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Texto completo SciELO Brasil
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Id: lil-783800
Autor: Girgin, Mustafa; Binnetoglu, Kenan; Duman, Kazim; Kanat, Burhan Hakan; Cetinkaya, Ziya; Ayten, Refik; Ilhan, Yavuz Selim; Ilhan, Necip; Seker, Ibrahim; Timurkaan, Necati.
Título: Effects of platelet rich plasma on fascial healing in rats with fecal peritonitis
Fonte: Acta cir. bras;31(5):314-319, May 2016. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: ABSTRACT PURPOSE : To evaluate the effects of platelet rich plasma (PRP) on the healing of fascia wherein peritonitis has been created. METHODS: Twenty eight Wistar Albino rats were divided into four groups. Only a primary fascial repair following laparotomy was performed on Group 1, a primary fascial repair performed and PRP treatment applied following laparotomy on Group 2, and a fecal peritonitis created following laparotomy and a primary fascial repair carried out on Group 3. A fecal peritonitis was created following laparotomy and primary fascial repair and PRP treatment on the fascia was carried out on Group 4. RESULTS: TNF-α was found to be significantly lower in the control group (Group 1). It was detected at the highest level in the group in which fecal peritonitis was created and PRP applied (Group 4). TGF-β was determined as being significantly higher only in Group 4. Histopathologically, the differences between the groups in terms of cell infiltration and collagen deposition were not found to be significant. CONCLUSION: When platelet rich plasma was given histologically and biochemicaly as wound healing parameters cellular infiltration, collagen accumulation, and tissue hydroxyiproline levels were not increased but neovascularization, fibroblast activation and TNF Alfa levels were increased and PRP accelerated wound healing.
Descritores: Peritonite/complicações
Cicatrização
Plasma Rico em Plaquetas
Fáscia/fisiologia
-Peritonite/metabolismo
Serina Endopeptidases/metabolismo
Distribuição Aleatória
Fator de Crescimento Transformador beta/análise
Fator de Crescimento Transformador beta/metabolismo
Colágeno/efeitos dos fármacos
Colágeno/metabolismo
Fator de Necrose Tumoral alfa/análise
Fator de Necrose Tumoral alfa/metabolismo
Ratos Wistar
Gelatinases/metabolismo
Neovascularização Fisiológica
Modelos Animais
Fáscia/irrigação sanguínea
Hidroxiprolina/análise
Hidroxiprolina/metabolismo
Proteínas de Membrana/metabolismo
Limites: Animais
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Texto completo SciELO Chile
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Id: biblio-1003635
Autor: Espinoza, Cristián; Díaz, Magda C; González, Magdalena; Olmedo, Ivonne; Pedrozo, Zully.
Título: Policistina-1 protege a los cardiomiocitos de la necrosis inducida por estrés mecánico / Policystin-1 protects cardiomyocytes from mechanical stress induced necrosis
Fonte: Rev. chil. cardiol;38(1):29-36, abr. 2019. graf.
Idioma: es.
Projeto: Fondo Nacional de Investigación Científica y Tecnológica, FONDECYT; . FONDAP; . CEMC.
Resumo: Resumen: Antecedentes: La muerte de los cardiomiocitos es determinante en el desarrollo de patologías cardiacas posteriores al infarto del miocardio y la insuficiencia cardiaca. Las variaciones en la expresión de la familia de proteínas BCL-2 regulan vías, tanto de muerte, como de sobrevida celular. Así, BCL-2 es una proteína anti- apoptótica y NIX una proteína que induce la necrosis y/o la apoptosis celular. La Policistina-1 (PC1) es un mecanosensor vital para la función contráctil cardiaca; sin embargo, se desconoce su papel en la sobrevida de los cardiomiocitos durante el estrés mecánico. Objetivo: Determinar si PC-1 previene la muerte de los cardiomiocitos inducida por estrés mecánico y las proteínas BCL-2 y NIX. Métodos: Se utilizó cultivo de cardiomiocitos de ratas neonatas controles o deficientes en la expresión de PC1, estimulados con solución hiposmótica (HS), como modelo de estrés mecánico. Se midió la muerte por necrosis y apoptosis y los niveles de BCL-2 y NIX. Resultados: La deficiencia de la PC1 en los cardiomiocitos induce un aumento de la necrosis y los niveles proteicos de NIX en las células estimuladas con HS. El estrés mecánico induce la apoptosis basal relacionada a una disminución de BCL- 2, independiente de la expresión de la PC1. Conclusiones: La PC1 protege a los cardiomiocitos de la necrosis por estrés mecánico, lo que podría deberse en parte a su papel en la regulación de los niveles de las proteínas NIX.

Abstracts: Background: Cardiomyocytes death is a determining factor in the development of cardiac dysfunction after myocardial infarction and heart failure. The change in BCL-2 family protein expression regulates both cell death and survival pathways, whereas BCL-2 is an anti-apoptotic protein and NIX induces necrosis and/or apoptosis. Polycystin-1 (PC1) is a crucial mechanosensor for cardiac contractile function. However, its role in cardiomyocyte survival during mechanical stress is unknown. Aim: To study the relationship of PC1 with mechanical stretch-death in cardiomyocytes and the BCL-2, and NIX proteins. Methods. Controls or deficient expression of PC1 neonatal rat ventricular myocytes were stimulated with hypoosmotic solution (HS) and used as a model of mechanical stress. Necrosis or apoptosis cell death, BCL-2 and NIX protein levels were measured. Results: Deficient expression of PC1 increases cardiomyocyte necrosis and NIX protein levels in cells stimulated with HS. Mechanical stress induces basal apoptosis related to a decrease in BCL-2, independent of PC1 expression. Conclusion: PC1 protects cardiomyocytes from mechanical stress necrosis, at least in part, by regulating NIX protein levels.
Descritores: Proteínas Proto-Oncogênicas c-bcl-2/metabolismo
Miócitos Cardíacos/metabolismo
Canais de Cátion TRPP/metabolismo
Necrose/prevenção & controle
-Estresse Mecânico
Western Blotting
Ratos Sprague-Dawley
Apoptose
Citometria de Fluxo
Proteínas de Membrana/metabolismo
Limites: Animais
Masculino
Ratos
Responsável: CL126.2 - Biblioteca Médica Dr. Profesor Hernán Alessandri R.


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Cunha, C. da
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Id: lil-623963
Autor: Izquierdo, I; Pereira, M. E; Cunha, C. da; Wolfman, C; Medina, J. H.
Título: Benzodiazepine receptor ligand influences on learning: an endogenous modulatory mechanism mediated by benzodiazepines possibly of alimentary origin
Fonte: Mem. Inst. Oswaldo Cruz;86(supl.2):169-171, 1991. tab.
Idioma: en.
Conferência: Apresentado em: Brazilian-Sino Symposium on Chemistry and Pharmacology of Natural Products, Rio de Janeiro, Dec. 10-14, 1989.
Resumo: In rats pre-but not post-training ip administration of either flumazenil, a central benzodiazepine (BSD) receptor antagonist, or of n-butyl-B-carboline-carboxylate (BCCB), an inverse agonist, enhanced retention of inhibitory avoidance learning. Flumazenil vlocked the enhancing effect of BCCB, and the inhibitory effect of the BZD agonists clonazepam and diazepam also given pre-training. Post-training administration of these drugs had no effects. The peripheral BZD receptor agonist/chloride channel blocker Ro5-4864 had no effect on the inhibitory avoidance task when given ip prior to training, buth it caused enhancement when given immediately post-training either ip or icv. This effect was blocked by PK11195, a competitive antagonist of Ro5-4864. These results suggest that ther is an endogenous mechanism mediated by BZD agonists, which is sensitive to inverse agonists and that normally down-regulates the formation of memories through a mechanism involving GABA-A receptors and the corresponding chloride channels. The most likely agonists for the endogenous mechanism suggested are the diazepam-like BZDs found in brain whose origin is possibly alimentary. Levels of these BZDs in the cortex were found to sharply decrease after inhibitory acoidance training or mere exposure to the training apparatus.
Descritores: Benzodiazepinas/metabolismo
Benzodiazepinas/farmacologia
Ativação do Canal Iônico/efeitos dos fármacos
Receptores de GABA-A/efeitos dos fármacos
Receptores de GABA-A/fisiologia
Diazepam/farmacologia
Proteínas de Membrana/efeitos dos fármacos
-Aprendizagem da Esquiva/efeitos dos fármacos
Ratos Wistar
Canais de Cloreto
Limites: Animais
Ratos
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-623648
Autor: Kipnis, T. L; Joiner, K. A; Silva, W. Dias da; Rimoldi, M. T; Hammer, C. H; Sher, A.
Título: Identification of membrane components of Tripanossoma cruzi Modulators of complement system
Fonte: Mem. Inst. Oswaldo Cruz;83(supl.1):571-575, Nov. 1988.
Idioma: en.
Conferência: Apresentado em: Annual Meeting on Basic Research in Chagas's disease, 15, Apresentado em: Meeting of the Brazilian Society of Protozoology4, Caxambu, 7-10 Nov. 1988.
Descritores: Trypanosoma cruzi
Proteínas Inativadoras do Complemento C3b/análise
-Antígenos CD55
Proteínas de Membrana
Limites: Animais
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-623692
Autor: Ramalho-Pinto, F. Juarez.
Título: Decay accelerating factor (DAF) as the host antigen with protective activity to complement killing of schistosomula
Fonte: Mem. Inst. Oswaldo Cruz;82(supl.4):213-216, 1987.
Idioma: en.
Conferência: Apresentado em: International Symposium on Schistosomiasis, Apresentado em: Reunião Nacional de Esquistossomose, 1, Rio de Janeiro, Oct. 25-30, 1987.
Resumo: The acquisition of host antigens by Schistosoma mansoni was studied by evaluating the resistance of schistosomula to the complement attack mediated by lethal antibody. Schistosomula cultured for 24 hours with intact human erythrocytes (N-HuE) or ghosts of any type of ABO or Rh blood group, showed a marked resistance to complement damage. Sheep red blood cells, pronase-treated N-HuE or erythrocytes from patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, which are complement-sensitive cells, were unable to protect schistosomula. Schistosomula protected by N-HuE became again susceptible to complement killing after incubation with a monoclonal antibody anti-DAF. These results indicate that, in vitro, host DAF from N-HuE can be acquired by schistosomula surface in a biological active form that protects the parasite from the complement lesion.
Descritores: Schistosoma mansoni/imunologia
Esquistossomose mansoni/prevenção & controle
Proteínas de Membrana/imunologia
-Ativação do Complemento
Antígenos CD55
Anti-Helmínticos
Limites: Animais
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: biblio-999255
Autor: Stabelini, Tatiana Comporte.
Título: Estudos estruturais de fragmentos do trocador de Na+/Ca2+ por RMN em solução / Structural studies of fragments derived from the Na+/Ca2+ exchanger by solution NMR.
Fonte: São Paulo; s.n; 2018. 100 p. ilus, graf, tab.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Instituto de Química para obtenção do grau de Mestre.
Resumo: Proteínas de membrana estão envolvidas em processos fisiológicos essenciais como, por exemplo, a manutenção do equilíbrio iônico e sinalização intracelular. No entanto, apesar do envolvimento em inúmeros processos fisiológicos e de grande interesse farmacêutico, o estudo estrutural de proteínas de membrana ainda é um processo custoso e muito mais complexo do que o estudo estrutural de proteínas solúveis. Os trocadores de Na+/Ca2+ são proteínas de membrana que atuam na manutenção da homeostase de Ca2+ intracelular e estão envolvidos em processos patológicos como doenças cardíacas. Estes trocadores estão presentes em diversas espécies de mamíferos (NCX) e insetos, por exemplo, na mosca Drosophila melanogaster (CALX). A topologia destas proteínas é constituída de dois domínios. O domínio transmembranar, que contém dois segmentos de 5 hélices transmembranares (TMH) e é responsável por promover o transporte específico de íons Ca2+ e Na+ através da membrana, e o domínio citoplasmático, responsável por regular a atividade do trocador. O domínio citoplasmático consiste de uma alça que contém dois domínios sensores de Ca2+ intracelular (CBD1 e CBD2). Trabalhos mostraram que o trocador CALX é inibido pela ligação de Ca em CBD1, enquanto que trocadores NCX são ativados. As regiões citosólicas que conectam CBD1 e CBD2 à TMH5 e TMH6 são conservadas e ainda não foram caracterizadas estruturalmente. Adjacente à TMH5 há um segmento anfipático, denominado exchanger inhibitory peptide (XIP), que está envolvido no mecanismo de regulação do trocador. Na ausência de dados estruturais do CALX completo, o estudo de TMH5-XIP poderá aumentar a compreensão sobre a estrutura e o funcionamento do trocador. A construção TMH5-XIP foi fusionada à MBP no N-terminal e a uma sequência de 8 histidinas no C-terminal. Apesar da expressão da proteína de fusão ter sido bem sucedida, problemas de precipitação e ineficiência durante a clivagem da conexão com a MBP impediram a conclusão dos estudos estruturais. Logo, uma construção menor, contendo apenas a região equivalente ao XIP, foi estudada por espectroscopia de RMN em solução e dicroísmo circular. XIP forma uma 310-hélice a baixa temperatura, 7 oC, que se desestabiliza a maior temperatura, 27 oC. Estes dados permitem a formulação de hipóteses sobre o papel de XIP no mecanismo de regulação do domínio transmembranar de CALX

Membrane proteins are involved in essential physiological processes such as maintenance of the ionic balance and intracellular signaling. However, despite their role in numerous physiological processes of well-recognized pharmaceutical relevance, structural studies of membrane proteins remain being more complex than structural studies of globular proteins. Na+/Ca2+ exchangers (NCX) are membrane proteins that play essential roles in the maintenance of the intracellular Ca2+ homeostasis. Not surprisingly, the NCXs are involved in pathologies such as heart diseases. These exchangers are present in several species of mammals (NCX) and insects, for example, in the fly Drosophila melanogaster (CALX). The topology of these proteins consists of a transmembrane and a hydrophilic domain. The transmembrane domain corresponds to two segments of 5 transmembrane helices (TMH) forming a 10-helix bundle that is responsible for the specific transport of Ca2+ and Na+ across the cellular membrane. The hydrophilic domain is composed of a large cytoplasmic loop, which is associated with the regulation of the ion exchange activity of the transmembrane domain. The loop contains two Ca2+-sensors domains, CBD1 and CBD2, and uncharacterized regions. Studies showed that Ca2+ binding to CBD1 inhibits the CALX, whereas it activates the NCX. The juxtamembrane cytosolic regions linking the CBD1 and CBD2 domains to the TMH5 and TMH6, respectively, are highly conserved but have not yet been structurally characterized. The segment near TMH5 is amphipathic, and it is also called exchanger inhibitory peptide (XIP). In the absence of a three-dimensional structure of the complete CALX, the study of TMH5-XIP may contribute to our understanding of the structure and operation of the exchanger. In order to study TMH5-XIP, it was fused to an MBP tag at the N-terminus, and to a sequence of 8 histidines at the C-terminus. Although the expression of the fusion protein was successful, precipitation and inefficient MBP-tag cleavage prevented the isolation of pure TMH5-XIP for structural studies. Hence, a smaller construct, containing only the region equivalent to XIP, was studied by NMR spectroscopy in solution and circular dichroism. The structure assumed by XIP in solution is temperature dependent, being intrinsically disordered at 27 C or a 310-helix at 7 C, respectively. These findings allowed us to infer how XIP could participate in the CALX regulation mechanism
Descritores: Espectroscopia de Ressonância Magnética/métodos
Trocador de Sódio e Cálcio/análise
-Peptídeos
Drosophila melanogaster/classificação
Proteínas de Membrana
Responsável: BR40.1 - DBD - Divisão de Biblioteca e Documentacão do Conjunto das Químicas
BR40.1; T574.19282, S775e. 30100026181-Q


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Id: biblio-933573
Autor: Busek, Solange Cristina Uber(aut).
Título: Identificação de proteínas de superfície e secretadas e caracterização de uma nova proteína de membrana do Schistosoma mansoni.
Fonte: Belo Horizonte; s.n; 2005. 153 p. ilus.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: A resposta imune de humanos infectados com helmintos é direcionada a várias proteínas, inclusive aquelas secretadas ou de superfície, principalmente devido a localização no parasito que vive em contato direto com o sangue permitindo uma interação direta com componentes do sistema imune do hospedeiro. Embora várias proteínas expressas no tegumento do Schistosoma mansoni já têrem sido descritas e muitas seqüências de RNAm estarem depositadas em bancos de dados de domínio público, pouco se conhece sobre o papel das proteínas de superfície ou secretadas na biologia do parasito e na interação com o sistema imune do hospedeiro. Neste estudo predizemos proteínas secretadas e de superfície depositadas no banco de dados de proteínas da Rede ONSA/SP através dos programas de bioinformática e caracterizamos uma nova proteína de superfície do S. mansoni. A partir das 26.228 seqüências de proteínas analisadas pelos programas SignalP e Phobius observamos que 10,5 porcento foram anotadas como transmembranas, ancoradas ou secretadas e metade dessas proteínas (55,3 porcento) foi identificada por mais de um programa, reforçando a hipótese que pelo menos 5,81 porcento destas proteínas são possivelmente secretadas ou de superfície

A partir de anotações manuais observamos que a maioria das proteínas é transmembrana intracelular e extracelular (25,0 porcento e 22,1 porcento respectivamente) e apenas um pequeno número foi classificado como secretadas (6,0 porcento), presentes no retículo endoplasmático ou golgi (1,8 porcento) e ancoradas (1,7 porcento). Entretanto, o número de proteínas, com peptídeo sinal, identificadas em nossa análise, pode estar subestimado, pois as seqüências usadas em nosso estudo foram geradas por Orestes. Quando comparamos os modelos utilizados, observamos que o Phobius Transmembrana foi o programa que mais classificou corretamente as proteínas (62,1 porcento) tendo como a maioria das falso-positivas as proteínas intracelulares (40,1 porcento). O SignalP Modelo Markov (MM) foi o programa que mais classificou corretamente proteínas secretadas (17,3 porcento) quando comparado com o Modelo de Rede Neural (9,3 porcento) e Phobius secretada (15,3 porcento), sendo o programa mais sensível par identificação de peptídeo sinal. Entretanto, a maioria das proteínas falso-positivas classificadas pelo SignalP (MM) foram as proteínas transmembrana extra (30,2 porcento) e intracelulares (28,8 porcento). A partir de ferramentas de bioinformática para identificação de proteínas de superfície e o estudo e utilizando imunolocalização identificamos uma nova proteína do S. mansoni, Sm262 que parece ser um receptor com papel na via de sinalização e desenvolvimento do parasito
Descritores: Proteínas de Membrana
Proteínas/genética
Proteínas/imunologia
Schistosoma mansoni/microbiologia
Responsável: BR1719.1 - Biblioteca do CPqRR
BR1719.1; 616.963 TE, B976i, 2005. 011326 011325


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Id: biblio-933128
Autor: Carmo, Andréia Moreira dos Santos.
Título: Estudo da imunogenicidade da proteína de classe 5C de Neisseria meningitidis B em camundongos imunizados pela via nasal.
Fonte: São Paulo; s.n; 2005. 122 p. ilus, tab, graf.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a São Paulo (Estado). Secretaria da Saúde. Coordenadoria de Controle de Doenças. Programa de Pós-Graduação em Ciências para obtenção do grau de Mestre.
Resumo: Neisseria meningitidis ‚ um patógeno humano para o qual não existe uma vacina totalmente eficaz. As vacinas antimeningocócicas, produzidas a partir dos polissacarides capsulares do meningococo são efetivas contra os sorogrupos A e C, embora nos Estados Unidos, uma vacina quadrivalente contendo meningococos dos sorogrupos A, C, Y e W- 135 seja eficaz para indivíduos acima de dois anos de idade. No entanto, vacinas polissacarídicas apresentam limitações, pois não são imunogênicas em crianças abaixo de dois anos de idade e nas outras faixas etárias, a resposta imune‚ de curta duração. O desenvolvimento de uma vacina contra o sorogrupo B enfrenta um problema ainda maior devido à similaridade entre a estrutura capsular do polissacaride B e o cidopolisilico contendo glicopeptídeos que faz parte do tecido cerebral humano, podendo levar à autoimunidade. Por isso, os estudos atuais estão se voltando para a pesquisa de antígenos vacinais derivados da membrana externa do meningococo. Estudos promissores têm sido conduzidos para o desenvolvimento de uma vacina baseada nas proteínas de membrana externa (OMPs) de N. meningitidis B. As principais OMPs de N. meningitidis são designadas de classe 1 a classe 5. No entando, vacinas baseadas em OMP são antígenos fracos em crianças, sendo necessário o uso de adjuvantes. O objetivo deste estudo foi investigar as propriedadades adjuvantes da Bordetella pertussis, da toxina colérica e do LPS (imunotipos L8 e L379) em diferentes esquemas de imunização com a proteína de membrana externa de classe 5C purificada da cepa de referência 44/76 de N. meningitidis B e verificar a modulação da resposta imune contra esta proteína administrada pela via intranasal e intramuscular em camundongos BALB/c adultos e neonatos/ jovens. As amostras de soros de camundongos imunizados foram avaliadas quanto à presença de anticorpos específicos de isótipos IgG, IgM, IgA por meio de ELISA e Immunoblotting. Foram ainda, avaliados...
Descritores: Adjuvantes Imunológicos
Afinidade de Anticorpos
Vacinas Meningocócicas
Neisseria meningitidis Sorogrupo B
-Administração Intranasal
Imunização
Proteínas de Membrana
Limites: Camundongos
Responsável: BR91.2 - Centro de Documentação
BR91.2; W4, C287e, 2005


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Id: biblio-880608
Autor: Singh, Tejinder Pal; Malik, Ravinder Kumar; Kaur, Gurpreet.
Título: Cell surface proteins play an important role in probiotic activities of Lactobacillus reuteri
Fonte: Nutrire Rev. Soc. Bras. Aliment. Nutr;41:1-10, Dec. 2016. ilus.
Idioma: en.
Resumo: BACKGROUND: Eight Lactobacillus reuteri strains, previously isolated from breast-fed human infant feces, were selected to assess the potential contribution of their surface proteins in probiotic activity. These strains were treated with 5 M LiCl to remove their surface proteins, and their tolerance to simulated stomach-duodenum passage, cell surface characteristics, auto aggregation, adhesion, and inhibition of pathogen adhesion to Caco-2 cells were compared with untreated strains. RESULTS: The survival rates, auto aggregation, and adhesion abilities of the LiCl-treated L. Reuteri strains decreased significantly (p< 0.05) compared to that of the untreated cells. The inhibition ability of selected L. reuteri strains, untreated or LiCl treated, against adherence of Escherichia coli 25922 and Salmonella typh iNCDC113 to Caco-2 was evaluated in vitro with L. reuteri ATCC55730 strain as a positive control. Among the selected eight strains of L.reuteri, LR6 showed maximum inhibition against the E. Coli ATCC25922 and S. typhiNCDC113. After treatment with 5 M LiCl to remove surface protein, the inhibition activities of the lactobacilli against pathogens decreased significantly (p< 0.05). Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis indicated thatLR6 strains had several bands with molecular weight ranging from 10 to 100 KDa, and their characterization and functions need to be confirmed. CONCLUSIONS: The results revealed that the cell surface proteins of L. reuteri play an important role in their survivability, adhesion, and competitive exclusion of pathogen to epithelial cells.
Descritores: Lactobacillus reuteri/química
Lactobacillus reuteri/imunologia
Proteínas de Membrana/metabolismo
Probióticos/uso terapêutico
Tipo de Publ: Técnicas In Vitro
Responsável: BR1208.1 - BSEN - Biblioteca Setorial de Enfermagem e Nutrição


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Id: biblio-867269
Autor: Silva, Luiz Henrique Santos.
Título: Expressão gênica de moléculas da matriz extracelular e da membrana celular durante a diferenciação de células-tronco adultas da polpa dentária humana / Gene expression of extracellular matrix and cell membrane molecules during cellular differentiation from human dental pulp stem cells.
Fonte: São Paulo; s.n; 2014. 104 p. ilus, tab. (BR).
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Faculdade de Odontologia para obtenção do grau de Mestre.
Símbolo: BR.
Resumo: As células-tronco mesenquimais (MSCs) são células multipotentes que tem o potencial de se diferenciarem em várias linhagens celulares in vitro e in vivo. Estas são encontradas em nichos específicos em muitos órgãos e tecidos adultos, tais como medula óssea, tecido adiposo, músculo, dente, cordão umbilical, pele, cartilagem articular, sendo facilmente isoladas, expandidas e com alta capacidade proliferativa in vitro. Assim, estas características têm despertado grande interesse na sua utilização como uma potencial fonte de células para o reparo e regeneração tecidual de diversos órgãos e tecidos. Pouco se conhece sobre as moléculas que são secretadas pelas MSCs para a matriz extracelular (MEC) e que estão na interface célula-matriz e estão presentes em vias de transdução de sinais intracelulares. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil de expressão gênica de enzimas que remodelam a MEC (metaloproteinases de matriz MMPs: 15 membros) e seus inibidores (inibidores teciduais das metaloproteinases de matriz TIMPs: 4 membros e RECK) e proteína da membrana plasmática (Caveolina-1) durante a diferenciação osteogenica in vitro a partir de células-tronco mesenquimais da polpa dentária humana (DPSCs). Para tanto, utilizamos polpas dentárias humanas provenientes de terceiros molares de indivíduos adultos (18-32 anos n=3) e as DPSCs isoladas foram imunofenotipadas por citometria de fluxo, avaliada a taxa de proliferação, induzidas as diferenciações osteogênica (1, 7, 14, 21 e 28 dias) e adipogênica (28 dias) e os transcritos avaliados por PCR em tempo real. Estas células foram positivas para o marcadores CD29, CD105, STRO-1, CD44, CD90 negativas os marcadores para CD31, CD45, CD34 e CD14 e são capazes de se diferenciarem em osteoblastos e adipócitos.

Verificamos que as MMP-2, MMP-3, MMP-13, MMP-14, MMP-25, TIMP-3, TIMP-4 e Caveolina-1 foram diferencialmente expressas durante a diferenciação osteogênica, sendo reguladas positivamente apenas no período de 28 dias pós indução e a TIMP-1 regulada positivamente desde o primeiro dia de indução. A MMP-11 e MMP-16 não foram detectadas nas DPSCs e nem durante a diferenciação osteogênica. Desta forma, concluímos que MMPs encontradas bem como a Caveolina-1 e as TIMP-3 e TIMP-4 podem estar participando dos dos eventos de diferenciação óssea em DPSCs, a TIMP-1 pode estar participando de eventos biológicos relacionados as propriedades do estado indiferenciado das DPSCs e da diferenciação óssea e que as MMP-11 e MMP-16 não são expressas pelas DPSCs e também não estão envolvidas na diferenciação osteogênica.

Mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotent cells that have the potential to differentiate into various cell lineages in vitro and in vivo. These are found in specific niches in many adult organs and tissues, such as bone marrow, adipose tissue, muscle, tooth, umbilical cord, skin, cartilage, being easily isolated, expanded and high proliferative capacity in vitro. Thereby, these features have attracted great interest in its use as a potential source of cells for tissue repair and regeneration of various organs and tissues. Little is known about the molecules secreted by MSCs into the extracellular matrix (ECM), present at cell-matrix interface and present on intracellular signal transduction. Thus, the aim of this study was to evaluate gene expression profile of ECM remodeling enzymes (matrix metalloproteinases MMPs: 15 members) and their inhibitors (tissue inhibitors of matrix metalloproteinases TIMPs: 4 members and RECK) and plasma membrane proteins (Caveolin-1) that participate in signaling pathways during osteogenic differentiation in vitro from human dental pulp stem cells (DPSCs). Normal human impacted third molars were collected from adults (18-32 years-old n=3) and DPSCs isolated were immunophenotyping by flow cytometry, evaluated the proliferation ratio, induced to osteogenic (1, 7, 14, 21 and 28-days) and adipogenic differentiation (28-days) and the transcript levels evaluated by Real Time PCR.

These cells are positive for CD29, CD105, STRO -1, CD44, and CD90 markers and negative for CD31, CD45, CD34, and CD14 markers and are capable of differentiating into osteoblasts and adipocytes. We found that MMP- 2, MMP -3, MMP -13, MMP -14, MMP -25, TIMP-3, TIMP-4 and Caveolin-1 were differentially expressed during osteogenic differentiation, being upregulated only at 28 days post-induction and TIMP-1 upregulated from the first day of induction. MMP-11 and MMP-16 were not detected in DPSCs neither during differentiation. Thus, we conclude that MMPs, Caveolin-1 found as well as TIMP-3 and TIMP-4 may be participating in the event of bone differentiation in DPSCs, TIMP-1 may participate in biological events related to the properties of the undifferentiated state DPSCs and osteogenic differentiation, MMP-11 and MMP-16 are not also expressed by DPSCs and are not involved in osteogenic differentiation.
Descritores: Polpa Dentária
Diferenciação Celular/fisiologia
Metaloproteases
Proteínas de Membrana/análise
Células-Tronco
Limites: Seres Humanos
Masculino
Feminino
Adulto Jovem
Adulto
Responsável: BR97.1 - Serviço de Documentação Odontológica
BR97.1; T4.936



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