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Id: lil-494549
Autor: Biazio, Gleison Ricardo de; Leite, Gabriela Guimarães Sousa; Tessmann, Dauri José; Barbosa-Tessmann, Ione Parra.
Título: A new PCR approach for the identification of Fusarium graminearum / Um novo protocolo de PCR para a identificação de Fusarium graminearum
Fonte: Braz. j. microbiol;39(3):554-560, July-Sept. 2008. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: The main objective of this work was to develop a PCR protocol for the identification of Fusarium graminearum, based on a pair of primers targeted to a segment of the 3' coding region of the gaoA gene that codes for the enzyme galactose oxidase (GO). This region has low homology with the same region of GO genes from other fungi. Genomic DNA from 17 strains of Fusarium spp. isolated from diseased cereals, from several other Fusarium species, and from other fungi genera was analyzed in a PCR assay using this primer set. The 17 strains of Fusarium spp. were also analyzed for the GO enzyme production in submerse fermentation in a new formulated liquid medium. All strains that were morphologically and molecularly identified as F. graminearum were able to secrete the enzyme and had a positive result in the used PCR protocol. No DNA fragment was amplified using genomic DNA from other Fusarium species and species of other fungi genera. The results suggest that the proposed PCR protocol is specific and can be considered as a new molecular tool for the identification of F. graminearum. In addition, the new formulated medium is a cheap alternative for screening for GO screening production by F. graminearum.

O principal objetivo deste trabalho foi desenvolver um novo protocolo de PCR para identificação de isolados de Fusarium graminearum, baseado no uso de um par de iniciadores direcionado para um segmento da região 3' codificadora do gene gaoA que codifica a enzima galactose oxidase (GO). Esta região possui baixa homologia com a mesma região de genes da GO de outros fungos. O DNA genômico de 17 cepas de Fusarium spp. isoladas de cereais infectados com sintomas, de vários outras espécies de Fusarium e de outros gêneros de fungos foi analisado em um protocolo de PCR utilizando os iniciadores desenhados. Os 17 isolados de Fusarium spp. também foram analisados para a produção da enzima GO em fermentação submersa em um novo meio líquido. Todas as cepas que foram morfologicamente e molecularmente identificadas como F. graminearum foram capazes de secretar a enzima e tiveram um resultado positivo no protocolo de PCR, utilizando os iniciadores direcionados para o gene gaoA. Nenhum fragmento de DNA foi amplificado quando foi utilizado o DNA genômico de várias outras espécies de Fusarium e de espécies de outros gêneros de fungos. Os resultados sugerem que o protocolo de PCR gerado é específico e pode ser considerado como uma nova ferramenta molecular para a identificação de cepas de F. graminearum. Além disso, o meio líquido formulado é uma alternativa barata para a avaliação da produção de GO por F. graminearum.
Descritores: DNA Fúngico
Fusarium/isolamento & purificação
Galactose Oxidase
Genes
Técnicas In Vitro
Reação em Cadeia da Polimerase
-Fermentação
Métodos
Protocolos
Métodos
Tipo de Publ: Estudo Comparativo
Estudo de Avaliação
Responsável: BR32.1 - Serviço de Biblioteca e Informação Biomédica


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Id: lil-297651
Autor: Pereira, Angela Maria; Kemmelmeier, Carlos.
Título: Production of mycotoxins by galactose oxidase producing "Fusarium" using different culture media
Fonte: Braz. j. microbiol;31(2):129-34, Apr.-Jun. 2000. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: The original isolate of the galactose oxidase producing fungus "Dactylium dendroides, and other five galactose oxidase producing "Fusarium" isolates were cultivated in different media and conditions, in order to evaluate the production of 11 mycotoxins, wich are characteristic of the genus "Fusarium": moniliform, fisaric acid, deoxyvalenol, fusarenone-X, nivalenol, 3-acetyldeoxynivalenol, neosolaniol, zearakenol, zeralenone, acetyl T-2, and iso T-2. The toxicity of the culture extractes to "Artemia salina" larvae was tested
Descritores: Fusarium/genética
Fusarium/isolamento & purificação
Galactose Oxidase/análise
Técnicas In Vitro
Micotoxinas/análise
Micotoxinas/genética
Micotoxinas/isolamento & purificação
-Ensaios Enzimáticos Clínicos
Larva/genética
Tipo de Publ: Relatório Técnico
Responsável: BR32.1 - Serviço de Biblioteca e Informação Biomédica


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Zancan, G. T
Id: lil-148781
Autor: Pereira, I. M; Zancan, G. T.
Título: Restriction enzyme fragment patterns of mtDNA from a galactose oxidase-producing mold
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;26(10):1047-55, Oct. 1993. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: 1. Mitochondrial DNAs from Dactylium dendroides, Hypomyces rosellus, Fusarium graminearum, Gibberella fujikuroi, Fusarium tricinctum strains and a galactose oxidase (GAO)-producing mold (original strain) presented distinctive restriction enzyme fragment patterns with the endonucleases Hind III and EcoRI. 2. A small number of comigrating bands was found when the GAO-producing mold was compared with the others. The molecular size of mtDNA from the GAO-producing mold, as judged by summation of fragment sizes produced by digestion with EcoRI, Hind III and Bgl II, is 61.3 +/- 2.16 kb. 3. The results suggest that the mtDNA from the GAO-producing mold strain is distinct from that of D. dendroides and all other ascomycetes analyzed
Descritores: DNA Fúngico/isolamento & purificação
DNA Mitocondrial/isolamento & purificação
Galactose Oxidase/biossíntese
Fungos Mitospóricos/classificação
Polimorfismo de Fragmento de Restrição
-Basidiomycota
Galactose Oxidase/genética
Fungos Mitospóricos/enzimologia
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Zancan, G. T
Id: lil-63326
Autor: Kubicki, D; Zancan, G. T; Amaral, D.
Título: A Dactylium dendroides morphological mutant defective in D-galactose metabolism
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;21(5):895-902, 1988. ilus, tab.
Idioma: en.
Projeto: CNPq.
Resumo: 1. A morphological mutant of the mold Dactylium dendroides was and the phenotype characterized as D-Gal-and L-Ara-. 2. The transport system for D-galactose seemed to be inducible in wild type and mutant and was altered in the mutant. 3. Galactose-1-P- uridylyl transferase activity was absent in the mutant. 4. The levels of intracellular galactose oxidase activity were similar in the wild type and in the mutant, theraby excluding a possible participation of this enzymes in glactose catabolism inthe mold. 5. The low level of galactose oxidase activity found in the extracellular medium indicates a defect in galactose oxidase secretion by the mutant
Descritores: Galactose Oxidase/metabolismo
Galactosiltransferases/metabolismo
Fungos Mitospóricos
Mutação
UTP-Hexose-1-Fosfato Uridililtransferase/metabolismo
Responsável: BR26.1 - Biblioteca Central



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