. W; Leäo, S. C.
Título: Evidence for the expression of native Mycobacterium tuberculosis phospholipase C: recognition by immune sera and detection of promoter activity
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;33(11):1275-82, Nov. 2000. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: The genome of Mycobacterium tuberculosis H37Rv contains three contiguous genes (plc-a, plc-b and plc-c) which are similar to the Pseudomonas aeruginosa phospholipase C (PLC) genes. Expression of mycobacterial PLC-a and PLC-b in E. coli and M. smegmatis has been reported, whereas expression of the native proteins in M. tuberculosis H37Rv has not been demonstrated. The objective of the present study was to demonstrate that native PLC-a is expressed in M. tuberculosis H37Rv. Sera from mice immunized with recombinant PLC-a expressed in E. coli were used in immunoblots to evaluate PLC-a expression. The immune serum recognized a 49-kDa protein in immunoblots against M. tuberculosis extracts. No bands were visible in M. tuberculosis culture supernatants or extracts from M. avium, M. bovis and M. smegmatis. A 550-bp DNA fragment upstream of plc-a was cloned in the pJEM12 vector and the existence of a functional promoter was evaluated by detection of ß-galactosidase activity. ß-Galactosidase activity was detected in M. smegmatis transformed with recombinant pJEM12 grown in vitro and inside macrophages. The putative promoter was active both in vitro and in vivo, suggesting that expression is constitutive. In conclusion, expression of non-secreted native PLC-a was demonstrated in M. tuberculosis
Descritores: Soros Imunes
Mycobacterium tuberculosis/enzimologia
Regiões Promotoras Genéticas/genética
Fosfolipases Tipo C/isolamento & purificação
-Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
Expressão Gênica
Immunoblotting
Camundongos Endogâmicos BALB C
Fosfolipases Tipo C/genética
Limites: Animais
Feminino
Camundongos
Responsável: BR1.1 - BIREME



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