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Texto completo SciELO Chile
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Id: lil-551372
Autor: Valter de Oliveira, Luiz Felipe; Wallau, Gabriel da Luz; Loreto, Elgion Lucio Silva.
Título: Isolation of high quality DNA: a protocol combining “rennet” and glass milk
Fonte: Electron. j. biotechnol;12(2):11-12, Apr. 2009. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: High quality DNA is essential for many molecular biology techniques. However, the reagents used for that purpose usually are expensive and/or cause a high environmental impact. Here, we describe two alternative protocols that use inexpensive reagents and are not hazardous to the environment. The first protocol utilizes the enzyme chymosin, normally used as “rennet” in cheese production and which is easily obtained on the commercial market. The second protocol uses “rennet DNA extraction protocol” combined with the DNA binding capacity of glass powder (glass milk), which can easily be “home made”. The first protocol is used when a high yield of DNA is needed, whereas the second protocol is used for production of a higher quality DNA, being able to work with sparse samples.
Descritores: Quimosina
DNA
Leite/enzimologia
Leite/metabolismo
Leite/normas
-Protocolos/análise
Protocolos/economia
Queijo/economia
Queijo/normas
Reação em Cadeia da Polimerase
Southern Blotting
Tipo de Publ: Relatório Técnico
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Id: lil-506974
Autor: Sanchez Henao, C; Escobar Kousen, J; Rodriguez de Stouvenel, A.
Título: Características de la producción de la renina microbiana de Mucor miehei en un proceso de alimentación por lote / Mucor miehei's microbial rennin production characteristics in a fed-batch proccess
Fonte: Rev. colomb. biotecnol;2(1):28-34, jul. 1999. tab, graf.
Idioma: es.
Resumo: El moho zigomiceto Mucor miehei produce una proteasa de tipo ácido (EC: 3.4.23.10) semejante a la renina o cuajo de ternero. Se ha encontrado que la síntesis de la enzima está parcialmente asociada al crecimiento, y que altas velocidades de consumo de glucosa dan como resultado una mayor producción de la renina microbiana (Escobar and Barnett, 1993, 1995). Durante el proceso de produc-ción de la proteasa se observó que cuando la velocidad de producción de la misma aún es alta, los niveles de glucosa alcanzan a ser mínimos, niveles que se consideraron como una de las posibles causas de la finalización de la produc-ción de la enzima (Escobar and Barnett, 1993,1995). Frente a esta limitación fisiológica, se planteó un proceso de dos etapas para mejorar la producción de la proteasa y superar el fenómeno mencionado.La primera consistió en estudiar la relación entre la pro-ducción de la renina y el consumo de azúcares (especial-mente la glucosa) en el transcurso de la fermentación, para determinar aquellos momentos en los que la rata de pro-ducción de enzima es alta y la concentración de glucosa se encuentra cercana a cero. En la segunda etapa se aplicó un proceso de alimentación por lote de glucosa durante esos momentos, para observar si la producción de la enzi-ma aumentaba.Se obtuvo un valor máximo de actividad enzimática (AE) de 165 unidades coagulantes (UC)/ml para el proceso en cochada y una velocidad de consumo de azúcares prome-dio de 0,1813 g de glucosa/1/h. Con base en los resultadosanteriores se determinaron condiciones para el proceso de alimentación por lote de glucosa, tales como veloci-dad, tiempo y concentración. Las condiciones para el pro-ceso de alimentación por lote fueron un flujo de 0,06 ml/ min y una concentración de glucosa de 50 g/1 sin obtener-se aumento considerable en el valor de la AE (95 UC/ml). Se obtuvo una concentración celular promedio de 11 g/1 y un rendimiento del nutriente en masa celular (YX/SA) pro-medio de 0,3 g de células/g...
Descritores: Queijo
Quimosina
Endopeptidases/análise
Tipo de Publ: Estudo de Avaliação
Estudo Comparativo
Responsável: CO326 - Departamento de Biología


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Id: lil-124253
Autor: Narciandi, R. E; Torrens, I; Santos, A; Morales, J; Herrera, L.
Título: Producción de proquimisina bovina recombinante en Saccharomyces cerevisiae utilizando cultivo incrementado / Production of recombinant calf prochymosin in Sacharomyces cerevisiae using Fed-baytch culture
Fonte: Biotecnol. apl;8(3):319-25, 1991. ilus, tab.
Idioma: es.
Resumo: Se examinó el efecto de las condiciones de cultivo en la producción de la proteina fusionada SOD-proquimosina sintetizada en Sacharomyces cerevisiae bajo el control del fragmento corto del promotor que regula la síntesis de la enzima gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa. El proceso fermentativo de 5 y 50 l de cultivo, obteniéndose resultados similares en ambas escalas. Cuando las células son cultivadas en medio selectivo suplementado con sacarosa al 5 % e hidrolizado de caseina al 2 % utilizando un sistema batch, la concentración relativa de SOD-proquimosina es incrementada 1,7 veces, mientras que la utilización del cultivo incrementado aumenta aproximadamente 4 veces la masa celular y eleva significativamente la producción de la proteina recombinante a un nivel del 2 % del total de la proteina celular
Descritores: Quimosina
Meios de Cultura
Saccharomyces cerevisiae
Responsável: CU1 - INFOMED - Centro Nacional de Información de Ciencias Médicas


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Id: lil-111958
Autor: Narciandi, R. E; Rodríguez, E; Torrens, I; Santos, A; Morales, J; Herrera, L.
Título: Solubilización y renaturalización de la fusión superóxido dismutasa humana y proquimosina de ternero sintetizada en Saccharomyces cerevisiae / Solubilization and renaturation of human superoxide dismutase and call prochymosin gen fusion synthetized in saccharomyces cerevisiae
Fonte: Biotecnol. apl;8(2):222-31, mayo-ago. 1991. ilus.
Idioma: es.
Resumo: La proquimosina de ternero fusionada al gen de la superóxido dismutasa humana (SOD) fue sintetizada en forma insoluble en Saccharomyces cerevisiae. Las condiciones que permiten la solubilización de la proteína fueron investigada, siendo la desnaturalización el proceso esencial mediante el cual es solubilizado más del 90 % del producto recombinante. Se estudiaron diferentes parámetros que intervienen en el proceso de renaturalización de la SOD proquimosina, describiéndose un procesamiento mediante el cual es posible recuperar el 25 % de la proquimosina soluble en su forma nativa. Más del 98 % de la proteína fue activada, obteniéndose un preparado enzimático cuya función biológica fue determinada mediante el proceso de coagulaciónm de la leche
Descritores: Quimosina
Saccharomyces cerevisiae
Superóxido Dismutase
-Cuba
Limites: Bovinos
Responsável: CU1 - INFOMED - Centro Nacional de Información de Ciencias Médicas


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Id: lil-93468
Autor: Morales, J; Muzio, V; Torrens, I. C; Jiménez, V; Silva, A; Santos, A; Quiñones, Y; Narciandi, E; Herrera, L. S.
Título: Expresión del gen de la quimosina en E. coli / Expression of the chymosin gene in E. coli
Fonte: Interferón biotecnol;6(3):242-50, sept.-dic. 1989. ilus.
Idioma: es.
Resumo: En este trabajo se describe la clonación y la expresión en E. coli del gen de la quimosina, enzima de importancia industrial para la producción de quesos. Los clones se identificaron analizando una genoteca de ADN complementario al ARN poli (A) proveniente del estómago de ternero, utilizando como sonda dos oligonucléotidos sintéticos. La región del gen, codificante a la proquimosina, fue expresada bajo el control del promotor triptófano. Se alcanzó una expresión equivalente al 10 % de la proteína total. La proteína fue detectada insoluble y formando cuerpos de inclusión. La enzima producida demostró tener propiedades semejantes a la natural.
Descritores: Quimosina/genética
Clonagem Molecular
DNA Recombinante
RNA Polimerases Dirigidas por DNA
Expressão Gênica
Biblioteca Gênica
Responsável: CU1 - INFOMED - Centro Nacional de Información de Ciencias Médicas



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