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Id: biblio-827608
Autor: Moya, Graciela.
Título: Valoración ética de las nuevas opciones reproductivas en las enfermedades mitocondriales / Ethical value of new reproductive choices in mitochondrial diseases / Valoração ética das novas opções reprodutivas nas enfermidades mitocondriais
Fonte: Acta bioeth;22(2):213-220, nov. 2016.
Idioma: es.
Resumo: Las enfermedades mitocondriales son un grupo de desórdenes clínicamente heterogéneo con manifestaciones clínicas muy variables y alta tasa de morbi-mortalidad. Tienen complejas implicancias en la reproducción, ya que los riesgos de repetición en la familia son variables, 25% en las formas autosómicas recesivas, alrededor de 4% en los casos de mutaciones mitocondriales de novo, y un riesgo incierto pero elevado si la madre es portadora de las mutaciones mitocondriales. Por ello, se proponen distintas técnicas de diagnóstico preimplantacional, prenatal o de reproducción asistida a fin de evitar el nacimiento de niños con esta patología. En el presente trabajo se describen y analizan las implicancias científicas y éticas de las nuevas técnicas de reproducción asistida que se proponen a las familias con alto riesgo.

Mitochondrial diseases are a clinically heterogeneous group of disorders with variable clinical features and high morbidity and mortality. As there are different hereditary patterns, complex implications in reproduction are expected; the recurrence risk may be about 25% in autosomal recessive inheritance, 4% in de novo mitochondrial mutations, and an uncertain, but high risk, when the mother is carrier of mitochondrial mutations. Thus, different preimplantation and prenatal diagnosis or assisted reproductive techniques are proposed to avoid the birth of children with these diseases. In this paper scientific and ethical implications of new assisted reproductive techniques offer to high risk families are describe and analyzed.

As enfermidades mitocondriais são um grupo de desordens clinicamente heterogêneos com manifestações clínicas muito variáveis e alta taxa de morbi-mortalidade. Têm complexas implicações na reprodução, já que os riscos de repetição na família são variáveis, 25% nas formas autossômicas recessivas, ao redor de 4% nos casos de mutações mitocondriais de novo, e um risco incerto porém elevado se a mãe é portadora das mutações mitocondriais. Por isso, se propõem distintas técnicas de diagnóstico pré-implantacional, pré-natal ou de reprodução assistida a fim de evitar o nascimento de crianças com esta patologia. No presente trabalho se descrevem e analisam as implicações científicas e éticas das novas técnicas de reprodução assistida que se propõem às famílias com alto risco.
Descritores: Doenças Mitocondriais
Mitocôndrias/transplante
Técnicas de Reprodução Assistida/ética
-Técnicas de Transferência Nuclear
Limites: Humanos
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Id: biblio-827607
Autor: De Miguel Beriain, Iñigo; Atienza Macías, Elena; Armaza Armaza, Emilio José.
Título: Algunas consideraciones sobre la transferencia mitocondrial: ¿un nuevo problema para la bioética? / Some thoughts on the mitochondrial transfer: a new issue for bioethics? / Algumas considerações sobre a transferência mitocondrial: um novo problema para a bioética?
Fonte: Acta bioeth;22(2):203-211, nov. 2016.
Idioma: es.
Projeto: Gobierno Vasco. Departamento de Educación, Universidades e Investigación. Cátedra Interuniversitaria Diputación Foral de Bizkaia de Derecho y Genoma Humano, Universidad de Deusto y Universidad del País Vasco UPV/EHU.
Resumo: En febrero de 2015 el Reino Unido dio el primer paso para la aprobación de la transferencia mitocondrial como técnica terapéutica. Teóricamente, gracias a eso será posible para muchas mujeres engendrar descendencia libre de patologías asociadas a defectos mitocondriales. Sin embargo, esta práctica enfrenta severas dudas desde un punto de vista ético. Entre las objeciones destacan: su estrecha vinculación con la clonación humana; la alteración de los genes de la línea germinal; la modificación de la identidad del ser humano al que dará lugar; la destrucción de embriones humanos que envuelve, o el elevado riesgo que encierra para la salud del ser humano resultante. En este texto se analiza la solvencia de todas estas objeciones de forma crítica, resaltando las fortalezas de algunas de ellas. En particular, se aboga por una restricción cuidadosa del uso de esta técnica, que promueva el empleo de alternativas más respetuosas con la salud del futuro ser humano.

In February 2015 the United Kingdom took the first step towards the adoption of mitochondrial transfer as a therapeutic technique. Theoretically, it will make it possible for many women to get rid of pathologies associated with mitochondrial defects. However, this practice has been subjected to severe doubts from an ethical standpoint. Among these objections, we could highlight the following: its close association with human cloning; the alteration of the germline genes; the modification in the identity of the human being involved; the destruction of human embryos; or the high risk to the health of the human being. In this text we will analyze these objections critically, highlighting the strength of all of them. As a result, we will call for a careful restriction of the use of this technique, and the promotion of the use of alternative options much more respectful of the human future.

Em fevereiro de 2015 o Reino Unido deu o primeiro passo para a aprovação da transferência mitocondrial como técnica terapêutica. Teoricamente, graças a isso será possível a muitas mulheres engendrar descendência livre de patologias associadas a defeitos mitocondriais. No entanto, esta prática enfrenta severas dúvidas a partir de um ponto de vista ético. Entre as objeções destacam: sua estreita vinculação com a clonagem humana; a alteração dos genes da linha germinal; a modificação da identidade do ser humano ao qual dará lugar; a destruição de embriões humanos que envolve, ou o elevado risco que encerra para a saúde do ser humano resultante. Neste texto se analisa a solvência de todas estas objeções de forma crítica, ressaltando as fortalezas de algumas delas. Em particular, se advoga por uma restrição cuidadosa do uso desta técnica, que se promova o emprego de alternativas mais respeitosas com a saúde do futuro ser humano.
Descritores: Clonagem de Organismos/ética
Terapia Genética/ética
Terapia de Substituição Mitocondrial/ética
Mitocôndrias/transplante
Técnicas de Transferência Nuclear/ética
-Bioética
Limites: Humanos
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Meirelles, Flávio V
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Id: lil-705861
Autor: Bressan, Fabiana F; Sangalli, Juliano R; Pessôa, Laís V F; Pires, Pedro R L; Meirelles, Flávio V.
Título: Insights on bovine genetic engineering and cloning / Experiências em clonagem e transgenia em bovinos
Fonte: Pesqui. vet. bras = Braz. j. vet. res;33(supl.1):113-118, dez. 2013. ilus.
Idioma: en.
Projeto: CNPq; . FAPESP; . FAPESP.
Resumo: Transgenic technology has become an essential tool for the development of animal biotechnologies, and animal cloning through somatic cell nuclear transfer (SCNT) enabled the generation of genetically modified animals utilizing previously modified and selected cell lineages as nuclei donors, assuring therefore the generation of homogeneous herds expressing the desired modification. The present study aimed to discuss the use of SCNT as an important methodology for the production of transgenic herds, and also some recent insights on genetic modification of nuclei donors and possible effects of gene induction of pluripotency on SCNT.

Tecnologias de modificação genética têm se tornado ferramentas essenciais para o desenvolvimento de biotecnologias animais. A clonagem animal mediante transferência nuclear de célula somática (TNCS) possibilitou a geração de animais geneticamente modificados através da utilização de linhagens celulares previamente modificadas e selecionadas como doadoras de núcleo, garantindo desta maneira a geração de rebanhos homogênoes expressando a modificação desejada. O presente estudo objetivou discutir o uso da TNCS como importante metodologia para a produção de rebanhos transgênicos, assim como experiências recentes na manipulação genética de células doadoras de núcleo e possíveis efeitos da indução gênica à pluripotência na TNCS.
Descritores: Animais Geneticamente Modificados/genética
Biotecnologia/métodos
Células-Tronco Pluripotentes/transplante
Clonagem de Organismos/veterinária
-Técnicas de Transferência Nuclear/veterinária
Limites: Animais
Bovinos
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


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Id: lil-705764
Autor: Oliveira, R.J.; Mantovani, M.S.; da Silva, A.F.; Pesarini, J.R.; Mauro, M.O.; Ribeiro, L.R..
Título: Compounds used to produce cloned animals are genotoxic and mutagenic in mammalian assays in vitro and in vivo
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;47(4):287-298, 8/4/2014. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: The compounds 6-dimethylaminopurine and cycloheximide promote the successful production of cloned mammals and have been used in the development of embryos produced by somatic cell nuclear transfer. This study investigated the effects of 6-dimethylaminopurine and cycloheximide in vitro, using the thiazolyl blue tetrazolium bromide colorimetric assay to assess cytotoxicity, the trypan blue exclusion assay to assess cell viability, the comet assay to assess genotoxicity, and the micronucleus test with cytokinesis block to test mutagenicity. In addition, the comet assay and the micronucleus test were also performed on peripheral blood cells of 54 male Swiss mice, 35 g each, to assess the effects of the compounds in vivo. The results indicated that both 6-dimethylaminopurine and cycloheximide, at the concentrations and doses tested, were cytotoxic in vitro and genotoxic and mutagenic in vitro and in vivo, altered the nuclear division index in vitro, but did not diminish cell viability in vitro. Considering that alterations in DNA play important roles in mutagenesis, carcinogenesis, and morphofunctional teratogenesis and reduce embryonic viability, this study indicated that 6-dimethylaminopurine and cycloheximide utilized in the process of mammalian cloning may be responsible for the low embryo viability commonly seen in nuclear transfer after implantation in utero.
Descritores: Adenina/análogos & derivados
Ensaio Cometa
Clonagem de Organismos/métodos
Cicloeximida/toxicidade
Mutagênicos/toxicidade
-Adenina/toxicidade
Técnicas de Cultura de Células
Corantes
Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos
Citocinese/efeitos dos fármacos
/efeitos dos fármacos
HEP GTEMEFOS CELLS/efeitos dos fármacos
Mamíferos
Testes para Micronúcleos
Testes de Mutagenicidade
Técnicas de Transferência Nuclear
Sais de Tetrazólio/farmacologia
Tiazóis/farmacologia
Azul Tripano/farmacologia
Limites: Animais
Humanos
Masculino
Camundongos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-700407
Autor: Arias, María E; Ross, Pablo J; Felnier, Ricardo N.
Título: Culture medium composition affects the gene expression pattern and in vitro development potential of bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos
Fonte: Biol. Res;46(4):452-462, 2013. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: Different culture systems have been studied that support development of somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos up to the blastocyst stage. However, the use of sequential and two-step culture systems has been less studied. The objective of the present study was to examine the developmental potential and quality of bovine SCNT embryos cultured in different two-step culture media based on KSOM, SOF and the macromolecules FBS and BSA (K-K/FBS, K-S/BSA and K-K/BSA, respectively). No differences were observed in the cleavage rate for any of the culture systems. However, there was a significant difference (P<0.01) in the rate of blastocyst development, with the K-K/ FBS culture system yielding a higher rate of blastocysts (28%) compared to other treatments (18 and 15%, for K-S/BSA and K-K/BSA, respectively). Although quality of embryos, as assessed by the total number of cells, was not different, the apoptosis index was significantly affected in the sequential culture system (K-S/BSA). Gene expression analysis showed alterations of DNMT1, IGF2, LIF, and PRDX6 genes in embryos cultured in K-S/FBS and of SOD2 in embryos cultured in K-K/BSA. In conclusion, we demonstrated that culture medium may affect not only the developmental potential of SCNT embryos but also, more importantly, the gene expression pattern and apoptotic index, presenting the possibility to manipulate the culture medium composition to modulate global gene expression and improve the overall efficiency of this technique.
Descritores: Blastocisto/fisiologia
Técnicas de Cultura Embrionária/veterinária
Desenvolvimento Embrionário/fisiologia
Regulação da Expressão Gênica no Desenvolvimento/fisiologia
Técnicas de Transferência Nuclear/veterinária
-Técnicas de Cultura Embrionária/métodos
Limites: Animais
Bovinos
Feminino
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Id: lil-687024
Autor: Besio Rollero, Mauricio.
Título: Los pseudoembriones: ¿una inteligibilidad en el límite de nuestra inteligencia? / Pseudo embryos: intelligibility in the limit of our intelligence? / Os pseudo-embriões: uma inteligibilidade no limite de nossa inteligência?
Fonte: Acta bioeth;18(2):209-219, nov. 2012.
Idioma: es.
Resumo: La investigación científica ha posibilitado nuevas esperanzas en la curación de diversas patologías provocadas por procesos degenerativos o por daño directo sobre órganos y tejidos. Una de las líneas de estudio más prometedoras es la utilización de células pluripotenciales, siendo su fuente principal los embriones obtenidos en las técnicas de fertilización asistida. Mas los cuestionamientos éticos respecto a la utilización y destrucción de ellos ha llevado al ingenio humano a desarrollar entidades que semejan embriones pero que no lo serían esencialmente. Si esto fuera cierto, su utilización para obtener esas valiosas células no sería objetable. Estos pseudoembriones desafían a nuestra inteligencia a establecer su verdadero estatuto ontológico. Este trabajo busca reflexionar sobre la dificultad para aplicar los distintos criterios que utiliza nuestra inteligencia para identificar o no, en una serie de entidades naturales y creadas por el hombre, la presencia de un individuo humano con todos sus derechos y dignidad.

Scientific research has made possible new hopes for the cure of diverse pathologies provoked by degenerative processes or by direct damage on organs and tissues. One of the fields of study most promising is the use of pluripotential cells, being their main origin embryos obtained by assisted reproduction techniques. But, the ethical questioning with respect to their use and destruction has guided human talent to develop entities similar to embryos, but not essentially. If this were true, their use to obtain these valuable cells will not be ethically objectionable. These pseudo embryos challenge our intelligence to establish their true ontological statute. This article reflects about the difficulty in applying the different criteria that our intelligence uses to identify or not the presence of a human being with all his/her rights and dignity in a series of natural and created by man entities.

A investigação científica tem possibilitado novas esperanças na cura de diversas patologias provocadas por processos degenerativos ou por dano direto sobre órgãos e tecidos. Uma das linhas de estudo mais promissoras é a utilização de células pluripotenciais, sendo sua fonte principal os embriões obtidos nas técnicas de fertilização assistida. Mas os questionamentos éticos a respeito da utilização e destruição deles tem levado a engenhosidade humana a desenvolver entidades que se assemelham a embriões, mas que não seriam essencialmente. Se isto for certo, sua utilização para obter essas valiosas células não seria objetável. Estes pseudo-embriões desafiam a nossa inteligência a estabelecer seu verdadeiro estatuto ontológico. Este trabalho busca refletir sobre a dificuldade para aplicar os distintos critérios que utiliza a nossa inteligência para identificar ou não, numa série de entidades naturais e criadas pelo homem, a presença de um indivíduo humano com todos os seus direitos e dignidade.
Descritores: Início da Vida Humana
Criação de Embriões para Pesquisa/ética
Filosofia Médica
Células-Tronco
Técnicas de Transferência Nuclear/ética
-Reprogramação Celular/ética
Responsável: CL305.1 - Centro de Documentación


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Id: lil-602982
Autor: Felmer D, Ricardo; Arias, María Elena.
Título: Developmental rates of bovine nuclear transfer embryos derived from different fetal non transfected and transfected cells
Fonte: Electron. j. biotechnol;14(3):5-5, May 2011. ilus, tab.
Idioma: en.
Projeto: FONDECYT; . FONDEF.
Resumo: Since the first successful somatic cell nuclear transfer (SCNT) experiments were carried out, a number of domestic and agriculture species have been cloned using donor cells derived from different sources and origin. However, differences in nuclear transfer efficiency both in vitro and in vivo have been generally observed. These differences may be accentuated when transgenic cell lines are used as nuclear donors in an attempt to generate transgenic cloned offspring. The present study examined the suitability of cell lines derived from 3 different fetal sources and the effects of genetic manipulation of donor fetal fibroblasts with a red fluorescent plasmid, on the in vitro developmental potential and quality of nuclear transfer derived bovine embryos. We observed no differences in the cleavage rate of nuclear transfer embryos generated with any of the cell lines evaluated. However, the blastocyst rate was significantly affected when cell lines were derived from the 3 different fetal sources (21, 18 and 11 percent, respectively) or from 2 transgenic clonal cell lines that had originated from the same primary fetal cell (18 and 10 percent, respectively). Despite this difference, quality of embryos as measured by the total number of cells and by assessing some morphology aspects of their appearance was not different. Together these results indicate that fetal fibroblast cell lines derived from different fetal sources and transgenic clonal cell lines that had originated from the same fetus results in different in vitro developmental potential when used as donors for nuclear transfer experiments. Further studies, including evaluation of pregnancy rates, development to term, and epigenetic modifications of these cell lines will be necessary to better understand the differences observed in nuclear transfer efficiency.
Descritores: Clonagem de Organismos
Embrião de Mamíferos
Técnicas de Transferência Nuclear
-Animais Geneticamente Modificados
Blastômeros
Fibroblastos
Oócitos
Transfecção
Limites: Animais
Bovinos
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Miglino, Maria Angélica
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Id: lil-589857
Autor: Santos, Caio Rodrigues dos; Grandi, Fabrizio; Miglino, Maria Angélica; Meirelles, Flávio Vieira; Maiorka, Paulo César.
Título: Patologia de neonatos bovinos originados por meio da técnica de transferência nuclear de células somáticas: clonagem / Pathology of bovine neonates generated by somatic cell nuclear transfer: cloning
Fonte: Braz. j. vet. res. anim. sci;47(6):447-453, 2010. ilus.
Idioma: pt.
Resumo: Os mecanismos de morte em animais clonados a partir de células somáticas são poucos elucidados. Malformações de órgãos, alterações de tamanho e peso desses animais foram anomalias já descritas, porém em casos isolados. Desse modo, estudos nos níveis anátomo e histopatológicos são de suma importância para ajudar a compreensão dos fatores responsáveis pelos altos índices de insucessos com a utilização da TNCS (transferência nuclear de células somáticas). Assim, o presente trabalho foi realizado com o objetivo de descrever, por meio de exames anatomopatológicos, as alterações presentes em um grupo de animais gerados por TNCS, que vieram a óbito entre 1 e 19 dias de vida. Esse experimento foi realizado entre os anos de 2004 e 2008 na fazenda Tambaú, cidade de Tambaú, Estado de São Paulo. No total foram gerados 21 animais da raça Nelore (Bos indicus), sendo que 11 vieram a óbito e dez apresentaram boa evolução clínica no período perinatal. Foram realizadas as necropsias dos animais e posterior análise histopatológica de tecidos alterados. Esse estudo mostrou alta prevalência de alterações cardiopulmonares, que provavelmente foram determinantes nos mecanismos de morte dos animais. Dentre essas alterações a hipertensão pulmonar e modificações hemodinâmicas diagnosticadas através do exame histopatológico foram as mais frequentes.

The death mechanisms in cloned animals are not well elucidated. There are few cases describing organ malformation, size and weight alterations in these animals. Pathologic studies are necessary to understand the high level of unsuccessful results using the NTSC (nuclear transfer somatic cell) technique. The present study was carried out to describe alterations present in a group of animals generated by NTSC technique that deceased between 0 to 19 days of life, using anatomopathologic examination. This experiment was conducted at Tambaú Farm in São Paulo State between years 2004 and 2008. Initially there were twenty one Nelore breed Bos indicus animals, but 11 of them deceased and ten survived and showed satisfactory clinical evolution in perinatal period. Animals necropsies and histopathologic analyses where performed. The results revealed a high prevalence of cardiopulmonary alterations, which were predominantly lung hypertension and hemodynamic profile changes, revealed by histopathologic analyses.
Descritores: Bovinos
Patologia
-Técnicas de Transferência Nuclear/veterinária
Limites: Animais
Bovinos
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


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Id: lil-444840
Autor: Melo, E. O; Sousa, R. V; Iguma, L. T; Franco, M. M; Rech, E. L; Rumpf, R.
Título: Isolation of transfected fibroblast clones for use in nuclear transfer and transgene detection in cattle embryos
Fonte: Genet. mol. res. (Online);4(4):812-821, 2005. tab, ilus.
Idioma: en.
Resumo: Transgenesis in cattle has provided numerous opportunities for livestock production. The development of nuclear transfer (NT) technology has improved the production of transgenic livestock. However, the isolation of pure colonies from a single transfection event remains laborious and can be a constraint in the production of transgenic livestock. We used 96-well cell culture plates to isolate cell lineages obtained from a single fibroblast transfected with the pCi-Neo plasmid. Since single mammalian cells do not grow well in fresh medium, we evaluated the use of conditioned medium. The neomycin phosphotransferase gene was detected in isolated colonies and NT embryos were produced from these cells. Multiplex-PCR assays were performed to detect the transfected fragment as well as autosomal satellite DNA in single NT embryos. This approach provided a reliable method for isolating transfected mammalian cells and for diagnosing the incorporation of desirable vectors in NT embryos. This method can reduce the time and cost of transgenic livestock production.
Descritores: Animais Geneticamente Modificados/genética
Bovinos/genética
Técnicas de Transferência Nuclear
Transgenes/genética
-Animais Geneticamente Modificados/embriologia
Bovinos/embriologia
Fibroblastos/citologia
Núcleo Celular/genética
Limites: Animais
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-429246
Autor: Valenzuela, Carlos Y.
Título: El riesgo de malformaciones congénitas y defectos de la programación genómica, en relación con las técnicas de reproducción asistida y la clonación / The risk of congenital malformations and genomic imprinting defects in assisted reproductive technologies and nuclear transfer cloning
Fonte: Rev. méd. Chile;133(9):1075-1080, sept. 2005.
Idioma: es.
Resumo: Recent studies show that assisted reproductive technologies (ART), whether in vitro fertilization (IVF) or intra-cytoplasmatic sperm injection (ICSI) or applied to cloning by somatic cell nuclear transfer (SCNT) are associated to a higher risk of congenital malformations and errors in deprogramming, maintenance or reprogramming genomic imprinting in humans and animals. IVF and ICSI are also associated to an increased admission to neonatal intensive care units and more need for health care resources in infancy. A mutagenic effect of a chemical used in SCNT has been reported and gene depression was found in bovine embryos obtained by IVF or SCNT. The causes of these anomalies could be pathological conditions for which ART is applied, a direct effect of technologies on the zygotes or embryos, avoidance for zygotes or embryos of the oviduct path that is needed to elicit necessary immunity or genomic programming processes, or adaptive selective steps acquired during thousands of millions of generations in evolution. The knowledge of evolution is emphasized as essential in the scientific ethical analysis.
Descritores: Clonagem de Organismos
Anormalidades Congênitas
Impressão Genômica
Técnicas de Transferência Nuclear
Técnicas de Reprodução Assistida/efeitos adversos
-Transferência Embrionária
Técnicas de Reprodução Assistida
Limites: Animais
Bovinos
Humanos
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: BR1.1 - BIREME



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