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Id: lil-499695
Autor: Guija poma, Emilio; Soberón, Mercedes; Haak Mares, Hielke.
Título: Mecanismo de acción de las fosfatasas ácidas de bajo peso molecular / Mechanism of action of low molecular weight acid phosphatases
Fonte: An. Fac. Med. (Perú);68(4):356-362, oct.-dic. 2007. tab, graf.
Idioma: es.
Resumo: Las fosfatasas ácidas son enzimas ampliamente distribuidas en la naturaleza y tienen la propiedad de hidrolizar fosfomonoésteres a pH 5,0, liberando como productos de la reacción un alcohol y fosfato inorgánico. Cuando se compara los valores de kcat/Km de las fosfatasas de hígado, de bovino, alpaca y porcino, nos permite sugerir que estas enzimas tienen elevada afinidad por el sustrato p-nitrofenil fosfato. Los productos que se liberan durante la catálisis por fosfatasa ácida, muestran que el fenol o el p-nitrofenol se comportan como inhibidores de tipo no competitivo, mientras que el fosfato inorgánico muestra una inhibición de tipo competitiva. Para evidenciar laprobable formación de un complejo covalente en la secuencia catalítica, se utilizó diversos nucleófilos más eficientes que el agua, tales como metanol, etanol y glicerol. Las modificaciones que produjeron en los valores Km, Vmax y los productos liberados en la reacción sugieren la formación de un complejo enzima-fosfato. El pH afecta los valores de Km y Vmax de las fosfatasas ácidas, un análisis del comportamiento de estas enzimas en un rango de pH comprendido entre 3,8 y 6,8 sugieren que en el sitio activo existe un residuo de aminoácido con un valor pKa de 6,0. El uso del dietilpirocarbonato, un compuesto que selectivamente reacciona con el residuo histidina en las proteínas, inhibe completamente a estas fosfatasas. Así mismo, un experimento de cinética de inhibición múltiple realizado en presencia de fosfato inorgánico y dietilpirocarbonato permite calcular un valor Ki que es igual al obtenido en otras condiciones experimentales. En tal sentido, las fosfatasas ácidas de bajo peso molecular catalizarían las reacciones a través de un modelo de tipo uni biordenado, con la formación de un complejo covalente intermedio, y que el residuo histidina participaría directamente en la catálisis.

Acid phosphatases are enzymes widespread in nature that hydrolyze phosphomonoesters at pH 5,0; this reaction yields alcohol and inorganic phosphate. Comparison of bovine, alpaca and porcine liver phosphatases kcat/Km values suggests these enzymes have a high affinity for p nitrophenyl phosphate substrate. Products that are released during acid phosphatase catalysis show that phenol or p nitrophenol behave as non competitive inhibitors, whereas inorganic phosphate shows competitive inhibition. Different nucleophiles more efficient than water have been used, such as methanol, ethanol and glycerol, showing the probable formation of a covalent complex in the catalytic sequence. Modifications produced in Km and Vmax values as well as in the reaction released products suggest the development of an enzyme-phosphate complex. pH affects acid phosphatases Km and Vmax values. Behavioral analysis of these enzymes at 3,8 to 6,8 pH range suggests the location of a pKa 6,0 aminoacid residue in the active site. The use of a diethylpyrocarbonate compound which selectively reacts with protein histidine residues completely inhibits this kind of phosphatases. Also, multiple inhibition kinetic survey performed in presence of inorganic phosphate and diethylpyrocarbonate allows a Ki value calculation equal to that obtained in other experimental conditions. In this respect, low molecular weight acid phosphatases would catalyze reactions through a uni biordered model, forming an intermediate covalent complex; histidine residues would directly participate in the catalysis.
Descritores: Catálise
Fosfatase Ácida
Mecanismos Moleculares de Ação Farmacológica
Responsável: PE1.1 - Oficina Universitária de Biblioteca


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Id: lil-499688
Autor: Guija Poma, Emilio; Arauco, Fernando; Soberón, Mercedes; Haak Mares, Hielke.
Título: Efecto del glicerol sobre la catálisis por fosfatasa ácida de bajo peso molecular de hígado de alpaca (lama pacos) / Effect of glycerol on catalysis by low molecular weight acid phosphatase from alpaca liver (lama pacos)
Fonte: An. Fac. Med. (Perú);68(4):307-313, oct.-dic. 2007. graf.
Idioma: es.
Resumo: Objetivo: Determinar el efecto del glicerol sobre la hidrólisis del p-nitrofenil fosfato a pH 5,0 por fosfatasa ácida de bajo peso molecular de hígado de alpaca. Diseño: Estudio analítico experimental. Lugar: Centro de Investigación de Bioquímica y Nutrición, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Materiales: Se utilizó los reactivos químicos p-nitrofenil fosfato sal disódica, ácido acético glacial, glicerol, ácido tricloroacético, ácido sulfúrico, molibdato de amonio, ácido ascórbico, sulfato de amonio, sephadex G-75 (45-120), sulfoetil sephadex C-50 y etilendiaminotetraacético (EDTA). Métodos: Se determinó los parámetros cinéticos Km y Vmax utilizando como sustrato el p-nitrofenil fosfato, en presencia de concentraciones variables de glicerol. Así mismo, se determinó la velocidad de liberación de los productos de la reacción en función de la concentración de dicho nucleófilo. Principales medidas de resultados: Efecto del glicerol sobre la hidrólisis del p-nitrofenil fosfato. Resultados: El glicerol en concentraciones comprendidas entre 1,16 y 3,49 M incrementó linealmente la liberación del p-nitrofenol; en cambio, la formación del fosfato inorgánico -el segundo producto liberado- no se modificó. Así mismo, los valores de Km y Vmax se incrementaron linealmente dependientes de las concentraciones de glicerol, en un rango comprendido entre 0,58 y 2,32 M. Conclusiones: Un análisis de las modificaciones que ejerce el glicerol sobre los valores de Km y Vmax y la velocidad de liberación de los productos de la reacción permite sugerir un modelo en el que la fosfatasa ácida de bajo peso molecular de hígado de alpaca cataliza la hidrólisis de fosfomonoésteres a través de un mecanismo uni biordenado, con la formación de un complejo enzima-fosfato, que sería escindido por agua o un nucleófilo, como el glicerol; en este modelo a k2 le corresponde un valor mucho mayor que k3 y k4 N.

Objective: To determine the effect of glycerol on hydrolysis of p-nitrophenyl phosphate at pH 5,0 by low molecular weight acid phosphatase from alpaca liver. Design: Experimental analytical study. Setting: Biochemistry and Nutrition Research Center, Faculty of Medicine, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Peru. Materials: Disodic p-nitrophenyl phosphate salt, glacial acetic acid, glycerol, tricloroacetic acid, sulfuric acid, ammonium molibdate, ascorbic acid, ammonium sulphate, sephadex G 75 (45-120), sulpho ethyl sephadex C-50 and ethylene diaminotetraacetic (EDTA) chemical reactives. Methods: Both Km and Vmax kinetic parameters were determined with p-nitrophenyl phosphate as substrate in presence of different concentrations of glycerol. The rate of formation of products was determined as a function of the concentration of such nucleophile. Main outcome measures: Glycerol effect on p-nitrophenyl phosphate hydrolysis. Results: Glycerol linearly increased pnitrophenol release at concentrations between 1,16 and 3,49M. Instead, inorganic phosphate formation, the second product, was not modified. Also, Km and Vmax values increased linearly between 0,58 and 2,32 M depending on glycerol concentrations. Conclusions: Analysis of modifications induced by glycerol on Km and Vmax values as well as on liberation velocity of the reaction products suggests a model in which low molecular weight acid phosphatase isolated from alpaca liver catalyses phosphomonoesters hydrolysis through an uni biordered mechanism, with formation of an enzyme phosphate complex that will be splitted by water or a nucleophile such a glycerol; in this model, k2 corresponds to a much higher value than k3 or k4 N.
Descritores: Catálise
Cinética
Fosfatase Ácida
Glicerol
-Epidemiologia Experimental
Responsável: PE1.1 - Oficina Universitária de Biblioteca


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Texto completo SciELO Brasil
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Id: biblio-1088910
Autor: Rezende, A. F. S; Brum, A. A; Bezerra, F. S. B; Braite, D. C; Sá, G. L; Thurow, H. S; Seixas, F. K; Azevedo, V. A. C; Portela, R. W; Borsuk, S.
Título: Assessment of the acid phosphatase CP01850 from Corynebacterium pseudotuberculosis in DNA and subunit vaccine formulations against caseous lymphadenitis / Avaliação da fosfatase ácida recombinante CP01850 de Corynebacterium pseudotuberculosis em formulações vacinais de subunidade e de DNA contra a linfadenite caseosa
Fonte: Arq. bras. med. vet. zootec. (Online);72(1):199-207, Jan.-Feb. 2020. tab, graf, ilus.
Idioma: en.
Projeto: Foundation for Rio Grande do Sul State Research.
Resumo: The target cp1002_RS01850 from Corynebacterium pseudotuberculosis was used to construct a DNA and recombinant subunit vaccine against caseous lymphadenitis. Recombinant protein rCP01850 was expressed in Escherichia coli using pAE vector, and DNA vaccine was engineered with pTARGET vector. BALB/c mice were divided in five groups containing eight animals each, inoculated with: pTARGET/cp01850 as DNA vaccine (G1); rCP01850 plus Al (OH)3 as recombinant subunit vaccine (G2); pTARGET/cp01850 and a boost with rCP01850 plus Al (OH)3 (G3); pTARGET (G4); or Al (OH)3 (G5). Mice were inoculated and blood samples were collected on days 0, 21, and 42 for the analysis of total IgG, IgG1 and IgG2a by ELISA. In each group, five animals were challenged with Mic-6 C. pseudotuberculosis strain, and three were used for cytokine quantification by qPCR. Although no group has been protected by vaccines against lethal challenge, G2 showed an increase in the survival rate after challenge. Significantly higher levels of IL-4, IL-12, IFN-γ, total IgG, IgG1 and IgG2a were also detected for G2, evidencing a mixed Th1/Th2 immunological profile. In conclusion, despite no protection level provided by different vaccinal strategies using cp1002_RS01850 from C. pseudotuberculosis, G2 developed a Th1/Th2 immune response with an increase in survival rate.(AU)

O alvo cp1002_RS01850 de Corynebacterium pseudotuberculosis foi utilizado para construir uma vacina recombinante de subunidade e de DNA contra a linfadenite caseosa. A proteína recombinante rCP01850 foi expressa em Escherichia coli usando o vetor pAE, e a vacina de DNA foi construída com o vetor pTARGET. Camundongos BALB/c foram divididos em grupos de oito animais, inoculados com: pTARGET/cp01850 como vacina de DNA (G1); rCP01850 e Al (OH)3 como vacina recombinante de subunidade (G2); pTARGET/cp01850 e um boost com rCP01850 e Al (OH)3 (G3); pTARGET (G4); ou Al (OH)3 (G5). Os animais foram inoculados e amostras de sangue foram coletadas nos dias 0, 21, e 42 do experimento para a análise de IgG total, IgG1 e IgG2a por ELISA. De cada grupo, cinco animais foram desafiados com a cepa Mic-6 de C. pseudotuberculosis, e três foram usados para a quantificação de citocinas por qPCR. Apesar de nenhum grupo ter sido protegido pelas vacinas testadas contra o desafio letal, G2 apresentou taxa de sobrevida e níveis de IL-4, IL-12, IFN-γ, IgG total, IgG1 e IgG2a significativamente mais altos, evidenciando um perfil imunológico misto Th1/Th2. Conclui-se que apesar das diferentes estratégias vacinais utilizando cp1002_RS01850 de C. pseudotuberculosis não terem sido capazes de gerar proteção, G2 desenvolveu uma resposta Th1/Th2 e elevou a taxa de sobrevida.(AU)
Descritores: Fosfatase Ácida
Imunização Secundária/veterinária
Corynebacterium pseudotuberculosis
Linfadenite/imunologia
-Proteínas Recombinantes
Hidróxido de Alumínio
Limites: Animais
Camundongos
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


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Id: biblio-1049184
Autor: Miguel, Divino Levi; Silva, Eliane Maria Ribeiro da; Silva, Cristiane Figueira da; Pereira, Marcos Gervasio; Leite, Luiz Fernando Carvalho.
Título: Soil microbiological properties and enzyme activity in agroforestry systems compared with monoculture, natural regeneration, and native Caatinga / Propriedades microbiológicas e atividade enzimática do solo sob sistemas agroflorestais comparado com monocultura, regeneração natural e caatinga nativa
Fonte: Biosci. j. (Online);36(1):1-16, jan./feb. 2020. tab, ilus.
Idioma: en.
Resumo: The objective of this study was to evaluate the influence of agroforestry systems of different ages (AFS1: one-year old; AFS5: five-years old) on the biological attributes of soil; the following systems were used for comparison: a slash-and-burn (SBF) farming area, Caatinga which has been undergoing regeneration for 6 years (CaR6), and native Caatinga (NCa) in Brazil. Enzyme activity, abundance and composition of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF), and production of glomalin-related soil proteins (GRSP) were evaluated at soil depths of 0­0.05 m. AMF species composition in the AFS was more similar to that in the NCa than in the SBF and CaR6 systems. In the rainy season, sporulation was most abundant in the AFS-1, CaR6, and SBF systems, whereas GRSP concentrations were highest in the AFS5 during the dry season. Acid phosphatase and arylsulfatase enzyme activity was lower in the AFS1 soils than in the NCa and SBF soils (rainy period), and levels of ß-glucosidase and fluorescein diacetate hydrolysis in the AFS were equal to or higher than those in the NCa in the dry season but lower in the rainy season. AFS thus appear to promote the maintenance of soil biological quality, and may be more sustainable than SBF farming systems in the Brazilian Caatinga over the long term.

O objetivo do estudo foi avaliar a influência de sistemas agroflorestais (AFS1: um ano de idade; AFS5: cinco anos de idade), nos atributos biológicos do solo usando como referência, uma área de agricultura de corte e queima (SBF), Caatinga em regeneração há 6 anos (CaR6), e Caatinga nativa (NCa), in Brasil. A atividade enzimática, a abundância e composição dos fungos micorrízicos arbusculares (AMF), e a produção de proteína do solo relacionada à glomalina (GRSP) foram avaliados, na profundidade de 0-5 cm do solo. A composição das espécies de AMF nos AFS foi mais semelhante a observada na NCa, do que os sistemas SBF e CaR6. Na estação chuvosa, a esporulação foi mais abundante em AFS-1, CaR6 and SBF quando comparada as outras áreas, enquanto a GRSP apresentou maiores teores no AFS5 no período seco. AFS1 apresentou atividade da fosfatase ácida e arilsulfatase inferiores tanto a NCa quanto a SBF, no período chuvoso. No período seco, a atividade de ß-glicosidase e a hidrólise do diacetato de fluoresceína (FDA) na AFS foram iguais ou superiores a Nca, mas menor no período chuvoso. Verifica-se que os AFS são potenciais para a manutenção da qualidade biológica do solo, podendo, em longo prazo, serem mais sustentáveis que a SBF, em ambiente de Caatinga.
Descritores: Arilsulfatases
Solo
Fosfatase Ácida
Glicosídeo Hidrolases
Responsável: BR396.1 - Biblioteca Central


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Id: biblio-877880
Autor: Valencia, Carlos(edt); Franco, Manuel(edt); Pustovrh, Carolina(edt); Salazar, Liliana(edt).
Título: Determinación de la fosfatasa ácida tartrato resistente en muestras óseas decalcificadas de cerdo Sus domesticus / Determining tartrate-resistant acid phosphatase in decalcified bone samples pig Sus domesticus
Fonte: Rev. estomat. salud;22(1):15-19, 20140000.
Idioma: es.
Resumo: Introducción: Las técnicas de Inmuno - histoquímica son hoy en día una de las herramientas más importantes en el diag- nostico histopatológico, sin embargo la manipulación de las muestras y el método de procesamiento puede llevar a cambios en la estructura de las proteínas que llevan a enmascaramiento de antígenos, dificultan - do la identificación con anticuerpos. Entre los diferentes métodos de recuperación an- tigénico propuestos en la literatura, el de calor húmedo con Vaporera ha tenido gran aceptación por su simplicidad, control y bajo costo. Objetivo: En el presente trabajo se propone un protocolo de recuperación antigénica con calor húmedo, en muestras de tejido óseo que ya habían sido previamente fijadas en formaldehido, decalcificadas con etilen - diaminotetraacético (EDTA), e incluidas en parafina. Materiales y método: Se utilizaron mues- tras de tejido óseo de cerdo que habían sido preparadas con técnicas convencionales, pertenecientes a la colección del laboratorio de patología de la Universidad del Valle. Se realizó refijacion en glutaraldehido y se empleó una vaporera para intensificar la exposición de antígenos. Se utilizó como anticuerpo primario el anti TRAP de DEKO®, monoclonal, originado en ratón, y como secundario el KIT UltraVision LP Large Volume Detection System HRP Polymer ®. Resultados: En todas las muestras expues- tas al anticuerpo primario en diluciones 1:20 y 1:40 se observó inmunotinción de células mononucleares compatibles con pre osteoclastos, y células gigantes mul - tinucleadas compatibles con osteoclastos. Conclusiones: La recuperación antigénica con calor húmedo es un método confiable en la recuperación antigénica de muestras óseas fijadas con formaldehido...(Au)

ntroduction: Nowadays, Immunohisto - chemistry are one of the most important techniques in the histopathological diagno - sis. Despite of handling and processing cau - tions, both of them may generate changes in the protein structure, masking antigens, preventing antibody identification. Among different antigen retrieval methods propo- sed by the literature, the humid heat with Steamer has been widely accepted for its simplicity, control and low cost. Objective: In this paper a protocol for humid heat antigen retrieval use in bone tissue samples that had been previously fixed in formaldehyde, decalcified with ethylenediaminetetraacetic (EDTA ), and embedded in paraffin is proposed. Materials and methods: Samples of pig's bone that had been prepared with conven- tional techniques, from the collection of the pathology laboratory of the University of Valle were used. New fixed process was performed in glutaraldehyde and a steamer was used to enhance antigen exposure. The anti-TRAP DEKOs ®, mouse monoclonal antibody was used as primary antibody, and the KIT UltraVision LP Large Volume Detection System HRP Polymer ® was used as a secondary antibody. Results: In all samples exposed to primary antibody in 1:20 and 1:40 dilutions immu - nostaining mononuclear cells compatible with preosteoclasts were observed; im - munostaining multinucleated giant cells consistent with osteoclasts were described. Conclusions: Humid heat for antigenic recovery is a reliable method for the reco- very of bone antigen samples fixed with formaldehyde...(Au)
Descritores: Fosfatase Ácida
Anticorpos
Odontologia
Histocitoquímica
Imuno-Histoquímica
Monoéster Fosfórico Hidrolases
-Fosfatase Alcalina
Receptores de Trombina
Responsável: CO624.9


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Camargo, Elisa Souza
Tanaka, Orlando Motohiro
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Id: lil-732433
Autor: Araujo, Cristiano Miranda de; Johann, Aline Cristina Batista Rodrigues; Camargo, Elisa Souza; Tanaka, Orlando Motohiro.
Título: The effects of binge-pattern alcohol consumption on orthodontic tooth movement
Fonte: Dental press j. orthod. (Impr.);19(6):93-98, Nov-Dec/2014. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: OBJECTIVE: This study aimed to assess tissue changes during orthodontic movement after binge-pattern ethanol 20% exposure. METHODS: Male Wistar rats (n = 54) were divided into two groups. The control group (CG) received 0.9% saline solution, while the experimental group (EG) received 20% ethanol in 0.9% saline solution (3 g/kg/day). On the 30th day, a force of 25 cN was applied with a nickel-titanium closed coil spring to move the maxillary right first molar mesially. The groups were further divided into three subgroups (2, 14 and 28 days). Tartrate-resistant acid phosphatase and picrosirius were used to assess bone resorption and neoformation, respectively. Data were compared by two-way ANOVA, Tukey's HSD, Games-Howell and chi-square test. Significance level was set at 5%. RESULTS: There was a decrease in the number of osteoclasts in EG at day 28. The percentage of collagen showed no interaction between group and time. CONCLUSION: Binge-pattern 20% ethanol promoted less bone resorption at the end of tooth movement, thereby suggesting delay in tooth movement. .

OBJETIVO: objetivou-se avaliar as alterações teciduais decorrentes da administração de etanol a 20% no padrão binge, durante o movimento ortodôntico. MÉTODOS: foram utilizados ratos Wistar machos (n = 54), divididos em dois grupos, sendo Grupo Controle (GC), com administração de soro fisiológico a 0,9%; e Grupo e Experimental (GE), com administração de etanol a 20% em soro fisiológico a 0,9%, no volume de 3g/kg/dia. Após o 30º dia de administração, foi aplicada força de 25cN com mola fechada de níquel-titânio para mover o primeiro molar superior direito para mesial. Os grupos foram subdivididos nos subgrupos 2, 14 e 28 dias, correspondendo ao número de dias de movimentação dentária. Utilizou-se as colorações de fosfatase ácida-tartarato resistente e picrosírius para avaliar reabsorção óssea e neoformação óssea, respectivamente. Os dados foram comparados por ANOVA a dois critérios, Tukey HSD e Games-Howell, ao nível de significância de 5%. RESULTADOS: verificou-se diminuição no número de osteoclastos no GE II no 28º dia. A percentagem de colágeno não demonstrou alteração na interação grupo x tempo. CONCLUSÕES: o etanol no padrão binge a 20% promoveu menor reabsorção óssea no final da movimentação dentária, sugerindo atraso na movimentação dentária. .
Descritores: Bebedeira/complicações
Técnicas de Movimentação Dentária/métodos
-Compostos Azo
Fosfatase Ácida/análise
Processo Alveolar/patologia
Reabsorção Óssea/patologia
Reabsorção Óssea/fisiopatologia
Contagem de Células
Corantes
Colágeno Tipo I/análise
Ligas Dentárias/química
Isoenzimas/análise
Dente Molar/patologia
Níquel/química
Fios Ortodônticos
Osteoclastos/patologia
Osteogênese/fisiologia
Ligamento Periodontal/patologia
Distribuição Aleatória
Ratos Wistar
Fatores de Tempo
Titânio/química
Técnicas de Movimentação Dentária/instrumentação
Limites: Animais
Masculino
Ratos
Tipo de Publ: Estudo Comparativo
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-732258
Autor: Pinheiro, Sérgio Luiz; Silva, Josianne Neres da; Gonçalves, Rafael Orro; Villalpando, Karina Teixeira.
Título: Manual and Rotary Instrumentation Ability to Reduce Enterococcus faecalis Associated with Photodynamic Therapy in Deciduous Molars
Fonte: Braz. dent. j;25(6):502-507, Nov-Dec/2014. tab.
Idioma: en.
Resumo: This aim of this study was to assess the ability of manual or rotary instrumentation associated with photodynamic therapy (PDT) to reduce Enterococcus faecalis using three combinations of light/photosensitizers: toluidine blue O/laser, fuchsin/halogen light and fuchsin/LED. Twenty deciduous molars were selected and contaminated with Enterococcus faecalis (McFarland 0.5 scale). Working length determination was performed by visual method. The teeth were randomly divided into two groups: G1 (n=10): manual instrumentation (Kerr-type files) and G2 (n=10): rotary instrumentation (ProTaper system). The bacteria were collected three times using sterile paper cones compatible with the anatomic diameter of the root canal for 30 s before and after instrumentation and after PDT. The samples were diluted in peptone water, seeded on blood agar plates and incubated in an oven at 37 °C for colony-forming units counting. The decrease of E. faecalis counts after instrumentation and after PDT was compared using the Wilcoxon test, t-test and Kruskal Wallis test. A significant reduction of E. faecalis occurred after manual and rotary instrumentation and after PDT using the three combinations of light/photosensitizer (p<0.05). It may be concluded that both rotary and manual instrumentation reduced E. faecalis. Fuchsin with halogen light or LED irradiation and toluidine blue O with laser irradiation can be used to reduce E. faecalis in root canals of primary molars. PDT can be used as an adjuvant to conventional endodontic treatment.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a redução de Enterococcus faecalis após instrumentação manual ou rotatória associada à terapia fotodinâmica (PDT) utilizando 3 combinações luz/fotossensibilizante: azul de toluidina O/laser, fucsina/luz halógena e fucsina/LED. Foram selecionados 20 molares decíduos que foram contaminados com Enterococcus faecalis (escala 0,5 de McFarland). A odontometria foi feita através do método visual. Os dentes foram divididos aleatoriamente em dois grupos: G1 (n=10): instrumentação manual (limas tipo Kerr) e G2 (n=10): instrumentação rotatória (sistema ProTaper). Foram realizadas coletas com cone de papel estéril compatível com o diâmetro anatômico do canal durante 30 s antes e após a instrumentação e a PDT. As amostras foram diluídas em água peptonada, semeadas em placas de agar-sangue e incubadas em estufa a 37 °C para contagem das unidades formadoras de colônias. As comparações antes da redução de E. faecalis após a instrumentação e após a realização da PDT foram realizadas pelo teste de Wilcoxon, teste t e Kruskal Wallis. Houve redução significante de E. faecalis após a instrumentação manual ou rotatória e após realização da PDT com as três combinações de luz/fotossensibilizante (p<0,05). Pode-se concluir que a instrumentação rotatória e manual acarretou a redução de E. faecalis. A fucsina irradiada com luz halógena ou led e o azul de toluidina irradiado com laser podem ser utilizados para redução de E. faecalis do sistema de canais radiculares de molares decíduos. A terapia fotodinâmica pode ser utilizada como coadjuvante ao tratamento endodôntico convencional.
Descritores: Fosfatase Ácida/biossíntese
Catepsina B/biossíntese
Leucina/análogos & derivados
Leupeptinas/farmacologia
Melanoma Experimental/enzimologia
Oligopeptídeos/farmacologia
Pepstatinas/farmacologia
Peptídeo Hidrolases/biossíntese
Inibidores de Proteases/farmacologia
-Indução Enzimática
Leucina/farmacologia
Frações Subcelulares/efeitos dos fármacos
Frações Subcelulares/enzimologia
Células Tumorais Cultivadas
Limites: Animais
Camundongos
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-728811
Autor: Lione, Viviane de Oliveira Freitas; Santos, Michelle Hanthequeste Bittencourt dos; Oliveira, Jessica Silva Santos de; Mattos-Guaraldi, Ana Luiza; Nagao, Prescilla Emy.
Título: Interferon-γ inhibits group B Streptococcus survival within human endothelial cells
Fonte: Mem. Inst. Oswaldo Cruz;109(7):940-943, 11/2014. graf.
Idioma: en.
Resumo: Endothelial dysfunction is a major component of the pathophysiology of septicaemic group B Streptococcus (GBS) infections. Although cytokines have been shown to activate human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), the capacity of interferon (IFN)-γ to enhance the microbicidal activity of HUVECs against GBS has not been studied. We report that the viability of intracellular bacteria was reduced in HUVECs activated by IFN-γ. Enhanced fusion of lysosomes with bacteria-containing vacuoles was observed by acid phosphatase and the colocalisation of Rab-5, Rab-7 and lysosomal-associated membrane protein-1 with GBS in IFN-γ-activated HUVECs. IFN-γ resulted in an enhancement of the phagosome maturation process in HUVECs, improving the capacity to control the intracellular survival of GBS.
Descritores: Anti-Infecciosos/farmacologia
Células Endoteliais da Veia Umbilical Humana/microbiologia
Interferon gama/farmacologia
Viabilidade Microbiana/efeitos dos fármacos
Infecções Estreptocócicas/tratamento farmacológico
Streptococcus agalactiae/efeitos dos fármacos
-Fosfatase Ácida/metabolismo
Aderência Bacteriana/efeitos dos fármacos
Endocitose
Células Endoteliais da Veia Umbilical Humana/metabolismo
Lisossomos/efeitos dos fármacos
Cultura Primária de Células
Fagossomos/efeitos dos fármacos
Análise de Sobrevida
Infecções Estreptocócicas/prevenção & controle
Limites: Humanos
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Texto completo SciELO Brasil
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Id: lil-709449
Autor: Sun, S.X.; Guo, H.H.; Zhang, J.; Yu, B.; Sun, K.N.; Jin, Q.H..
Título: BMP-2 and titanium particles synergistically activate osteoclast formation
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;47(6):461-469, 06/2014. graf.
Idioma: en.
Resumo: A previous study showed that BMP-2 (bone morphogenetic protein-2) and wear debris can separately support osteoclast formation induced by the receptor activator of NF-κB ligand (RANKL). However, the effect of BMP-2 on wear debris-induced osteoclast formation is unclear. In this study, we show that neither titanium particles nor BMP-2 can induce osteoclast formation in RAW 264.7 mouse leukemic monocyte macrophage cells but that BMP-2 synergizes with titanium particles to enhance osteoclast formation in the presence of RANKL, and that at a low concentration, BMP-2 has an optimal effect to stimulate the size and number of multinuclear osteoclasts, expression of osteoclast genes, and resorption area. Our data also clarify that the effects caused by the increase in BMP-2 on phosphorylated SMAD levels such as c-Fos expression increased throughout the early stages of osteoclastogenesis. BMP-2 and titanium particles stimulate the expression of p-JNK, p-P38, p-IkB, and P50 compared with the titanium group. These data suggested that BMP-2 may be a crucial factor in titanium particle-mediated osteoclast formation.
Descritores: /farmacologia
BONE MORPHOGENETIC PROTEIN TEMEFOS/farmacologia
Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos
Macrófagos/efeitos dos fármacos
Osteoclastos/metabolismo
Ligante RANK/farmacologia
Titânio/farmacologia
-Fosfatase Ácida/farmacologia
Western Blotting
Reabsorção Óssea/metabolismo
Linhagem Celular Tumoral
Sobrevivência Celular
Sinergismo Farmacológico
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
Expressão Gênica
Isoenzimas/farmacologia
Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
Proteínas Smad/metabolismo
Fator de Necrose Tumoral alfa/isolamento & purificação
Limites: Animais
Camundongos
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-682404
Autor: Brazilian Journal of Medical and Biological Research; Wen, Z.; Liao, Q.; Hu, Y.; You, L.; Zhou, L.; Zhao, Y..
Título: A spheroid-based 3-D culture model for pancreatic cancer drug testing, using the acid phosphatase assay
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;46(7):634-642, ago. 2013. graf.
Idioma: en.
Resumo: Current therapy for pancreatic cancer is multimodal, involving surgery and chemotherapy. However, development of pancreatic cancer therapies requires a thorough evaluation of drug efficacy in vitro before animal testing and subsequent clinical trials. Compared to two-dimensional culture of cell monolayer, three-dimensional (3-D) models more closely mimic native tissues, since the tumor microenvironment established in 3-D models often plays a significant role in cancer progression and cellular responses to the drugs. Accumulating evidence has highlighted the benefits of 3-D in vitro models of various cancers. In the present study, we have developed a spheroid-based, 3-D culture of pancreatic cancer cell lines MIAPaCa-2 and PANC-1 for pancreatic drug testing, using the acid phosphatase assay. Drug efficacy testing showed that spheroids had much higher drug resistance than monolayers. This model, which is characteristically reproducible and easy and offers rapid handling, is the preferred choice for filling the gap between monolayer cell cultures and in vivo models in the process of drug development and testing for pancreatic cancer.
Descritores: Fosfatase Ácida/metabolismo
Ensaios de Seleção de Medicamentos Antitumorais/métodos
Neoplasias Pancreáticas/tratamento farmacológico
Esferoides Celulares/efeitos dos fármacos
-Antimetabólitos Antineoplásicos/administração & dosagem
Sobrevivência Celular
Técnicas de Cultura de Células/métodos
Linhagem Celular Tumoral/efeitos dos fármacos
Linhagem Celular Tumoral/enzimologia
Desoxicitidina/administração & dosagem
Desoxicitidina/análogos & derivados
Fluoruracila/administração & dosagem
Neoplasias Pancreáticas/enzimologia
Esferoides Celulares/enzimologia
Limites: Humanos
Responsável: BR1.1 - BIREME



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