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Id: biblio-839184
Autor: Campana, Eloiza Helena; Xavier, Danilo Elias; Petrolini, Fernanda Villas-Boas; Cordeiro-Moura, Jhonatha Rodrigo; Araujo, Maria Rita Elmor de; Gales, Ana Cristina.
Título: Carbapenem-resistant and cephalosporin-susceptible: a worrisome phenotype among Pseudomonas aeruginosa clinical isolates in Brazil
Fonte: Braz. j. infect. dis;21(1):57-62, Jan.-Feb. 2017. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: FAPESP; . CNPq.
Resumo: Abstract The mechanisms involved in the uncommon resistance phenotype, carbapenem resistance and broad-spectrum cephalosporin susceptibility, were investigated in 25 Pseudomonas aeruginosa clinical isolates that exhibited this phenotype, which were recovered from three different hospitals located in São Paulo, Brazil. The antimicrobial susceptibility profile was determined by CLSI broth microdilution. β-lactamase-encoding genes were investigated by PCR followed by DNA sequencing. Carbapenem hydrolysis activity was investigated by spectrophotometer and MALDI-TOF assays. The mRNA transcription level of oprD was assessed by qRT-PCR and the outer membrane proteins profile was evaluated by SDS-PAGE. Genetic relationship among P. aeruginosa isolates was assessed by PFGE. Carbapenems hydrolysis was not detected by carbapenemase assay in the carbapenem-resistant and cephalosporin-susceptible P. aueruginosa clinical isolates. OprD decreased expression was observed in all P. aeruginosa isolates by qRT-PCR. The outer membrane protein profile by SDS-PAGE suggested a change in the expression of the 46 kDa porin that could correspond to OprD porin. The isolates were clustered into 17 genotypes without predominance of a specific PFGE pattern. These results emphasize the involvement of multiple chromosomal mechanisms in carbapenem-resistance among clinical isolates of P. aeruginosa, alert for adaptation of P. aeruginosa clinical isolates under antimicrobial selective pressure and make aware of the emergence of an uncommon phenotype among P. aeruginosa clinical isolates.
Descritores: Pseudomonas aeruginosa/efeitos dos fármacos
Carbapenêmicos/farmacologia
Cefalosporinas/farmacologia
Resistência beta-Lactâmica/genética
Antibacterianos/farmacologia
-Fenótipo
Pseudomonas aeruginosa/enzimologia
Pseudomonas aeruginosa/genética
Espectrofotometria Ultravioleta
Proteínas da Membrana Bacteriana Externa
Proteínas de Bactérias/metabolismo
beta-Lactamases/metabolismo
Brasil
DNA Bacteriano
Testes de Sensibilidade Microbiana
Eletroforese em Gel de Campo Pulsado
Análise de Sequência de DNA
Porinas/metabolismo
Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa
Limites: Humanos
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-713284
Autor: Faldasz, Jonathan; Cachay, Edward R.
Título: Mecanismos de resistencia en bacterias que frecuentemente producen infecciones nosocomiales importantes / Mechanisms of resistance in bacteria that frequently cause significant serious nosocomial infections
Fonte: Diagnóstico (Perú);52(3):123-131, jul.-sept. 2013. ilus, tab.
Idioma: es.
Descritores: Biofilmes
Farmacorresistência Bacteriana
Infecção Hospitalar
Porinas
Pseudomonas
Resistência a Medicamentos
Limites: Humanos
Responsável: PE1.1 - Oficina Universitária de Biblioteca


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Id: biblio-846940
Autor: Nicastro, Gianlucca Gonçalves.
Título: Busca por alvos de regulação pelo segundo mensageiro c-diGMP em Pseudomonas aeruginosa / Search for c-di-GMP regulation targets in Pseudomonas aeruginosa.
Fonte: São Paulo; s.n; 2013. 98 p. tab, graf, ilus.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Instituto de Química para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: Recentemente, o bis-(3',5')-di-guanosina monofosfato cíclico (c-di-GMP) surgiu como uma importante molécula sinalizadora nas bactérias. Essa molécula foi identificada como uma das responsáveis pelo controle do comportamento bacteriano e está relacionada com a patogenicidade e a adaptação de diversas bactérias, coordenando a expressão de genes envolvidos com virulência, motilidade e formação de biofilme. O mecanismo pelo qual c-diGMP atua vem sendo motivo de estudo de vários grupos de pesquisa nos últimos anos. Já foi demonstrado o papel dessa molécula em diferentes etapas do controle da expressão gênica. Acredita-se que a manipulação dos níveis de c-di-GMP pode ser uma nova abordagem terapêutica contra bactérias patogênicas. Pseudomonas aeruginosa é uma proteobactéria do grupo gama, que atua como um patógeno oportunista, causando infecções em pacientes imunocomprometidos, sendo o maior causador de infecções crônicas em pacientes portadores de fibrose cística. O genoma de P. aeruginosa PA14 apresenta vários genes que codificam proteínas envolvidas no metabolismo e/ou ligação de c-di-GMP, o que pode indicar um amplo papel regulatório deste nucleotídeo nessa bactéria. Uma associação infundada entre níveis elevados de c-di-GMP e a resistência aos antibióticos é geralmente assumida, já que altos níveis de c-di-GMP levam à formação de biofilme, que é comprovadamente um modo de crescimento mais resistente. Nesse trabalho, utilizando uma abordagem proteômica, mostramos que Pseudomonas aeruginosa PA14 regula a expressão de cinco porinas em resposta a variações nos níveis de c-di-GMP, independentemente dos níveis de mRNA. Uma dessas porinas, OprD, é responsável pela entrada do antibiótico ß-lactâmico imipenem na célula e é menos abundante em condições de alto c-di-GMP. Também demonstramos que linhagens com altos níveis de c-di-GMP apresentam uma vantagem competitiva de crescimento em relação a linhagens com níveis mais baixo de c-di-GMP quando crescidas em meio contendo imipenem. Em contraste, observamos que células planctônicas com elevados níveis c-di-GMP são mais sensíveis a tobramicina. Em conjunto, estes resultados mostram que c-di-GMP pode regular a resistência a antibióticos em sentidos opostos, e independentemente do crescimento em biofilme

Following the genomic era, a large number of genes coding for enzymes predicted to synthesize and degrade 3'-5'-cyclic diguanylic acid (c-di-GMP) was found in most bacterial genomes and this dinucleotide emerged as an important intracellular signal molecule controlling bacterial behavior. Diverse molecular mechanisms have been described as targets for c-di-GMP, but several questions remain to be addressed. An association between high c-di-GMP levels and antibiotic resistance is largely assumed, since high c-di-GMP upregulates biofilm formation and the biofilm mode of growth leads to enhanced antibiotic resistance; however, a clear understanding of this correlation is missing. Pseudomonas aeruginosa is a versatile gamma-proteobacterium that behaves as an opportunistic pathogen to a broad range of hosts. The ability of P. aeruginosa to form biofilms contributes to its virulence and adaptation to different environments. The P. aeruginosa PA14 genome presents several genes encoding proteins involved in metabolism or binding to c-di-GMP, which may indicate a wide regulatory role of this nucleotide in this bacterium. Here, using a proteomic approach, we show that Pseudomonas aeruginosa PA14 regulates the amount of five porins in response to c-di-GMP levels, irrespective of their mRNA levels. One of these porins is OprD, decreased in high c-di-GMP conditions, which is responsible for the uptake of the ß-lactam antibiotic imipenem. We also demonstrate that this difference leads strains with high c-di-GMP to be more resistant to imipenem even when growing as planktonic cells, giving them a competitive advantage over cells with low c-di-GMP. Contrastingly, we found that planktonic cells with high c-di-GMP levels are more sensitive to aminoglycosides antibiotics. Together, these findings show that c-di-GMP levels can regulate the antibiotic resistance to different drugs in opposite ways and irrespective of a biofilm mode of growth
Descritores: GMP Cíclico/análise
Porinas/análise
-Western Blotting/métodos
Resistência Microbiana a Medicamentos
Expressão Gênica/genética
Microscopia de Fluorescência/métodos
Pseudomonas aeruginosa/genética
Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/métodos
Limites: Animais
Masculino
Feminino
Camundongos
Responsável: BR40.1 - DBD - Divisão de Biblioteca e Documentacão do Conjunto das Químicas
BR40.1; T 574.88, L732i. 30100019834


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Id: biblio-835823
Autor: Santos, Ingrid de Arruda Lucena dos; Nogueira, Joseli Maria da Rocha; Mendonça, Flávia Coelho Ribeiro.
Título: Mecanismos de resistência antimicrobiana em pseudomonasaeruginosa / Mechanisms responsible for antimicrobial resistance in pseudomonas aeruginosa
Fonte: Rev. bras. anal. clin;47(1-2):5-12, 2015.
Idioma: pt.
Resumo: Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria de grande importância para indivíduos imunocomprometidos. No Brasil, ela é um dos principais agentes em infecções hospitalares e pode provocar diversos tipos de processos clínicos. Atualmente, um dos maiores desafios em infecções provocadas por P. aeruginosa é a resistência apresentada diante de inúmeros antimicrobianos. Além da resistência intrínseca de P.aeruginosa, essa bactéria facilmente desenvolve mecanismos de resistência adicionais, através de mutações e da aquisição de elementos genéticos móveis, por exemplo. Dessa forma, P. aeruginosa é considerada um patógeno multirresistente, o que limita as alternativas terapêuticas capazes de combatê-lo. Portanto, compreender osmecanismos que levam a essa resistência é de extrema importância para enfrentar as infecções por P. aeruginosa.

Pseudomonas aeruginosa is a bacterium of great importance forimmunocompromised individuals. In Brazil, it is one of the leadingcauses of hospital infections and can cause many types of infections.Currently, one of the biggest challenges in infections caused by P.aeruginosa is the resistance presented against numerousantimicrobials. In addition to the intrinsic resistance of P. aeruginosa,inherent in the species, this bacterium easily acquire additionalmechanisms of resistance via mutation and acquisition of mobilegenetic elements, for example. Accordingly, P. aeruginosa isconsidered a multidrug-resistant pathogen, which limits thetherapeutic alternatives able to fight it. Therefore, understanding themechanisms that lead to this resistance is of utmost importance totackle infections by P. aeruginosa.
Descritores: Infecção Hospitalar
Resistência Microbiana a Medicamentos
Farmacorresistência Bacteriana Múltipla
Pseudomonas aeruginosa
-Aminoglicosídeos
beta-Lactamases
Fluoroquinolonas
Polimixinas
Porinas
Limites: Humanos
Responsável: BR408.1 - Biblioteca da Faculdade de Medicina - BFM


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Texto completo SciELO Brasil
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Id: lil-769825
Autor: Cavalcanti, Felipe Lira de Sá; Mirones, Cristina Rodríguez; Paucar, Elena Román; Montes, Laura Álvarez; Leal-Balbino, Tereza Cristina; Morais, Marcia Maria Camargo de; Martínez-Martínez, Luis; Ocampo-Sosa, Alain Antonio.
Título: Mutational and acquired carbapenem resistance mechanisms in multidrug resistant Pseudomonas aeruginosa clinical isolates from Recife, Brazil
Fonte: Mem. Inst. Oswaldo Cruz;110(8):1003-1009, Dec. 2015. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: REIPI; . SNS Miguel Servet.
Resumo: An investigation was carried out into the genetic mechanisms responsible for multidrug resistance in nine carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosaisolates from different hospitals in Recife, Brazil. Susceptibility to antimicrobial agents was determined by broth microdilution. Polymerase chain reaction (PCR) was employed to detect the presence of genes encoding β-lactamases, aminoglycoside-modifying enzymes (AMEs), 16S rRNA methylases, integron-related genes and OprD. Expression of genes coding for efflux pumps and AmpC cephalosporinase were assessed by quantitative PCR. The outer membrane proteins were separated by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. The blaSPM-1, blaKPC-2 and blaGES-1 genes were detected in P. aeruginosaisolates in addition to different AME genes. The loss of OprD in nine isolates was mainly due to frameshift mutations, premature stop codons and point mutations. An association of loss of OprD with the overexpression of MexAB-OprM and MexXY-OprM was observed in most isolates. Hyper-production of AmpC was also observed in three isolates. Clonal relationship of the isolates was determined by repetitive element palindromic-PCR and multilocus sequence typing. Our results show that the loss of OprD along with overexpression of efflux pumps and β-lactamase production were responsible for the multidrug resistance in the isolates analysed.
Descritores: Carbapenêmicos/metabolismo
Farmacorresistência Bacteriana Múltipla/genética
Mutação
Pseudomonas aeruginosa/efeitos dos fármacos
Pseudomonas aeruginosa/genética
Resistência beta-Lactâmica/genética
beta-Lactamases/metabolismo
-Aminoglicosídeos/metabolismo
Anfotericina B/análogos & derivados
Anfotericina B/metabolismo
Antifúngicos/metabolismo
Brasil
Cefalosporinase/classificação
Cefalosporinase/metabolismo
Códon sem Sentido/metabolismo
Ativação Enzimática/genética
Mutação da Fase de Leitura/genética
Regulação Bacteriana da Expressão Gênica/genética
Proteínas de Membrana Transportadoras/metabolismo
Metiltransferases/metabolismo
Nucleotidiltransferases/metabolismo
Mutação Puntual/genética
Porinas/metabolismo
Pseudomonas aeruginosa/enzimologia
Pseudomonas aeruginosa/isolamento & purificação
Sequências Repetitivas de Ácido Nucleico
beta-Lactamases/genética
Limites: Humanos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-691552
Autor: Nascimento, Laura de Oliveira.
Título: Porinas e suas ações imunomoduladoras dependentes de TLR2 / Porins and their immunomodulatory effects triggered by TLR2.
Fonte: São Paulo; s.n; 2011. 142 p. ilus, tab, graf.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Faculdade de Ciências Farmacêuticas para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: Os micro-organismos podem infectar seu hospedeiro por diferentes vias, sendo a principal o trato respiratório. O reconhecimento pela mucosa dessas vias pode desencadear inibição da proliferação e bloqueio da entrada microbiana, assim como estimular resposta direcionada a memória imunológica para prevenir posteriores infecções. Alguns micro-organismo, como as bactérias Neisseria meningitidis e Neisseria lactamica, são capazes de modular a resposta imune de mucosa diretamente, ou por meio das células epiteliais respiratórias. Este trabalho propôs, então, a avaliação das porinas B provenientes destas bactérias como moduladoras da produção de IL-8 nas linhagens BEAS-2B e Detroit 562. Também foi avaliada a dependência deste estímulo ao receptor TLR2. Ambas as porinas se ligaram a TLR2 e por este receptor estimularam a produção de IL-8. O perfil de produção foi dependente da expressão de TLR2 pelas células. A porina lactâmica induziu menos IL-8 por regular negativamente a expressão de TLR2, mas sua afinidade pelo receptor se mostrou maior que a da porina meningocócica. As porinas são então moduladoras das células de mucosa, fato que somado a atividade adjuvante destas proteínas por via parenteral estimulou a avaliação destas como adjuvantes de mucosa. O modelo escolhido para a avaliação foi o de inoculação intranasal de camundongos, utilizando como antígeno o lipopolissacarídio pouco imunogênico de Franciscella tularensis atenuada (Ft-LPS). A análise foi baseada no título de anticorpos IgG e IgM séricos. A porina meningocócica se mostrou a mais imunogênica, mas por ser originária de patógeno acarreta maior risco biológico em sua produção. Para viabilizar a porina meningocócica como adjuvante, a mesma foi substituída por porina homóloga produzida de modo recombinante em Escherichia coli não patogênica. A porina recombinante foi avaliada pelo mesmo sistema in vivo e comparada a adjuvantes experimentais de ação conhecida (rCTB, QS-21 e ODN 1826). A porina apresentou...

Microorganisms can invade the host through many routes, specially the respiratory tract. The respiratory mucosa is responsible for recognition, inhibition, proliferation and entry blockade of microorganisms, besides incitation of immunological memory to prevent further infections. Some microorganisms, such as Neisseria meningitidis and Neisseria lactamica, can modulate the mucosa immune response directly or through stimulation of respiratory epithelial cells. The present work proposed the evaluation of porin B proteins, derived from these microorganisms, as modulators of IL-8 production on respiratory epithelial cell strains BEAS-2B and Detroit 562. TLR2 receptor dependency for the modulation was also evaluated. Both porins bounded to TLR2 and through this receptor were able to stimulate IL-8 production, whereas this profile was correlated with TLR2 expression. Lactamica porin (Nlac PorB) induced less IL-8 and TLR2 expression, also for a shorter period of time. The effect caused by Nlac PorB was attributed to TLR2 down regulated expression, since its binding affinity to the receptor is greater than meningococcal porin (Nmen PorB). Porins were therefore able to immune modulate mucosal cells, fact that allied with their parenteral adjuvant activity incited evaluation of porins as potential mucosal adjuvants. The model chosen for the evaluation was intranasal immunization of mice, using as the antigen a low immunogenic lipopolysaccharide extracted from attenuated Franciscella tularensis (Ft-LPS). The evaluation was based on IgG and IgM serum titers. After the immunization scheme, Nmen PorB induced higher IgG and IgM titers than Nlac PorB. Although Nmen PorB was more efficient, it comes from a pathogen. To overcome the risk of its production, it was replaced by recombinant porin (rPorB) produced by Escherichia coli. rPorB was evaluated by the same model and compared with well known experimental adjuvants (rCTB, QS-21 e ODN 1826). rPoB had the highest IgM and IgG...
Descritores: Fatores Imunológicos/farmacocinética
Porinas/análise
Porinas/biossíntese
RECEPTOR TEMEFOS TOLL-LIKE
-Administração Intranasal
Adjuvantes Imunológicos/farmacocinética
Vírus da Raiva
Vacinação
Limites: Animais
Masculino
Feminino
Adolescente
Camundongos
Tipo de Publ: Estudo de Avaliação
Responsável: BR40.1 - DBD - Divisão de Biblioteca e Documentacão do Conjunto das Químicas
BR40.1; T616.92079, N244p. T21262-F


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Texto completo SciELO Brasil
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Id: lil-688580
Autor: Shi, Weifeng; Li, Kun; Ji, Yun; Jiang, Qinbo; Wang, Yuyue; Shi, Mei; Mi, Zuhuang.
Título: Carbapenem and cefoxitin resistance of Klebsiella pneumoniae strains associated with porin OmpK36 loss and DHA-1 β-lactamase production
Fonte: Braz. j. microbiol;44(2):435-442, 2013. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: Clinical isolates of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae) strains are being increased worldwide. Five pan-resistant K. pneumoniae strains have been isolated from respiratory and ICU wards in a Chinese hospital, and reveal strong resistance to all β-lactams, fluoroquinolones and aminoglycosides. Totally 27 β-lactamase genes and 2 membrane pore protein (porin) genes in 5 K. pneumoniae strains were screened by polymerase chain reaction (PCR). The results indicated that all of 5 K. pneumoniae strains carried blaTEM-1 and blaDHA-1 genes, as well as base deletion and mutation of OmpK35 or OmpK36 genes. Compared with carbapenem-sensitive isolates by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), the resistant isolates markedly lacked the protein band of 34-40 kDa, which might be the outer membrane proteins of OmpK36 according to the electrophoresis mobility. In addition, the conjugation test was confirmed that blaDHA-1 mediated by plasmids could be transferred between resistant and sensitive strains. When reserpine (30 µg/mL) and carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP) (50 µg/mL) were added in imipenem and meropenem, the MICs had no change against K. pneumoniae strains. These results suggest that both DHA-1 β-lactamase and loss or deficiency of porin OmpK36 may be the main reason for the cefoxitin and carbapenem resistance in K. pneumoniae strains in our hospital.
Descritores: Antibacterianos/farmacologia
Carbapenêmicos/farmacologia
Cefoxitina/farmacologia
Farmacorresistência Bacteriana
Klebsiella pneumoniae/efeitos dos fármacos
Porinas/deficiência
beta-Lactamases
-Proteínas de Bactérias/análise
China
DNA Bacteriano/genética
Eletroforese em Gel de Poliacrilamida
Hospitais
Infecções por Klebsiella/microbiologia
Klebsiella pneumoniae/química
Klebsiella pneumoniae/enzimologia
Klebsiella pneumoniae/genética
Testes de Sensibilidade Microbiana
Peso Molecular
Reação em Cadeia da Polimerase
beta-Lactamases/genética
Limites: Humanos
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Texto completo SciELO Brasil
ALBUQUERQUE, Ricardo de
Texto completo
Id: lil-662573
Autor: Vitale, Phelipe Augusto Mariano; Crepaldi, Carla Rossini; Tesch, Andréa Cristina; Albuquerque, Ricardo de; César, Marcelo de Cerqueira.
Título: Purificação e caracterização da VDAC de mitocôndrias corticais aviares: identificação de modificações pós-traducionais nas porinas neuronais murinas e aviares / Purification and characterization of avian cortical mitochondrial VDAC: identification of post-translational modifications of rat and avian neuronal porins
Fonte: Pesqui. vet. bras = Braz. j. vet. res;32(12):1361-1366, Dec. 2012. ilus.
Idioma: pt.
Projeto: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo.
Resumo: A VDAC é uma porina presente na MME cuja função é crucial no metabolismo energético, sobrevivência e morte celular. A caracterização da VDAC torna-se importante para a compreensão das inter-relações da mitocôndria com os diferentes componentes citosólicos, tais como a HK. A ligação HK-VDAC favorece a utilização do ATP intramitocondrial em células neuronais, a HK cerebral pode interagir de formas diferentes com a VDAC, o que resulta em diferentes sítios de ligação (sítios A e B). Os variados papéis metabólicos das isoformas da VDAC podem ser explicados pela presença de alterações pós-traducionais. No presente trabalho purificamos a VDAC1 mitocondrial neuronal proveniente de cérebro aviar. Paralelamente, comprovamos que a presença de múltiplas formas das VDACs 1 e 2 em cérebros murino e aviar, seja devida à presença de modificações pós-traducionais, nomeadamente a fosforilação. A proteína isolada apresentou peso molecular de 30KDa. Quando submetida à eletroforese e posteriormente à coloração para a identificação de fosfoproteínas, a mesma mostrou-se desfosforilada. O conhecimento da presença, ou ausência de fosforilação das VDACs, reside na importância de estabelecer-se as bases moleculares ligadas à existência de sítios A e B nas mitocôndrias neuronais.

VDAC (voltage-dependent anion channel) is a pore forming protein from outer mitochondrial membrane. It has key functions on energetic metabolism, and cell death and survival. VDAC characterization is important for understanding mitochondrial interactions with cytosolic proteins, such as hexokinase (HK). HK-VDAC interaction supports preferential access to intramitochondrial ATP in neural cells. Brain HK interacts in different ways with VDAC. It results in two HK binding sites (A and B). VDAC isoforms differential metabolic roles may be explained by the presence of post-translational modifications. In this study we purified avian neuronal mitochondrial VDAC1. At same time we showed that VDACs 1 and 2 pI heterogeneity in rat and avian brains is due to phosphorylation. Purified VDAC had a molecular weight of 30 KDa. The purified VDAC submitted to phosphorylated protein staining on gel, was dephosphorylated. The knowledge of presence or absence of VDAC phosphorylation is important for understanding the molecular nature basis of A and B HK binding sites in brain mitochondria.
Descritores: Canal de Ânion 1 Dependente de Voltagem/metabolismo
/metabolismo
CANAL DE ANION TEMEFOS DEPENDENTE DE VOLTAGEM/metabolismo
Membranas Mitocondriais
Porinas/isolamento & purificação
Proteína Inibidora de Apoptose Neuronal/isolamento & purificação
Proteínas de Transporte da Membrana Mitocondrial/metabolismo
-Aves/metabolismo
Bovinos/metabolismo
GLUCOSE-ABDOMEN, ACUTE-FOSFATO
Muridae/metabolismo
Limites: Animais
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


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Texto completo SciELO Saúde Pública
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Id: lil-612947
Autor: Santella, Gisela; Pollini, Simona; Docquier, Jean-Denis; Almuzara, Marisa; Gutkind, Gabriel; Rossolini, Gian Maria; Radice, Marcela.
Título: Resistencia a carbapenemes en aislamientos de pseudomonas aeruginosa: un ejemplo de interacción entre distintos mecanismos / Carbapenem resistance in pseudomonas aeruginosa isolates: an example of interaction between different mechanisms
Fonte: Rev. panam. salud pública = Pan am. j. public health;30(6), Dec. 2011.
Idioma: es.
Resumo: Objetivo. Identificar la proteína de membrana externa ausente en los aislamientos resistentes y determinar tanto las causas de su ausencia en la membrana, como la presencia de otros mecanismos de resistencia a carbapenemes en aislamientos clínicos de Pseudomonas aeruginosa. Métodos. Se estudió un brote de 20 aislamientos de P. aeruginosa previamente caracterizados como productores de la metalobetalactamasa IMP-13. Estos aislamientos presentaron igual expresión de la enzima IMP-13, pero solo cinco de ellos fueron resistentes acarbapenemes. En esos cinco aislamientos resistentes se confirmó la ausencia de una proteína de membrana externa. Se secuenciaron oprD y ampC; se identificaron las proteínas de membrana externa por desorción/ionización láser asistida por matriz/espectometría de masa tiempo de vuelo (MALDI-TOF); se determinó el nivel de expresión de OprD, de AmpC y de los sistemas de eflujo tipo Mex, por reacción en cadena de polimerasa en tiempo real, y por último, se determinó la contribución del déficit de OprD a la resistencia a carbapenemes. Resultados. La proteína de la membrana externa ausente en el grupo R (resistentes a ambos carbapenemes) fue identificada como OprD-TS, pero no se observaron variaciones en suexpresión. El gen oprD presentó mutaciones en los cinco aislamientos resistentes. Se observó la misma producción de la enzima tipo AmpC PDC-5 y del sistema de eflujo Mex AB-OprM entre los aislamientos sensibles y resistentes a carbapenemes. Se analizó cómo la presencia conjunta de IMP-13 y el déficit de OprD contribuyen al aumento de la resistencia.Conclusiones. Distintos mecanismos contribuyen a la resistencia de aislamientos productores de IMP-13 a carbapenemes. La posibilidad de no detectar estos aislamientos productores de IMP-13 representa un riesgo latente de selección de mutantes con mecanismos de resistencia que se suman para aumentar la resistencia a carbapenemes.

Objective. To identify the outer membrane protein absent in the resistant isolates and to determine both the causes of its absence in the membrane and the presence of othermechanisms of carbapenem resistance in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa. Methods. Twenty isolates from an outbreak of P. aeruginosa previously characterized as metallo-beta-lactamase IMP-13 producers were studied. All the isolates exhibitedequal expression of the IMP-13 enzyme, but only five of them were carbapenemresistant. It was found that the five resistant isolates lacked a outer membrane protein. The oprD and ampC genes were sequenced; the outer membrane proteins were identifiedusing matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight (MALDI-TOF) mass spectrometry; the OprD and AmpC expressions, as well as the Mex efflux system, were assessed by real-time polymerase chain reaction; and finally, the contribution of reduced OprD to carbapenem resistance was determined. Results. The absent outer membrane protein in group R was identified as OprD-TS; however, no variations in its expression were observed. The oprD gene presentedmutations in the five resistant isolates. The production of AmpC PDC-5-type enzyme and the MexAB-OprM efflux system was the same in both carbapenem-sensitive and‑resistant isolates. The contribution of the combined presence of IMP-13 and reducedOprD to increased resistance was examined. Conclusions. Different mechanisms contribute to carbapenem resistance in IMP-13-producing isolates. The possibility that these IMP-13-producing isolates could go undetected poses a latent risk when selecting mutants with added resistancemechanisms in order to enhance carbapenem resistance.
Descritores: Proteínas de Bactérias/fisiologia
Carbapenêmicos/farmacologia
Farmacorresistência Bacteriana Múltipla/fisiologia
Porinas/genética
Infecções por Pseudomonas/microbiologia
Pseudomonas aeruginosa/efeitos dos fármacos
Resistência beta-Lactâmica/fisiologia
beta-Lactamases/fisiologia
-Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/genética
Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/fisiologia
Proteínas de Bactérias/genética
Análise Mutacional de DNA
DNA Bacteriano/genética
Farmacorresistência Bacteriana Múltipla/genética
Eletroforese em Gel de Campo Pulsado
Genes Bacterianos
Imipenem/metabolismo
Imipenem/farmacologia
Mutação
Proteínas de Membrana Transportadoras/genética
Proteínas de Membrana Transportadoras/fisiologia
Porinas/deficiência
Porinas/fisiologia
Pseudomonas aeruginosa/enzimologia
Pseudomonas aeruginosa/genética
Estudos Retrospectivos
Espectrometria de Massas por Ionização e Dessorção a Laser Assistida por Matriz
Tienamicinas/metabolismo
Tienamicinas/farmacologia
Resistência beta-Lactâmica/genética
beta-Lactamases/genética
Limites: Humanos
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Texto completo SciELO Brasil
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Id: lil-599773
Autor: Neves, Patrícia R; Mamizuka, Elsa M; Levy, Carlos E; Lincopan, Nilton.
Título: Pseudomonas aeruginosa multirresistente: um problema endêmico no Brasil / Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa: an endemic problem in Brazil
Fonte: J. bras. patol. med. lab;47(4):409-420, ago. 2011. ilus, tab.
Idioma: pt.
Resumo: Relatos mundiais têm documentado a problemática da endemicidade de isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa multirresistente (MDR) aliada a elevados índices de morbidade/mortalidade. No Brasil, surtos de infecção ocasionados por P. aeruginosa têm sido relacionados com uma disseminação clonal da espécie. Atualmente, as opções terapêuticas para o tratamento das infecções causadas por esse microrganismo são limitadas, muitas vezes restringindo-se ao uso de carbapenêmicos (p. ex., imipenem [IPM]). Assim, a resistência ao IPM é uma questão de saúde pública, uma vez que esse antibiótico é empregado como último recurso no tratamento de infecções de origem hospitalar, causadas por bactérias Gram-negativas multirresistentes. No Brasil, os principais mecanismos relacionados com fenótipos multirresistentes de P. aeruginosa são produção de metalobetalactamase (MBL) do tipo SPM-1, presença de metilase 16S rRNA RmtD, perda de porina OprD e superexpressão de bombas de efluxo, o que pode explicar os altos índices de resistência a carbapenêmicos e aminoglicosídeos. A emergência de cepas com essas características é preocupante, tendo em vista a escassez de terapias efetivas no tratamento de infecções por esse patógeno. Finalmente, com base em relatos nacionais, publicados por diferentes grupos de pesquisa, podemos deduzir que a convergência de múltiplos mecanismos de resistência em P. aeruginosa tem sido um evento favorável para a seleção de diferentes clones endêmicos multirresistentes disseminados no Brasil.

Global reports have documented the endemicity of multidrug-resistant (MDR) Pseudomonas aeruginosa associated with high levels of morbidity/mortality. In Brazil, outbreaks of MDR P. aeruginosa have been related to clonal dissemination. Currently, therapeutic options for the treatment of these infections are restricted to carbapenemic antibiotics (i.e., imipenem [IPM]). Thus, carbapenem resistance is a public health issue, since carbapenems are considered the last resort to nosocomial infections caused by MDR Gram-negative bacteria. In Brazil, the main mechanisms associated with MDR P. aeruginosa phenotypes are metallo-betalactamase (MBL) production (SPM-1 enzyme), presence of 16S rRNA methylase RmtD, loss of OprD porin, and overexpression of efflux pumps, which may explain the high level of carbapenem and aminoglycoside resistance. Accordingly, the emergence and dissemination of MDR strains is worrisome. Finally, based on national reports published by different groups of investigators, it is deduced that the convergence of multiple mechanisms of P. aeruginosa resistance has played a major role in the selection of endemic MDR clones widespread in Brazil.
Descritores: Farmacorresistência Bacteriana
Doenças Endêmicas
Porinas
Pseudomonas aeruginosa
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: BR14.1 - Biblioteca Central



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