Base de dados : LILACS
Pesquisa : D12.776.097.120.050 [Categoria DeCS]
Referências encontradas : 43 [refinar]
Mostrando: 1 .. 10   no formato [Detalhado]

página 1 de 5 ir para página              

  1 / 43 LILACS  
              next record last record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo
Id: biblio-960812
Autor: Acosta, Daniele Ferreira; Gomes, Vera Lúcia de Oliveira; Oliveira, Denize Cristina de; Marques, Sérgio Corrêa; Fonseca, Adriana Dora da.
Título: Representações sociais de enfermeiras acerca da violência doméstica contra a mulher: estudo com abordagem estrutural / Representaciones sociales de enfermeras acerca de la violencia doméstica contra la mujer: estudio con enfoque estructural / Social representations of nurses concerning domestic violence against women: study with a structural approach
Fonte: Rev. gaúch. enferm;39:e61308, 2018. graf.
Idioma: pt.
Resumo: Resumo OBJETIVO Analisar a estrutura e os conteúdos das representações sociais de enfermeiras acerca da violência doméstica contra a mulher. MÉTODOS Estudo qualitativo realizado com 100 enfermeiras entre maio/setembro de 2014 em dois hospitais de Rio Grande/RS. Colheram-se os dados por meio de evocação-livre e entrevistas semiestruturadas. Foram tratados pelo software Evoc e análise contextual, respectivamente. RESULTADOS Observa-se uma representação negativa com elementos nucleares aludindo às formas de violência e ao seu julgamento, expresso em "agressão física" e "desrespeito". Na periferia, "medo" revela tanto o sentimento das profissonais quanto das vítimas frente ao agressor, e "submissão" é pontuada como causa da violência. Infere-se a possibilidade de um subgrupo com representação diferenciada, frente ao termo "agressão verbal" na zona de contraste. CONCLUSÕES A visão centralizada nos agravos físicos e na culpabilização da vítima pode limitar as ações de cuidado, portanto é fundamental problematizar este objeto com profissionais da saúde.

Resumen OBJETIVO Analizar la estructura y el contenidos de las representaciones sociales de los enfermeros sobre la violencia doméstica contra las mujeres. MÉTODOS Estúdio cualitativo cumplido em dos hospitales de Río Grande/RS. Los datos fueron recolectados entre mayo/septiembre de 2014 a través de entrevistas semi-estructuradas, cumplido con 100 enfermera, y evocaciones com 34. Fueron tratadas por un software Evoc y análisis contextual, respectivamente. RESULTADOS Se observa una representación negativa con elementos nucleares en alusión a las formas de violencia y su juicio, como "agresión física" y "falta de respeto". En la primera periferia, "miedo", revela tanto la sensación de profissonais como las víctimas contra el agresor, y "sumisión" se califica como una causa de la violencia. Se deduce de la posibilidad de una representación del subgrupo diferente, a través del la presencia del término "agression verbal", en la zona de contraste. CONCLUSIONES Una visión centralizada las lesiones físicas y culpabilidad a la víctima puede limitar las acciones de atención, por lo tanto es fundamental discutir este tema con profesionales de la salud.

Abstract OBJECTIVE To analyse the structure and contents of the social representations of nurses concerning domestic violence against women. METHODS This is a qualitative study conducted with 100 nurses between May and September 2014 in two hospitals of Rio Grande, RS, Brazil. Data were collected through evocations and semi-structured interviews. The data were processed in Evoc software and subjected to contextual analysis, respectively. RESULTS A negative representation was identified with core elements alluding to forms of violence and its judgment, expressed as "physical aggression" and "contempt". In the periphery, "fear" is how the professionals and the victims feel toward the aggressor and "submission" is mentioned as a cause of violence. The term "verbal aggression" in the contrast zone suggests the possibility of a subgroup with a different representation. CONCLUSIONS A centralised view regarding physical injuries and the culpabilisation of domestic abuse victims can limit care actions, revealing the need to discuss this subject with health workers.
Descritores: Percepção Social
Atitude do Pessoal de Saúde
Violência Doméstica/psicologia
Mulheres Maltratadas
Violência de Gênero/psicologia
Enfermeiras e Enfermeiros/psicologia
-Estereotipagem
Comportamento Verbal
Entrevistas como Assunto
Hospitais Filantrópicos
Violência Doméstica/estatística & dados numéricos
Adesinas Bacterianas
Proteínas de Escherichia coli
Atenção à Saúde
Pesquisa Qualitativa
Agressão
Violência de Gênero/estatística & dados numéricos
Departamentos Hospitalares
Hospitais Universitários
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Tipo de Publ: Estudo Multicêntrico
Responsável: BR1.1 - BIREME


  2 / 43 LILACS  
              first record previous record next record last record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo SciELO Brasil
Texto completo
Id: biblio-894068
Autor: Torres, Alfredo G.
Título: Maternal immunity, a way to confer protection against enteropathogenic Escherichia coli / Imunidade materna, uma forma de conferir proteção contra Escherichia coli enteropatogênica
Fonte: J. pediatr. (Rio J.);93(6):548-550, Nov.-Dec. 2017.
Idioma: en.
Descritores: Infecções por Escherichia coli/imunologia
Escherichia coli Enteropatogênica/imunologia
Imunidade Materno-Adquirida/imunologia
-Adesinas Bacterianas/metabolismo
Infecções por Escherichia coli/metabolismo
Escherichia coli Enteropatogênica/metabolismo
Limites: Humanos
Feminino
Recém-Nascido
Tipo de Publ: Editorial
Responsável: BR1.1 - BIREME


  3 / 43 LILACS  
              first record previous record next record last record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo SciELO Brasil
Texto completo
Id: biblio-894078
Autor: Altman, Silvia P N; Tino-De-Franco, Milene; Carbonare, Cristiane B; Palmeira, Patricia; Carbonare, Solange B.
Título: Placental and colostral transfer of antibodies reactive with enteropathogenic Escherichia coli intimins α, ß, or γ / Transferência placentária e colostral de anticorpos reativos a Escherichia coli enteropatogênica com expressão das intiminas α, ß, or γ
Fonte: J. pediatr. (Rio J.);93(6):568-575, Nov.-Dec. 2017. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo.
Resumo: Abstract Objective: Intimins are protein adhesins of enteropathogenic Escherichia coli and enterohemorrhagic E. coli capable of inducing attachment and effacement lesions in enterocytes. Anti-intimin antibodies are important for the protection from enteropathogenic E. coli and enterohemorrhagic E. coli infections because these antibodies inhibit bacterial adhesion and impair the initial step of the pathogenesis. We studied the transfer of maternal anti-intimin antibodies from healthy Brazilian mothers to their newborns through the placenta and colostrum. Methods: Serum immunoglobulin G and secretory immunoglobulin A antibodies against conserved and variable regions of intimins α, β, and γ were analyzed using an enzyme linked-immunosorbent assay in the blood and colostrum from 45 healthy women as well as cord blood serum samples from their newborns. Results: The concentrations of antibodies reactive with α intimin were significantly lower than those of anti-γ and anti-conserved intimin antibodies in the colostrum samples. IgG serum antibodies reactive with all the subtypes of intimins were transferred to the newborns, but the concentrations of anti-conserved intimin serum antibodies were significantly higher in mothers and newborns than concentrations of antibodies against variable regions. The patterns of IgG transfer from mothers to newborns were similar for all anti-intimin antibodies. These values are similar to the percentage transference of total IgG. Conclusions: Anti-intimin antibodies are transferred from mothers to newborns through the placenta, and reinforce the protection provided by breastfeeding against diarrheagenic E. coli infections.

Resumo Objetivo: As intiminas são adesinas proteicas de Escherichia coli enteropatogênicas (EPEC) e enterro-hemorrágicas (EHEC) capazes de induzir as lesões attaching and effacing nos enterócitos. Anticorpos anti-intiminas são importantes para a proteção contra infecções por EPEC e EHEC porque esses anticorpos inibem a adesão bacteriana e impedem o passo inicial do mecanismo patogênico dessas bactérias. Nós estudamos a transferência de anticorpos maternos anti-intiminas de mães brasileiras saudáveis para os seus recém-nascidos através da placenta e do colostro. Métodos: Anticorpos séricos da classe IgG e secretórios da classe IgA (SIgA) reativos com as porções conservada (cons) e variáveis das intiminas α (vα), β (vβ) e γ (vγ) foram analisados pelo teste de ELISA no sangue e no colostro de 45 parturientes saudáveis e no sangue de cordão umbilical dos seus respectivos recém-nascidos. Resultados: As concentrações de anticorpos reativos com intimina vα foram significativamente mais baixas que as dos anticorpos anti-vγ e anti-cons nas amostras de colostro. Anticorpos IgG séricos reativos com todas as intiminas foram transferidos para os recém-nascidos, mas as concentrações de anti-cons foram significativamente mais altas tanto nas mães como nos recém-nascidos do que os anticorpos reativos com as regiões variáveis das intiminas. O padrão de transferência de IgG das mães para os recém-nascidos foi muito semelhante para todos os anticorpos anti-intiminas. Os valores de porcentagem de transferência foram semelhantes à transferência de IgG total. Conclusões: Anticorpos anti-intimina são transferidos das mães para os recém-nascidos pela placenta e corroboram a proteção contra infecções por Escherichia coli diarreiogênicas (DEC) conferida pelo aleitamento materno.
Descritores: Autoanticorpos/análise
Imunoglobulina A Secretora/análise
Imunoglobulina G/análise
Colostro/imunologia
Escherichia coli Enteropatogênica/imunologia
Sangue Fetal/imunologia
-Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
Adesinas Bacterianas/análise
Adesinas Bacterianas/imunologia
Proteínas de Escherichia coli/análise
Proteínas de Escherichia coli/imunologia
Limites: Humanos
Feminino
Recém-Nascido
Responsável: BR1.1 - BIREME


  4 / 43 LILACS  
              first record previous record next record last record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo SciELO Brasil
Texto completo
Texto completo
Id: biblio-1095985
Autor: Santos, L. F. dos; Alvarez, J; Perez, A; Moreira, M. A. S; Pieters, M.
Título: Association of number of tandem repeats in two important adhesins in Mycoplasma hyopneumoniae / Associação entre os números de repetições em tandem em duas importantes adesinas de Mycoplasma hyopneumoniae
Fonte: Arq. bras. med. vet. zootec;67(5):1461-1464mapas.
Idioma: en.
Projeto: Capes Foundation, Ministry of Education of Brazil.
Resumo: Diversidade genética de Mycoplasma hyopneumoniae tem sido relatada em análise múltipla de repetições em tandem em número variável (MLVA). O objetivo deste estudo foi descrever a distribuição espacial e a heterogeneidade genética de tipos de M. hyopneumoniae no Brasil, bem como investigar a correlação entre regiões de repetição 1 (RR1) e 3 (RR3) de duas adesinas importantes (P97 e P146). Foram identificados 39 tipos de MLVA baseados no número de repetições em tandem em P97 RR1 e RR3 P146. A correlação negativa significativa (Spearman's rho = -0,26; P = 0,022) entre P97 RR1 e RR3 P146 foi observada, o que sugere um possível mecanismo compensatório que permitiria a bactéria manter a sua capacidade de adesão. Os resultados contribuem para compreender a epidemiologia das M. hyopneumoniae no quarto maior país produtor de suínos do mundo.(AU)
Descritores: Adesinas Bacterianas
Sequências de Repetição em Tandem
Mycoplasma hyopneumoniae/genética
Pneumonia Suína Micoplasmática/genética
-Suínos/microbiologia
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


  5 / 43 LILACS  
              first record previous record next record last record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo
Id: biblio-1080928
Autor: Lima, Swiany Silveira.
Título: Identificação de adesinas de Leptospira interrogans por shotgun phage display / Identification of Leptospira interrogans adhesins by shotgun phage display.
Fonte: São Paulo; s.n; 2012. 131 p.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Instituto de Química.Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas(Bioquímica) para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: Em Leptospira interrogans algumas proteínas com capacidade de ligação aos componentes de matriz extracelular foram identificadas e, em sua maioria, são fatores de virulência. Phage display é considerada uma técnica poderosa na identificação de novos ligantes, inclusive de moléculas adesinas, importantes no primeiro estágio de infecção do hospedeiro. A técnica de shotgun phage display foi utilizada visando à obtenção de ligantes à células de mamíferos. Quatro bibliotecas, por inserção de fragmentos aleatórios obtidos por sonicação do DNA de L. interrogans nos fagomídeos pG8SAET (BBT1 e BBT2) e pG3DSS (BBT5 e BBT6), foram construídas. As bibliotecas BBT1 e BBT5 contém insertos maiores e as BBT2 e BBT6 contém insertos menores, com tamanhos médios de 1500 pb e 350 pb, respectivamente. Após ensaio de panning da BBT5 contra células de mamíferos e soro fetal bovino, as sequências de clones selecionados foram analisadas quanto a orientação correta e se a fusão estava em fase com a proteína pIII. As proteínas codificadas pelos genes LIC11719, LIC10769, LIC13143 e LIC12976 foram selecionadas com estas características. Os genes que codificam a LIC12976, LIC10768, LIC10769 e LIC13418, tiveram sua conservação avaliada em diferentes sorovares da espécie patogênica L. interrogans e no sorovar Patoc da espécie de vida livre L. biflexa. As proteínas LIC12976 (selecionada pela técnica de phage display) e LIC13418 (selecionada por ferramentas de bioinformática) tiveram suas sequências amplificadas por PCR, clonadas em pGEM T easy, subclonadas em vetor de expressão pAE e expressas na fração celular correspondente ao corpúsculo de inclusão em E. coli BL21 (DE3) Star pLysS e E. coli BL21 SI, respectivamente. Após renaturação e purificação destas proteínas por cromatografia de afinidade a metal bivalente, um grupo de cinco animais BALB/c fêmeas foi imunizado. Ambas as proteínas se mostraram imunogênicas com títulos dos soros policlonais 1:256000 e 1:512000, respectivamente...

In Leptospira interrogans, proteins capable to bind to extracellular matrix components have been identified and most of them are important virulence factors. Phage display is a powerful technique to identify new ligands, including adhesin molecules that are important in the first stage of host infection. A shotgun phage display technique was used in order to obtain cell ligands. Four libraries were constructed by inserting random fragments obtained by sonication of L. interrogans DNA into phagemids pG8SAET (BBT1 and BBT2) and pG3DSS (BBT5 and BBT6). The libraries BBT1 and BBT5 contain larger inserts and BBT2 and BBT6 contain smaller inserts, with 1500 bp and 350 bp average sizes, respectively. After panning of BBT5 against mammalian cells and bovine fetal serum, the sequences of selected clones were analyzed for correct orientation and fusion with pIII protein. The proteins encoded by genes LIC11719, LIC10769, LIC13143 and LIC12976 were selected. The genes LIC12976, LIC10768, LIC10769 and LIC13418 were evaluated for their conservation in different pathogenic serovars of L. interrogans and free-living L. biflexa serovar Patoc. Proteins LIC12976 (selected by phage display technique) and also LIC13418 that was selected by bioinformatic tools, were amplified by PCR, cloned into pGEM T easy, subcloned into expression vector pAE and expressed in cellular fraction corresponding to the inclusion body in E. coli BL21 (DE3) Star pLysS and E. coli BL21 SI, respectively. After protein renaturation protocol and purification by affinity chromatography, a group of five BALB/c mice was immunized with the purified proteins. Both proteins were shown to be immunogenic with 1:256000 and 1:512000 polyclonal sera titers, respectively. In Western blot the sera were specific to recognize recombinant proteins and native proteins were detected in pathogenic L. interrogans serovars extracts...
Descritores: Adesinas Bacterianas/imunologia
Leptospira interrogans
Leptospirose/imunologia
Vacinas
Limites: Humanos
Animais
Bovinos
Responsável: BR78.1 - Biblioteca
BR78.1


  6 / 43 LILACS  
              first record previous record next record last record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo SciELO Brasil
Texto completo
Id: biblio-839530
Autor: FUKUSHIMA, Henrique; ALVES, Vanessa Tubero Euzebio; CARVALHO, Verônica Franco de; AMBRÓSIO, Lucas Macedo Batitucci; EICHLER, Rosangela Aparecida dos Santos; CARVALHO, Maria Helena Catelli de; SARAIVA, Luciana; HOLZHAUSEN, Marinella.
Título: PAR-2 expression in the gingival crevicular fluid reflects chronic periodontitis severity
Fonte: Braz. oral res. (Online);31:e16, 2017. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: Sao Paulo State Research Foundation.
Resumo: Abstract Recent studies investigating protease-activated receptor type 2 (PAR-2) suggest an association between the receptor and periodontal inflammation. It is known that gingipain, a bacterial protease secreted by the important periodontopathogen Porphyromonas gingivalis can activate PAR-2. Previous studies by our group found that PAR-2 is overexpressed in the gingival crevicular fluid (GCF) of patients with moderate chronic periodontitis (MP). The present study aimed at evaluating whether PAR-2 expression is associated with chronic periodontitis severity. GCF samples and clinical parameters, including plaque and bleeding on probing indices, probing pocket depth and clinical attachment level, were collected from the control group (n = 19) at baseline, and from MP patients (n = 19) and severe chronic periodontitis (SP) (n = 19) patients before and 6 weeks after periodontal non-surgical treatment. PAR-2 and gingipain messenger RNA (mRNA) in the GCF of 4 periodontal sites per patient were evaluated by Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-qPCR). PAR-2 and gingipain expressions were greater in periodontitis patients than in control group patients. In addition, the SP group presented increased PAR-2 and gingipain mRNA levels, compared with the MP group. Furthermore, periodontal treatment significantly reduced (p <0.05) PAR-2 expression in patients with periodontitis. In conclusion, PAR-2 is associated with chronic periodontitis severity and with gingipain levels in the periodontal pocket, thus suggesting that PAR-2 expression in the GCF reflects the severity of destruction during periodontal infection.
Descritores: Líquido do Sulco Gengival/química
Receptor PAR-2/análise
Periodontite Crônica/patologia
-Valores de Referência
Índice de Gravidade de Doença
Cisteína Endopeptidases/análise
Biomarcadores/análise
Estudos de Casos e Controles
Expressão Gênica
Índice Periodontal
Índice de Placa Dentária
Perda da Inserção Periodontal
Porphyromonas gingivalis
Estatísticas não Paramétricas
Adesinas Bacterianas/análise
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Adulto
Pessoa de Meia-Idade
Responsável: BR1.1 - BIREME


  7 / 43 LILACS  
              first record previous record next record last record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo SciELO Brasil
Texto completo
Id: biblio-894861
Autor: Cunha, Carlos Eduardo Pouey da; Moreira Junior, Clóvis; Rocha, Andréa da Silva Ramos; Finger, Paula Fonseca; Magalhães, Carolina Georg; Ferreira, Marcos Roberto Alves; Dellagostin, Odir Antônio; Moreira, Ângela Nunes; Conceição, Fabricio Rochedo.
Título: Parenteral adjuvant potential of recombinant B subunit of Escherichia coli heat-labile enterotoxin
Fonte: Mem. Inst. Oswaldo Cruz;112(12):812-816, Dec. 2017. graf.
Idioma: en.
Resumo: BACKGROUND The B subunit of Escherichia coli heat-labile enterotoxin (LTB) is a potent mucosal immune adjuvant. However, there is little information about LTB's potential as a parenteral adjuvant. OBJECTIVES We aimed at evaluating and better understanding rLTB's potential as a parenteral adjuvant using the fused R1 repeat of Mycoplasma hyopneumoniae P97 adhesin as an antigen to characterise the humoral immune response induced by this construct and comparing it to that generated when aluminium hydroxide is used as adjuvant instead. METHODS BALB/c mice were immunised intraperitoneally with either rLTBR1 or recombinant R1 adsorbed onto aluminium hydroxide. The levels of systemic anti-rR1 antibodies (total Ig, IgG1, IgG2a, and IgA) were assessed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The ratio of IgG1 and IgG2a was used to characterise a Th1, Th2, or mixed Th1/Th2 immune response. FINDINGS Western blot confirmed rR1, either alone or fused to LTB, remained antigenic; anti-cholera toxin ELISA confirmed that LTB retained its activity when expressed in a heterologous system. Mice immunised with the rLTBR1 fusion protein produced approximately twice as much anti-rR1 immunoglobulins as mice vaccinated with rR1 adsorbed onto aluminium hydroxide. Animals vaccinated with either rLTBR1 or rR1 adsorbed onto aluminium hydroxide presented a mixed Th1/Th2 immune response. We speculate this might be a result of rR1 immune modulation rather than adjuvant modulation. Mice immunised with rLTBR1 produced approximately 1.5-fold more serum IgA than animals immunised with rR1 and aluminium hydroxide. MAIN CONCLUSIONS The results suggest that rLTB is a more powerful parenteral adjuvant than aluminium hydroxide when administered intraperitoneally as it induced higher antibody titres. Therefore, we recommend that rLTB be considered an alternative adjuvant, even if different administration routes are employed.
Descritores: Toxinas Bacterianas/toxicidade
Adjuvantes Imunológicos/administração & dosagem
Adesinas Bacterianas/imunologia
Proteínas de Escherichia coli/administração & dosagem
Proteínas de Escherichia coli/imunologia
Pneumonia Suína Micoplasmática/imunologia
Pneumonia Suína Micoplasmática/prevenção & controle
Enterotoxinas/administração & dosagem
-Suínos
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
Mycoplasma hyopneumoniae
Hidróxido de Alumínio
Limites: Animais
Feminino
Camundongos
Responsável: BR1.1 - BIREME


  8 / 43 LILACS  
              first record previous record next record last record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo
Id: biblio-869337
Autor: Zerón y Gutiérrez de Velasco, Agustín; Porras Lira, David.
Título: Fusobacterium nucleatum. ¿un patógeno periodontal promotor de carcinogénesis colorrectal? / Fusobacterium nucleatum. is this periodontal pathogen a promoter of colorectal carcinogenesis?
Fonte: Rev. ADM = ADM;73(6):280-285, nov.-dic. 2016. ilus.
Idioma: es.
Resumo: El Fusobacterium nucleatum es una bacteria anaerobia Gram negativa,es un residente común en el biofi lm oral y se ha encontrado una estrechaasociación entre las fusobacterias y las periodontitis. El Fusobacteriumnucleatum se ha asociado con el cáncer colorrectal, pero la causalidad y el mecanismo subyacente aún no se han establecido. La microbiota intestinal humana tiene un papel reconocido en el cáncer colorrectal. Se ha encontrado que el Fn se adhiere, invade, e induce respuestas inflamatorias oncogénicas que estimulan el crecimiento de las células de cáncer colorrectal a través de un factor de la adhesina FadA.

The anaerobic, Gram-negative bacterial species Fusobacterium nucleatumis common in oral biofi lm and the association between it andperiodontitis is well-established. Fusobacterium nucleatum has beenassociated with colorectal cancer, though causality and the underlyingmechanism have yet to be determined. The role of the human gutmicrobiota in colorectal cancer has been acknowledged. Fusobacteriumnucleatum has been found to adhere to, invade, and induce oncogenicand infl ammatory responses that stimulate the growth of colorectalcancer cells through its unique FadA adhesin.
Descritores: Disbiose
Doenças Periodontais/microbiologia
Fusobacterium nucleatum/patogenicidade
Neoplasias Colorretais/etiologia
-Adesinas Bacterianas/fisiologia
Sinergismo Farmacológico
Periodontite/etiologia
Periodontite/microbiologia
Placa Dentária/microbiologia
Limites: Humanos
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: AR29.1 - Biblioteca


  9 / 43 LILACS  
              first record previous record next record last record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo
Texto completo
Texto completo
Id: biblio-846939
Autor: Lima, Swiany Silveira.
Título: Identificação de adesinas de Leptospira interrogans por shotgun phage display / Identification of Leptospira interrogans adhesins by shotgun phage display.
Fonte: São Paulo; s.n; 2013. 131 p. tab, graf, ilus.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Instituto de Química para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: Em Leptospira interrogans algumas proteínas com capacidade de ligação aos componentes de matriz extracelular foram identificadas e, em sua maioria, são fatores de virulência. Phage display é considerada uma técnica poderosa na identificação de novos ligantes, inclusive de moléculas adesinas, importantes no primeiro estágio de infecção do hospedeiro. A técnica de shotgun phage display foi utilizada visando à obtenção de ligantes à células de mamíferos. Quatro bibliotecas, por inserção de fragmentos aleatórios obtidos por sonicação do DNA de L. interrogans nos fagomídeos pG8SAET (BBT1 e BBT2) e pG3DSS (BBT5 e BBT6), foram construídas. As bibliotecas BBT1 e BBT5 contém insertos maiores e as BBT2 e BBT6 contém insertos menores, com tamanhos médios de 1500 pb e 350 pb, respectivamente. Após ensaio de panning da BBT5 contra células de mamíferos e soro fetal bovino, as sequências de clones selecionados foram analisadas quanto a orientação correta e se a fusão estava em fase com a proteína pIII. As proteínas codificadas pelos genes LIC11719, LIC10769, LIC13143 e LIC12976 foram selecionadas com estas características. Os genes que codificam a LIC12976, LIC10768, LIC10769 e LIC13418, tiveram sua conservação avaliada em diferentes sorovares da espécie patogênica L. interrogans e no sorovar Patoc da espécie de vida livre L. biflexa. As proteínas LIC12976 (selecionada pela técnica de phage display) e LIC13418 (selecionada por ferramentas de bioinformática) tiveram suas sequências amplificadas por PCR, clonadas em pGEM T easy, subclonadas em vetor de expressão pAE e expressas na fração celular correspondente ao corpúsculo de inclusão em E. coli BL21 (DE3) Star pLysS e E. coli BL21 SI, respectivamente. Após renaturação e purificação destas proteínas por cromatografia de afinidade a metal bivalente, um grupo de cinco animais BALB/c fêmeas foi imunizado. Ambas as proteínas se mostraram imunogênicas com títulos dos soros policlonais 1:256000 e 1:512000, respectivamente. Em ensaio de Western Blot os soros foram específicos no reconhecimento das proteínas recombinantes e as proteínas nativas foram verificadas em extratos de sorovares patogênicos de L. interrogans. Em ensaios de adesão, as proteínas recombinantes aderiram às células A31, LLC-PK1 e Vero e especificamente à laminina. Em ensaios de interferência em células usando laminina houve um aumento da adesão das proteínas recombinantes, o que pode ser explicado pela ligação da laminina às células e uma maior ligação das LICs estudadas. Em ensaio de localização celular usando imunofluorescência e microscopia eletrônica, foi observado que ambas as proteínas se encontram na superfície da L. interrogans. No experimento de desafio animal, a LIC12976 e a LIC13418 não se mostraram protetoras. Este trabalho contribuiu para a identificação das novas adesinas LIC13418 e LIC12976 que podem participar da virulência de leptospiras patogênicas envolvendo a primeira etapa da infecção na interação patógeno-hospedeiro

In Leptospira interrogans, proteins capable to bind to extracellular matrix components have been identified and most of them are important virulence factors. Phage display is a powerful technique to identify new ligands, including adhesin molecules that are important in the first stage of host infection. A shotgun phage display technique was used in order to obtain cell ligands. Four libraries were constructed by inserting random fragments obtained by sonication of L. interrogans DNA into phagemids pG8SAET (BBT1 and BBT2) and pG3DSS (BBT5 and BBT6). The libraries BBT1 and BBT5 contain larger inserts and BBT2 and BBT6 contain smaller inserts, with 1500 bp and 350 bp average sizes, respectively. After panning of BBT5 against mammalian cells and bovine fetal serum, the sequences of selected clones were analyzed for correct orientation and fusion with pIII protein. The proteins encoded by genes LIC11719, LIC10769, LIC13143 and LIC12976 were selected. The genes LIC12976, LIC10768, LIC10769 and LIC13418 were evaluated for their conservation in different pathogenic serovars of L. interrogans and free-living L. biflexa serovar Patoc. Proteins LIC12976 (selected by phage display technique) and also LIC13418 that was selected by bioinformatic tools, were amplified by PCR, cloned into pGEM T easy, subcloned into expression vector pAE and expressed in cellular fraction corresponding to the inclusion body in E. coli BL21 (DE3) Star pLysS and E. coli BL21 SI, respectively. After protein renaturation protocol and purification by affinity chromatography, a group of five BALB/c mice was immunized with the purified proteins. Both proteins were shown to be immunogenic with 1:256000 and 1:512000 polyclonal sera titers, respectively. In Western blot the sera were specific to recognize recombinant proteins and native proteins were detected in pathogenic L. interrogans serovars extracts. In binding assays, recombinant proteins bind to A31, LLC-PK1 and Vero cells and specifically to laminin. In interference cell assay using laminin there was an increase of recombinant protein bindings, which can be explained by the laminin binding to cells and further binding of the recombinant LICs. In cellular localization assay using immunofluorescence and electron microscopy, it was observed that both are surface proteins of L. interrogans. In the animal challenge, the LIC12976 and LIC13418 were not protective. As a whole, this work contributed to the identification of LIC12976 and LIC13418 as new adhesins and they can participate in the virulence of pathogenic Leptospira in the first stage of host pathogen interaction.
Descritores: Adesinas Bacterianas/análise
Técnicas de Visualização da Superfície Celular/instrumentação
Leptospira interrogans/metabolismo
-Bioquímica
Western Blotting/métodos
Imunofluorescência/estatística & dados numéricos
Biblioteca Gênica
Leptospirose/complicações
Plasmídeos
Vacinas
Limites: Animais
Masculino
Feminino
Ratos
Responsável: BR40.1 - DBD - Divisão de Biblioteca e Documentacão do Conjunto das Químicas
BR40.1; T 574.88, L732i. 30100019834


  10 / 43 LILACS  
              first record previous record
seleciona
para imprimir
Fotocópia
Texto completo SciELO Chile
Texto completo
Id: lil-774429
Autor: Beltran, Sebastian; Munoz-Bergmann, Cristian A; Elola-Lopez, Ana; Quintana, Javiera; Segovia, Cristopher; Trombert, Annette N.
Título: The expression of heterologous MAM-7 in Lactobacillus rhamnosus reduces its intrinsic capacity to inhibit colonization of pathogen Vibrio parahaemolyticus in vitro
Fonte: Biol. Res;49:1-10, 2016. ilus, graf.
Idioma: en.
Projeto: FIDUM.
Resumo: BACKGROUND: Vibrio parahaemolyticus (V. parahaemolyticus) is a Gram-negative, halophilic bacterium recognized as one of the most important foodborne pathogen. When ingested, V. parahaemolyticus causes a self-limiting illness (Vibriosis), characterized mainly by watery diarrhoea. Treatment is usually oral rehydration and/or antibiotics in complicated cases. Since 1996, the pathogenic and pandemic V. parahaemolyticus O3:K6 serotype has spread worldwide, increasing the reported number of vibriosis cases. Thus, the design of new strategies for pathogen control and illness prevention is necessary. Lactobacillus sp. grouped Gram positive innocuous bacteria, part of normal intestinal microbiota and usually used as oral vaccines for several diarrheic diseases. Recombinants strains of Lactobacillus (RL) expressing pathogen antigens can be used as part of an anti-adhesion strategy where RL block the pathogen union sites in host cells. Thus, we aimed to express MAM-7 V. parahaemolyticus adhesion protein in Lactobacillus sp. to generate an RL that prevents pathogen colonization RESULTS: We cloned the MAM-7 gene from V. parahaemolyticus RIMD 2210633 in Lactobacillus expression vectors. Recombinant strains (Lactobacillus rhamnosus pSEC-MAM7 and L. rhamnosus pCWA-MAM7) adhered to CaCo-2 cells and competed with the pathogen. However, the L. rhamnosus wild type strain showed the best capacity to inhibit pathogen colonization in vitro. In addition, LDH-assay showed that recombinant strains were cytotoxic compared with the wild type isogenic strain CONCLUSIONS: MAM-7 expression in lactobacilli reduces the intrinsic inhibitory capacity of L. rhamnosus against V. parahaemolyticus.
Descritores: Adesinas Bacterianas/análise
Aderência Bacteriana/fisiologia
Lactobacillus rhamnosus/fisiologia
Vibrio parahaemolyticus/patogenicidade
-Biofilmes/crescimento & desenvolvimento
Linhagem Celular
Citotoxicidade Imunológica
CACO-TEMEFOS CELLS
Eletroforese em Gel de Poliacrilamida
Expressão Gênica
Violeta Genciana
Reação em Cadeia da Polimerase
Vibrioses/prevenção & controle
Vibrio parahaemolyticus/crescimento & desenvolvimento
Vibrio parahaemolyticus/metabolismo
Limites: Humanos
Tipo de Publ: Estudo de Avaliação
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central



página 1 de 5 ir para página              
   


Refinar a pesquisa
  Base de dados : Formulário avançado   

    Pesquisar no campo  
1  
2
3
 
           



Search engine: iAH v2.6 powered by WWWISIS

BIREME/OPAS/OMS - Centro Latino-Americano e do Caribe de Informação em Ciências da Saúde