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Pesquisa : E01.370.225.500.620.670.325.680 [Categoria DeCS]
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Id: biblio-886917
Autor: PASSAMANI, PAULO Z; CARVALHO, CARLOS R; SOARES, FERNANDA A F.
Título: Protocol for chromosome-specific probe construction using PRINS, micromanipulation and DOP-PCR techniques
Fonte: An. acad. bras. ciênc;90(1):41-47, Mar. 2018. graf.
Idioma: en.
Resumo: ABSTRACT Chromosome-specific probes have been widely used in molecular cytogenetics, being obtained with different methods. In this study, a reproducible protocol for construction of chromosome-specific probes is proposed which associates in situ amplification (PRINS), micromanipulation and degenerate oligonucleotide-primed PCR (DOP-PCR). Human lymphocyte cultures were used to obtain metaphases from male and female individuals. The chromosomes were amplified via PRINS, and subcentromeric fragments of the X chromosome were microdissected using microneedles coupled to a phase contrast microscope. The fragments were amplified by DOP-PCR and labeled with tetramethyl-rhodamine-5-dUTP. The probes were used in fluorescent in situ hybridization (FISH) procedure to highlight these specific regions in the metaphases. The results show one fluorescent red spot in male and two in female X chromosomes and interphase nuclei.
Descritores: Reação em Cadeia da Polimerase/métodos
Primers do DNA/genética
Marcação in Situ com Primers/métodos
Análise Citogenética/métodos
-Sondas de DNA/genética
Reprodutibilidade dos Testes
Hibridização in Situ Fluorescente/métodos
Cromossomos Humanos X/genética
Microdissecção/métodos
Limites: Humanos
Tipo de Publ: Estudo de Avaliação
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-668377
Autor: Almeida, Danilo C. de; Santos, Rodrigo da S; Ribeiro-Paes, João T.
Título: Exequibility of differential gene expression analysis by DDRT-PCR in murine bone marrow cells / Exequibilidade do DDRT-PCR para análise da expressão gênica diferencial em células de medula óssea murina
Fonte: Medicina (Ribeiräo Preto);45(4):424-431, out.-nov. 2012.
Idioma: pt.
Resumo: Model of study: Experimental study. Introduction: Recently, stem cell research has generated great interest due to its applicability in regenerative medicine. Bone marrow is considered the most important source of adult stem cells and the establishment of new methods towards gene expression analysis regarding stem cells has become necessary. Thus Differential Display Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (DDRT-PCR) may be an accessible tool to investigate small differences in the gene expression of different stem cells in distinct situations. Aim: In the present study, we investigated the exequibility of DDRT-PCR to identify differences in global gene expression of mice bone marrow cells under two conditions. Methods: First, bone marrow cells were isolated fresh and a part was cultivated during one week without medium replacement. Afterwards, both bone marrow cells (fresh and cultivated) were submitted to gene expression analyses by DDRT-PCR...

Modelo do estudo: Estudo Experimental. Introdução: Atualmente a pesquisa com células-tronco tem gerado grande interesse devido a sua aplicabilidade no campo na medicina regenerativa. A medula óssea é considerada a maior fonte de células-tronco adultas e o estabelecimento de novos métodos para a análise da expressão gênica torna-se estritamente necessário. Desse modo, o "Differential Display Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (DDRT-PCR)", pode ser uma ferramenta acessível para investigação de pequenas diferenças no nível de expressão gênica em diferentes tipos celulares, sob distintas condições. Objetivo: Neste presente trabalho nós investigamos a exequibilidade do DDRT-PCR na identificação de diferenças no nível de expressão gênica global em células da medula óssea de camundongos sob duas condições. Métodos: Primeiramente, a medula óssea foi isolada frescamente e uma secunda parte foi cultivada por uma semana sem troca de meio. Posteriormente, as células da medula (fresca e cultivada) foram submetidas a análise da expressão gênica, seguindo a metodologia de DDRT-PCR...
Descritores: Células da Medula Óssea
Expressão Gênica
Reação em Cadeia da Polimerase
Marcação in Situ com Primers
Responsável: BR26.1 - Biblioteca Central


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Id: lil-267774
Autor: Dzik, Artur; Armbruster Moraes, Edecio; Pinotti, Jose Aristodemo; Zugaib, Marcelo.
Título: Diagnostico genetico pre-implantacional / Polymerase chain reaction (PCR), fluorescence in situ hybridization (FISH) and primed in situ (PRINS)
Fonte: Rev. ginecol. obstet;10(4):227-9, out.-dez. 1999.
Idioma: pt.
Resumo: O diagnostico genetico pre-implantacional (PGD) e um novo procedimento que pode ser utilizado como diagnostico precoce pre-natal em casais com risco de transmissao de doencas geneticas. Utilizando "polymerase chain reaction" (PCR), "fluorescence in-situ hybridization" (FISH) e "primed in-situ" (PRINS) pode-se determinar o genotipo ou sexo genetico do embriao biopsiado obtido por...
Descritores: Cuidado Pré-Concepcional/classificação
Diagnóstico Pré-Implantação/métodos
Reação em Cadeia da Polimerase
-Hibridização in Situ Fluorescente
Marcação in Situ com Primers/métodos
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Responsável: BR66.1 - Divisão de Biblioteca e Documentação



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