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Id: biblio-1038620
Autor: Ritterbusch, G. A; Esteves, P. A; Trevisol, I. M; Okino, C. H; Jaenisch, F. R. F; Morés, M. A. Z; Caron, L; Silva, A. D; Finger, P. F; Hübner, S. O.
Título: Construction and characterization of a recombinant vaccine encoding the nucleocapsid protein gene of avian infectious bronchitis virus / Construção e caracterização de uma vacina recombinante codificando o gene da proteina do nucleocapsideo do virus da bronquite infecciosa das galinhas
Fonte: Arq. bras. med. vet. zootec. (Online);71(4):1428-1432, jul.-ago. 2019. tab, ilus.
Idioma: en.
Resumo: A vacinação é a forma mais utilizada para prevenir a bronquite infecciosa causada pelo vírus da bronquite infecciosa das galinhas (IBV). Contudo, as vacinas convencionais são incapazes de diferenciar aves infectadas de vacinadas. No presente trabalho foi construído, caracterizado, e avaliado como candidato vacinal, um adenovírus recombinante expressando o gene N do IBV. O gene N foi clonado em um adenovírus humano tipo 5 defectivo e transfectado para as células HEK-293A para gerar rAd5_N. Após o vetor ser obtido como esperado e a confirmação da expressão da proteína N em HEK-293ª, foi realizada inoculação pela via oculo-nasal na dose de 10 7 TCID 50 /0,1mL para imunização de galinhas livres de patógenos específicos (SPF). A resposta imunológica do Ad5_N e a proteção contra o desafio ao IBV foram avaliadas e comparadas com uma vacina viva comercial. Não foram detectados anticorpos anti-IBV em aves vacinadas com o Ad5_N. A vacina comercial induziu anticorpos detectáveis a partir do 7º dia pós-vacinal. Em aves vacinadas com o Ad5_N não houve aumento na expressão de IFNγ. Neste estudo, o rAd5_N obtido não conferiu proteção contra desafio com IBV-M41. Os resultados indicam a necessidade de avaliar adenovírus recombinantes expressando outros genes do IBV.(AU)
Descritores: Vacinas Sintéticas
Galinhas
Infecções por Coronavirus/prevenção & controle
Vírus da Bronquite Infecciosa
Nucleoproteínas
-Proteínas do Nucleocapsídeo
Limites: Animais
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


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Id: lil-699783
Autor: Ono, Ekaterina A. Durymanova; Iamamoto, Keila; Castilho, Juliana G.; Carnieli Jr., Pedro; Oliveira, Rafael de Novaes; Achkar, Samira M.; Carrieri, Maria L.; Kotait, Ivanete; Brandão, Paulo E..
Título: In vitro and in vivo inhibition of rabies virus replication by RNA interference
Fonte: Braz. j. microbiol;44(3):879-882, July-Sept. 2013. tab.
Idioma: en.
Projeto: FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo).
Resumo: Rabies is a zoonotic disease that affects all mammals and leads to more than 55,000 human deaths every year, caused by rabies virus (RABV) (Mononegavirales: Rhabdoviridae: Lyssavirus). Currently, human rabies treatment is based on the Milwaukee Protocol which consists on the induction of coma and massive antiviral therapy. The aim of this study was to assess the decrease in the titer of rabies virus both in vitro and in vivo using short-interfering RNAs. To this end, three siRNAs were used with antisense strands complementary to rabies virus nucleoprotein (N) mRNA. BHK-21 cells monolayers were infected with 1000 to 0.1 TCID50 of PV and after 2 hours the cells were transfected with each of tree RNAs in separate using Lipofectamine-2000. All three siRNAs reduced the titer of PV strain in a least 0.72 logTCID50/mL and no cytotoxic effect was observed in the monolayers treated with Lipofectamine-2000. Swiss albino mice infected with 10.000 to 1 LD of PV strain by the intracerebral route were also transfected after two hours of infection with a pool 3 siRNAs with Lipofectamine-2000 by the intracerebral route, resulting in a survival rate of 30% in mice inoculated with 100 LD50, while the same dose led to 100% mortality in untreated animals. Lipofectamine-2000 showed no toxic effect in control mice. These results suggest that intracerebral administration of siRNAs might be an effective antiviral strategy for rabies.
Descritores: Antivirais/metabolismo
Interferência de RNA
RNA Interferente Pequeno/metabolismo
Vírus da Raiva/efeitos dos fármacos
Vírus da Raiva/fisiologia
Raiva/tratamento farmacológico
Replicação Viral/efeitos dos fármacos
-Linhagem Celular
Modelos Animais de Doenças
Proteínas do Nucleocapsídeo/antagonistas & inibidores
RNA Interferente Pequeno/genética
Análise de Sobrevida
Carga Viral
Cultura de Vírus
Limites: Animais
Cricetinae
Camundongos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-489522
Autor: Figueiredo, L. T. M; Moreli, M. L; Borges, A. A; Figueiredo, G. G; Souza, R. L. M; Aquino, V. H.
Título: Expression of a hantavirus N protein and its efficacy as antigen in immune assays
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;41(7):596-599, July 2008. ilus.
Idioma: en.
Projeto: FAPESP.
Resumo: Hantavirus cardiopulmonary syndrome (HCPS) has been recognized as an important public heath problem. Five hantaviruses associated with HCPS are currently known in Brazil: Juquitiba, Araraquara, Laguna Negra-like, Castelo dos Sonhos, and Anajatuba viruses. The laboratory diagnosis of HCPS is routinely carried out by the detection of anti-hantavirus IgM and/or IgG antibodies. The present study describes the expression of the N protein of a hantavirus detected in the blood sample of an HCPS patient. The entire S segment of the virus was amplified and found to be 1858 nucleotides long, with an open reading frame of 1287 nucleotides that encodes a protein of 429 amino acids. The nucleotide sequence described here showed a high identity with the N protein gene of Araraquara virus. The entire N protein was expressed using the vector pET200D and the Escherichia coli BL21 strain. The expression of the recombinant protein was confirmed by the detection of a 52-kDa protein by Western blot using a pool of human sera obtained from HCPS patients, and by specific IgG detection in five serum samples of HCPS patients tested by ELISA. These results suggest that the recombinant N protein could be used as an antigen for the serological screening of hantavirus infection.
Descritores: Antígenos Virais
Síndrome Pulmonar por Hantavirus/diagnóstico
Hantavirus/imunologia
Proteínas do Nucleocapsídeo
-Antígenos Virais/genética
Antígenos Virais/imunologia
Proteínas do Capsídeo/imunologia
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
Escherichia coli
Vetores Genéticos
Imunoglobulina G/imunologia
Proteínas do Nucleocapsídeo/genética
Proteínas do Nucleocapsídeo/imunologia
Proteínas do Core Viral/imunologia
Limites: Seres Humanos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME



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