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Id: lil-751422
Autor: Sato, Renato Cesar; Sato, Graziela Tiemy Kajita.
Título: Probabilistic graphic models applied to identification of diseases / Modelos probabilísticos gráficos aplicados à identificação de doenças
Fonte: Einstein (Säo Paulo);13(2):330-333, Apr-Jun/2015. graf.
Idioma: en.
Resumo: ABSTRACT Decision-making is fundamental when making diagnosis or choosing treatment. The broad dissemination of computed systems and databases allows systematization of part of decisions through artificial intelligence. In this text, we present basic use of probabilistic graphic models as tools to analyze causality in health conditions. This method has been used to make diagnosis of Alzheimer´s disease, sleep apnea and heart diseases.

RESUMO A tomada de decisões é um aspecto fundamental na conduta de um diagnóstico ou tratamento. A ampla difusão dos sistemas computacionais e dos bancos de dados permite sistematizar, por meio do uso da inteligência artificial, parte dessa tomada de decisão. Neste texto, é apresentada, de modo básico, a possibilidade de uso dos modelos gráficos probabilísticos como ferramenta de análise na causalidade das condições de saúde. Essa metodologia vem sendo utilizada para diagnósticos da doença de Alzheimer, apneia do sono e doenças cardiológicas.
Descritores: Transformação Celular Neoplásica/genética
Trato Gastrointestinal/patologia
Oncogenes
-Neoplasias Gastrointestinais/patologia
MICE, INBRED CABDOMENABDOMINAL INJURIESBL
Técnicas de Cultura de Órgãos
Limites: Animais
Camundongos
Tipo de Publ: Research Support, N.I.H., Extramural
Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-703346
Autor: Santos, Adriana; Grijalba, Erika; Zuluaga, María Victoria; Gómez, Martha; Villamizar, Laura.
Título: Compatibilidad in vitro de un bioplaguicida a base de Lecanicillium lecanii (Hypocreales: Clavicipitaceae) con agroquímicos empleados en los cultivos de algodón y berenjena / In vitro compatibility of the biopesticide based on Lecanicillium lecanii (Hypocreales: Clavicipitaceae) with agrochemicals used in cotton and eggplant crops
Fonte: Rev. colomb. biotecnol;15(2):132-142, jul.-dic. 2013. graf.
Idioma: es.
Resumo: El aislamiento colombiano de Lecanicillium lecanii Vl026 formulado como un granulado dispersable WG, ha demostrado una alta eficiencia para el control de Bemisia tabaci en los cultivos de algodón y berenjena. Teniendo en cuenta el potencial de este bioinsumo, el objetivo del siguiente fue determinar la compatibilidad in vitro del bioplaguicida a base de L. lecanii con agroquímicos (insecticidas y fungicidas) que se utilizan con mayor frecuencia en dichos cultivos. La compatibilidad in vitro se estableció determinando el porcentaje de germinación (%) y las Unidades Formadoras de Colonia (UFC) en presencia de los plaguicidas y estimando la concentración inhibitoria 10 (CI10). Cada plaguicida se evaluó a la dosis recomendada, a la mitad y a un cuarto de ésta. Los fungicidas químicos (Benomil®, Vitavax®, Ridomil® y Manzate®) no fueron compatibles con L. lecanii, ya que inhibieron la germinación y las Unidades Formadoras de Colonia del hongo en las tres dosis evaluadas. En cuanto a los insecticidas químicos, el producto Confidor® no inhibió la viabilidad en comparación con el tratamiento control, considerándose compatible con el bioplaguicida. Cuando se evaluó la dosis completa de los demás insecticidas (Oportune®, Actara®, Match® y Malathion®) se obtuvieron germinaciones inferiores al 80%, por lo que dichos productos se clasificaron como no compatibles con el bioplaguicida a base de L. lecanii. El único agroquímico que fue compatible en condiciones in vitro con L. lecanii fue el producto Confidor®. Sin embargo, se recomienda evaluar el efecto in vivo de los productos químicos habitualmente utilizados por los agricultores sobre L. lecanii, con el propósito de desarrollar y establecer estrategias de manejo integrado de la mosca blanca Bemisia tabaci.

A colombian isolate of Lecanicillium lecanii formulated as dispersible granules WG, has shown high efficiency to control Bemisia tabaci in cotton and eggplant crops. Considering that, the objetive of this work was to determine the in vitro compatibility of biopesticide based on L. lecanii with agrochemicals (insecticides and fungicides) that are most frequently used in tobacco and eggplant crops. In vitro compatibility of L. lecanii with agrochemicals was determinated by germination (%) and Colony Forming Units (CFU) in the presence of pesticides and also estimating the inhibitory concentration 10 (IC10). Each agrochemical was evaluated at the recommended dose, a half and a quarter of it. For the three doses tested (Benomyl®, Vitavax®, Ridomil® and Manzate®) were not compatible with L. lecanii, because these inhibited germination and Colony Forming Units of the fungus. Confidor® did not inhibit viability compared to control treatment, and it was considered compatible with the biopesticide. When the recommended dose (Oportune®, Actara®, Match® and Malathion®)was used, the germination of the L. lecanii was lower than 80%, then these products were classified as non-compatible with the biopesticide based on L. lecanii. The only agrochemical that was compatible in vitro with L. lecanii was Confidor®. However, is necesary to evaluate the in vivo effect of agrochemicals commonly used by farmers on L. lecanii, in order to develop and establish integrated management strategies for the control of the whitefly Bemisia tabaci.
Descritores: Agroquímicos
Gossypium
Hypocreales
Solanum melongena
-Cultivos Agrícolas
Fibra de Algodão
Técnicas de Cultura de Órgãos
Responsável: CO326 - Departamento de Biología


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Id: lil-695799
Autor: Agudelo-Flórez, Piedad; Murillo, Victoria Eugenia; Londoño, Andrés Felipe; Rodas, Juan David.
Título: Histopathological kidney alterations in rats naturally infected with Leptospira / Alteraciones histopatológicas en ratas naturalmente infectadas con Leptospira
Fonte: Biomédica (Bogotá);33(supl.1):82-88, set. 2013. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: Introduction: Histopathological changes by Leptospira in naturally infected rodent reservoirs have been poorly described. Objective: The aim of the current study is to describe renal histopathology associated with leptospirosis infection of naturally infected rodents captured in the urban area of the city of Medellin, Colombia. Materials and methods: We performed hematoxilin-eosin (H-E) on kidney samples collected from 254 captured rodents. The positive samples were processed by Warthin Starry (W-S) staining and PCR- LipL 32. Results: Fifty one rodent kidneys showed H-E histopathological changes that consisted of inflammatory infiltrate with lympho-plasmocitary cells and histiocytes. We performed W-S staining and PCR- LipL 32 to 67 kidney samples, including the 51 that had shown detectable changes by H-E and 16 (8%) of 203 rodents with negative results. Eight of the samples that tested positive for H-E (15.7%) were also positive for W-S staining. All negative for H-E were also negative for W-S staining. Of the W-S positive samples also tested for culture only three tested positive for both. Additionally, 47 (92.1%) samples positive for H-E were positive for PCR; while eleven of the 16 (68.8%) negative for H-E were positive for PCR. The samples positive for PCR were subsequently tested for culture and 11 (23.4%) were positive. Seven samples were positive for PCR and W-S and three were positive for PCR, W-S and culture. All of the PCR- LipL 32 fragments were sequenced and showed specific amplicons for L. interrogans . Conclusions: The Leptospira infection was confirmed in all of the animals tested. The only histological kidney lesion attributable to leptospiral infection in the reservoir was interstitial nephritis.

Introducción. Los hallazgos histopatológicos ocasionados por Leptospira spp. han sido poco estudiados en poblaciones de roedores naturalmente infectados. Objetivo. Describir la histopatología renal asociada con las infecciones naturalmente adquiridas en un grupo de roedores capturados en el área urbana de Medellín, Colombia. Materiales y métodos. Se llevaron a cabo coloraciones de hematoxilina y eosina de los riñones de 254 roedores recolectados en el área de estudio. Las muestras positivas se procesaron con la coloración de Warthin-Starry y mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR)-LipL32. Results. Se observaron cambios histopatológicos con hematoxilina y eosina en 51 riñones de roedores, que consistieron en infiltrado inflamatorio con linfoplasmocitos e histiocitos. Se utilizó coloración de Warthin-Starry y PCR-LipL32 en 67 muestras de riñón que incluyeron las 51 muestras que tuvieron cambios detectables por hematoxilina y eosina y 16 de 203 (8 %) muestras con resultados negativos. Ocho de las muestras positivas por hematoxilina y eosina (15,7 %) también fueron positivas por la coloración de Warthin-Starry. Las muestras negativas por hematoxilina y eosina (8 %) también fueron negativas con la coloración de Warthin-Starry. Tres de las ocho muestras positivas por esta última, también lo fueron por cultivo. Además, 47 (92,1 %) muestras positivas por hematoxilina y eosina fueron positivas por PCR. Del grupo de 16 negativos por hematoxilina y eosina, 11 (68,8 %) fueron positivos por PCR. De las muestras positivas por PCR, 11 también lo fueron por cultivo (23,4 %). Siete muestras fueron positivas por PCR y Warthin-Starry y tres lo fueron por PCR, Warthin-Starry y cultivo. Todos los fragmentos de la PCR-LipL32 fueron secuenciados y mostraron secuencias específicas de L. interrogans . Conclusiones. Se confirmó la infección por Leptospira y la única lesión presente en el reservorio atribuible fue la nefritis intersticial.
Descritores: Animais Selvagens/microbiologia
Reservatórios de Doenças/microbiologia
Rim/patologia
Leptospirose/veterinária
Ratos/microbiologia
Doenças dos Roedores/patologia
-Doenças Assintomáticas
Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/genética
Bacteriúria/microbiologia
Bacteriúria/veterinária
Colômbia
Túbulos Renais/microbiologia
Rim/microbiologia
Leptospira/genética
Leptospira/isolamento & purificação
Lipoproteínas/genética
Nefrite Intersticial/microbiologia
Nefrite Intersticial/patologia
Nefrite Intersticial/veterinária
Técnicas de Cultura de Órgãos
Reação em Cadeia da Polimerase
Doenças dos Roedores/microbiologia
Coloração e Rotulagem/métodos
Saúde da População Urbana
Limites: Animais
Feminino
Masculino
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: CO332 - Facultad de Medicina


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Id: lil-613269
Autor: Rogers, Nicole; Bustos, Benjamín; González, Rodrigo.
Título: Neuroprotección mediada por BDNF y óxido nítrico frente a excitotoxicidad en neuronas corticales e hipocampales / BDNF and nitric oxide-mediated neuroprotection against excitotoxicity in cortical and hippocampal neurons
Fonte: Rev. ANACEM (Impresa);3(2):24-27, dic. 2009. ilus, tab, graf.
Idioma: es.
Resumo: En la epilepsia del lóbulo temporal (ELT), el hipocampo y estructuras temporales adyacentes se convierten en foco epiléptico, lo que ocurre después de un insulto cerebral, como una convulsión prolongada (o Status Epilepticus [SE]). Posterior al insulto, en el hipocampo ocurre muerte neuronal por excitotoxicidad, es decir, por sobre estimulación de receptores glutamatérgicos tipo NMDA (R-NMDA) y síntesis de óxido nítrico (NO) por la óxido nítrico sintasa neuronal (nNOS), una enzima dependiente de calcio. Sin embargo, otras estructuras cerebrales, como la corteza cerebral, son más resistentes al daño excitotóxico. Postulamos que esta menor susceptibilidad de la corteza cerebral a la excitotoxicidad, se debería a neuroprotección dependiente de la neurotrofina BDNF, que se sabe estimula la sobrevida neuronal. Se utilizaron cultivos neuronales primarios de hipocampo y corteza cerebral. Para evaluar excitotoxicidad, se agregó NMDA 30 uM. Se utilizaron estrategias farmacológicas para poner a prueba esta hipótesis, como el uso de L-NNA (inhibidor NOS), y TrkB-Fc (atrapador de BDNF). Se evaluó el porcentaje de sobrevida celular mediante el test de exclusión de Azul de Tripán. La viabilidad de los cultivos después de agregar NMDA fueron: corticales 71,2 +/- 2,8 por ciento, hipocampales 24,6 +/- 2,2 por ciento (p<0,01). Al inhibir la NOS, la viabilidad fue: corticales 31 +/- 6,5 por ciento, hipocampales 79,2 +/- 5,4 por ciento (p<0,01). En ausencia de BDNF fue: corticales 28,7+/- 7,9 por ciento, hipocampales 88,9 +/- 3 por ciento (p<0,01). Concluimos que después de un insulto excitotóxico, BDNF/NO son neuroprotectores en neuronas corticales pero no hipocampales. La potenciación de mecanismos neuroprotectores podría ser una alternativa terapéutica en patologías que involucran muerte neuronal por excitotoxicidad.

In temporal-lobe epilepsy (TLE), the hippocampus and adjacent temporal structures become an epileptic focus following a brain insult, such as a prolonged seizure (or Status Epilepticus). After the insult, neuronal death by excitotoxicity ocurrs, this is, by over stimulation of NMDA-type glutamate receptors (R-NMDA) and nitric oxide sinthesis by neuronal nitric oxide synthase (nNOS), a calcium-dependant enzyme. However, other brain structures, such as the cerebral cortex, are much more resistant to an excitotoxic challenge. We propose that the decreased susceptibility of the cerebral cortex could be explained by neuroprotection mediated by the neurotrophin BDNF, which is known to stimulate neuronal survival. Primary hippocampal and cortical neuronalcultures were used. To evaluate excitotoxicity, 30 uM NMDA was added. The signaling pathways to be tested were inhibited by using pharmacological inhibitors: L-NNA (NOS inhibitor), and TrkB-Fc, a BDN-scavenger. Percentages of cellular survival were evaluated using the Trypan Blue exclusion test. The viability of the cultures after adding NMDA was: larger in cortical than in hippocampal cultures, 71,2 +/- 2,8 percent for cortical and 24,6 +/- 2,2 percent hippocampal cells (p<0,01). When inhibiting NOS, the viability was: 31 +/- 6,5 percent for cortical and 79,2 +/- 5,4 percent for hippocampal cells (p<0,01). In absence of BDNF, 28,7 +/- 7,9 percent of the cortical cells survived, while in the hippocampal cultures it was of 88,9 +/- 3 percent (p<0,01). We conclude that after an excitotoxic insult, BDNF/NO are neuroprotective in cortical but not hippocampal neurons. The potentiation of such neuroprotective mecanisms could be used as a therapeutic alternative in pathologies that involve neuronal death by excitotoxicity.
Descritores: Córtex Cerebral/metabolismo
Fator Neurotrófico Derivado do Encéfalo/fisiologia
Fármacos Neuroprotetores/metabolismo
Óxido Nítrico/fisiologia
Síndromes Neurotóxicas/metabolismo
-Sobrevivência Celular
Citoproteção
Estado Epiléptico/metabolismo
Hipocampo/metabolismo
Neurônios/fisiologia
Neurotoxinas/toxicidade
Técnicas de Cultura de Órgãos
Receptores de N-Metil-D-Aspartato/fisiologia
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Id: lil-587240
Autor: Grosso, Stana Helena Giorgi.
Título: Avaliação da mudança na expressão gênica em tumores de mama após tratamento com rapamicina / Rapamycin induced transcriptional profile of breast cancer mantained in organ culture.
Fonte: São Paulo; s.n; 2008. 117 p.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: A via AKT/PI3K apresenta-se geralmente alterada nos diversos tipos de cânceres humanos e a alteração dos componentes desta via ocorre através da ativação de oncogenes ou inativação de genes supressores tumorais levando a transformações celulares que podem promover a tumorigênese. No câncer de mama a via AKT/PI3K pode ser ativada por Erb-B2, receptores dos fatores de crescimento de insulina (IGF), receptores de estrógeno e perda da expressão do gene PTEN. mTOR (proteína alvo da rapamicina em mamíferos) é uma serina treonina quinase, membro da via AKT/PI3K que se encontra envolvida em múltiplas funções biológicas como controle da tradução, transcrição, degradação protéica e biogênese ribossomal. A ativação desta proteína resulta na fosforilação e ativação de seus principais substratos 4EBP1 e S6K1, requeridos para a biossíntese ribossomal e tradução de RNAms importantes para controle e progressão no ciclo celular. A rapamicina é uma droga com propriedades fungicidas, imunossupressoras e anticancerígenas que atua na inibição de mTOR afetando a expressão de genes envolvidos no metabolismo e síntese protéica. No nosso estudo avaliamos os elementos da via do AKT através de análise imunoistoquímica em fatias de tumores mantidos em cultura de órgão antes e depois do tratamento com rapamicina. A cultura de órgão mantém uma interação entre o epitélio mamário e estroma podendo-se preservar o microambiente que reconstitui o comportamento da célula tumoral. Nesta análise imunoistoquímica observamos uma diminuição significativa de 4EBP1 nas fatias dos tumores tratados com rapamicina em relação aos casos controles. Além disso, fizemos uma avaliação da mudança no perfil da expressão gênica nestas fatias tumorais sub-divididas em Erb-B2 positivos e negativos através da análise por microarray e observamos que a maioria dos genes afetados estavam envolvidos com as funções de transcrição e tradução celulares...

The AKT/ PI3K pathway are frequently disturbed in many human cancers and the alteration of the components of this pathway occurs through activation of oncogenes or inactivation of tumor suppresors leading to cellular transformation that can promove tumorigenesis. In breast cancer the AKT/PI3K pathway can be activated by ERb-B2, the insulin like growth factor (IGF), estrogen receptors and PTEN loss. mTOR (mammalian target of rapamycin) is a serine threonine kinase, member of the AKT/PI3K pathway, which is involved in multiple biologic functions such as transcription, translation, protein degradation and ribosome biogenesis. The activation of this protein results in phosphorilation and activation of S6K1 and 4EBP1, two downstream signaling elements that are required for ribosomal biosynthesis and mRNAs translation, which is important for cell cycle control and progression. Rapamycin is a potent fungicide, immunossupressive and anticancer agent that inhibits mTOR affecting the expression of genes involved in metabolism and protein synthesis. In the present study we examined some elements of AKT pathway by immunohistochemistry analysis in samples of breast cancer mantained in organ culture before and after treatment with rapamycin. The organ culture maintain an interaction between the mammary epithelium and stroma preserving the micro-environment and restoring the tumor cell behavior. In this immunohistochemistry analysis we noticed a significative decrease of 4EBP1 in the samples of tumors treated with rapamycin compared with the control cases. Besides this, we determined the variation of gene expression profile through microarray analysis in these samples subdivided in positive and negative Erb-B2 and we have identified that most part of the affected genes were mainly involved in cellular transcription and translation...
Descritores: Neoplasias da Mama
Análise em Microsséries
Biomarcadores
Técnicas de Cultura de Órgãos
Sirolimo
Limites: Seres Humanos
Feminino
Responsável: BR66.1 - Divisão de Biblioteca e Documentação
BR66.1; W4.DB8, G922av, FM-2, 2008


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Id: lil-538430
Autor: Magalhães, Deborah de Melo; Araújo, Valdevane Rocha; Verde, Isabel Bezerra Lima; Matos, Maria Helena Tavares de; Silva, Renata Carvalho; Lucci, Carolina Madeira; Báo, Sônia Nair; Campello, Cláudio Cabral; Figueiredo, José Ricardo de.
Título: Different Follicle-Stimulating Hormone (FSH) sources influence caprine preantral follicle viability and development in vitro / Diferentes origens do Hormônio Folículo Estimulante (FSH) influenciam a viabilidade e o desenvolvimento de folículos pré-antrais caprinos
Fonte: Braz. j. vet. res. anim. sci;46(5):378-386, 2009. ilus, tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: The aim of this study was to evaluate the effects of pituitary (pFSH) or recombinant (rFSH) FSH on the survival and growth of caprine preantral follicles. Caprine ovarian tissues were in vitro cultured for one or seven days in Minimum Essential Medium (MEM) alone or containing 10, 50, 100 and 1000 ng/ml of pFSH or rFSH. Control tissues (non-cultured) and those cultured were processed for histological and ultrastructural studies. In addition, follicular and oocyte diameter were analysed. After seven days of culture, only 50ng/ml of rFSH maintained the percentage of normal follicles similar to control. Moreover, 10 ng/ml of pFSH and all the concentrations of rFSH promoted primordial follicles activation. In addition, the presence of 50 ng/ml of rFSH promoted the highest follicular diameter at day seven of culture. In conclusion, 50 ng/ml of rFSH maintained the ultrastructural integrity of caprine preantral follicles, promoted primordial follicles activation and further growth of cultured follicles.

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do FSH pituitário (pFSH)ou recombinante (rFSH) sobre a sobrevivência e o crescimento de folículos pré-antrais caprinos. O tecido ovariano foi cultivado in vitro por um ou sete dias em Meio Essencial Mínimo (MEM) sozinho, ou contendo 10, 50, 100 e 1000 ng/ml de pFSH ou rFSH. O grupo controle (não cultivado) e aqueles cultivados foram processados para análises histológica e ultra-estrutural. Além disso, os diâmetros folicular e oocitário foram avaliados. Após sete dias de cultivo, apenas 50 ng/ml de rFSH manteve o percentual de folículos normais semelhante ao controle. Além disso, 10 ng/ml de pFSH e todas as concentrações de rFSH promoveram ativação de folículos primordiais. A presença de50 ng/ml de rFSH promoveu o maior diâmetro folicular após sete dias de cultivo. Em conclusão, 50 ng/ml de rFSH manteve a integridadede folículos pré-antrais caprinos e promoveu a ativação e o crescimento dos folículos cultivados.
Descritores: Hormônio Foliculoestimulante
Folículo Ovariano/crescimento & desenvolvimento
Folículo Ovariano/ultraestrutura
Cabras
-Meios de Cultura
Técnicas de Cultura de Órgãos
Limites: Animais
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


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Id: lil-525657
Autor: Bittencourt, Renata Aparecida de Camargo; Pereira, Hamilton Rosa; Felisbino, Sérgio Luís; Ferreira, Rosana Rossi; Guilherme, Gabrielle Reinoldes Bizarria; Moroz, Andrei; Deffune, Elenice.
Título: Cultura de condrócitos em arcabouço tridimensional: hidrogel de alginato / Chondrocyte cultures in tridimensional scaffold: alginate hydrogel
Fonte: Acta ortop. bras;17(4):242-246, 2009. ilus, tab.
Idioma: en; pt.
Resumo: OBJETIVOS: O presente estudo teve como objetivo cultivar condrócitos retirados da articulação do joelho de coelhos encapsulados em hidrogel de alginato (HA) e caracterizar a produção de matriz extracelular (ECM). MÉTODOS: A cartilagem articular foi removida do joelho de coelhos, com três a seis meses, fragmentada em pedaços de 1mm e submetida à digestão enzimática. Uma concentração de 1x106 céls/mL foram ressuspensas em uma solução de alginato de sódio a 1,5 por cento (w/v), em seguida fez-se o processo de gelatinização em CaCl2 (102 mM), permitindo a formação do HA e cultivo em meio DMEM-F12 durante quatro semanas. A distribuição das células e a ECM foram acessadas através das secções histológicas coradas com e azul de toluidina hematoxilina e eosina (HE). RESULTADOS: Houve um aumento no número e na viabilidade dos condrócitos durante as quatro semanas de cultura. Através das análises histológicas dos HAs corados com azul de toluidina e HE foi possível observar a distribuição definida dos condrócitos no hidrogel, assemelhando-se a grupos isógenos e formação de matriz territorial. CONCLUSÃO: Este estudo demonstrou a eficiência do HA como arcabouço para ser usado na cultura de condrócitos, constituindo uma alternativa no reparo de lesões na cartilagem articular.

OBJECTIVES: The aim of this study was to culture chondrocytes from knee joint cartilage of rabbits encapsulated in alginate hydrogel (HA) and to characterize the production of extracelular matrix (ECM). METHODS: Joint cartilage was obtained from rabbits' knees, three to six months old, fragmented into 1-mm pieces and submitted to enzymatic digestion. A concentration of 1x106 cells/mL were re-suspended into a 1.5 percent (w/v) sodium alginate solution, followed by gel formation process with CaCl2 (102 mM), allowing HA to build for culturing it into a DMEM-F12 medium for four weeks. The distribution of cells and ECM were assessed from histological slices stained toluidine blue and hematoxyline-eosin (HE). RESULTS: There was an increase of the number and viability of the chondrocytes during the four weeks of culture. By assessing the histological sections stained with toluidine blue and HE, we could note the definitive distribution of chondrocytes in the hydrogel, similarly to isogenous groups and territorial matrix formation. CONCLUSION: In this study, the alginate was shown to be an effective scaffold for use in chondrocytes culture, constituting an alternative for repairing joint cartilage defects.
Descritores: Regeneração Óssea
Cartilagem Articular/fisiopatologia
Condrócitos/metabolismo
Hidrogel de Polietilenoglicol-Dimetacrilato/farmacocinética
-Alginatos
Técnicas de Cultura de Órgãos
Limites: Animais
Coelhos
Responsável: BR734.1 - Biblioteca Central Cesar Lattes - BCCL


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Id: lil-519664
Autor: Payão, Spencer L. M; Segato, Rosimeire; Santos, Ricardo R.
Título: Controle genético das células-tronco humanas cultivadas / Genetic control of cultivated human stem cells
Fonte: Rev. bras. hematol. hemoter;31(supl.1):15-18, maio 2009.
Idioma: pt.
Resumo: As células-tronco apresentam uma alta capacidade de autorregeneração, assim como, um potencial de diferenciação em uma variedade de tipos celulares. Estas células podem ser classificadas como embrionárias e adultas. Apesar de apresentar propriedades de células-tronco, as mesenquimais apresentam um certo grau de dificuldade no estabelecimento das culturas, podendo induzir a perda da expressão da enzima responsável pela imortalização ou enzima telomerase. A enzima telomerase é considerada um relógio biológico, um indicador que a senescência celular irá se instalar inevitavelmente. A questão mais atual e intrigante dos pesquisadores é se o suposto potencial de divisão, por um determinado período de tempo, das células-tronco cultivadas poderia levar ao acúmulo de alterações genéticas e epigenéticas, resultando em um processo neoplásico. Daí a importância do papel da citogenética humana no controle e monitoramento das células-tronco cultivadas que serão utilizadas na terapia em seres humanos. Alterações cromossômicas estruturais, tais como deleções, translocações e inversões, representam um mecanismo importante pelo qual as células cancerígenas desenvolvem-se gradualmente, uma vez que estas alterações cromossômicas podem levar a uma expressão anormal de muitos genes, podendo desencadear assim o processo neoplásico.

Stem cells have a high capacity of self-regeneration, as well as a potential to differentiate into several cell types. These cells can be classified as embryonic or adult. In spite of having inherent properties of stem cells, mesenchymal cells show a certain degree of difficulty to establish cultures. This might induce a loss of the expression of the telomerase enzyme which is considered to be a biological clock or an indicator of the senescence of the cells. The most current and intriguing question for researchers is whether the presumed division potential of cultivated stem cells, over a period of time could result in an accumulation of genetic alterations and consequently, in a neoplastic process. For this reason, cytogenetic techniques are very important to guarantee the control and safety of cultivated stem cells to be used in human therapy. Structural chromosomal alterations, such as for example, deletions, translocations and inversions represent an important mechanism by which cells might gradually transform in a neoplastic process. Thus, these chromosomal alterations could result in an abnormal expression of the genes and lead to cancer.
Descritores: Análise Citogenética
Cariotipagem
Técnicas de Diagnóstico Molecular
Técnicas de Cultura de Órgãos
Células-Tronco
Telomerase
Expansão de Tecido
Limites: Seres Humanos
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: BR408.1 - Biblioteca da Faculdade de Medicina - BFM


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Id: lil-502442
Autor: Vivas O'Connor, Virginia; Uhlemann, Harald; Tilgen, Wolfang.
Título: Análisis de los medios de transporte y cultivo de piel para auto o aloinjerto humano / Analysis of transport and culture skin medium for human auto or aloinjert
Fonte: Salus;3(3):9-26, dic. 1999. ilus, tab.
Idioma: es.
Resumo: Las condiciones óptimas para la conservación y transporte de piel humana destinada al cultivo de queratinocitos para autotransplante son el motivo de este estudio. Se simularon condiciones de transporte, colocando muestras de piel humana tanto joven (prepucios de niños, n=305) como maduras (piel de mastectomías, n=616) en cinco diferentes medios: Medio de crecimiento de queratinocitos (KGM, n=276), Medio de crecimiento 3T3 (3T3GM, n=220), Solución Ringer (SR, n=174), Solución Salina Isotónica (SS, n=128) y Solución Buffer Fosfato (PBS, n=123), a 21ºC y 4ºC respectivamente, por 1,24 y 72 horas, al cabo de las cuales se prepararon cultivos de queratinocitos a partir de dichas muestras. Se determinó tanto la Eficacia Formadora de Colonias (EFC) como el porcentaje de células muertas. El medio óptimo para el transporte y/o preservación de piel humana es el KGM, a 4ºC y hasta por 72 horas expresado por los valores significativamente más altos de EFC=0,67 por ciento (p<0,001) al compararlo a los restantes medios. PBS y SS mostraron la EFC más baja (0,28 y 0,26 por ciento respectivamente, p<0,001). La prueba de viabilidad celular con azul tripán, luego de la preservación de la piel, no se correlacionó con los valores de la EFC (r=-0,05; p>0,05), siendo éste último el método más confiable y adecuado para evaluar el potencial formador de colonias de las células provenientes de las muestras de piel. Los queratinocitos provenientes de piel de donantes jóvenes (prepucio de niños) tienen un potencial mayor de formar colonias (EFC=0,70) que la piel de adultos (de mastectomía) (EFC=0,38; p<0,001). Estos resultados caracterizan las condiciones óptimas de un potencial sistema de envío de muestras de piel destinadas a la preparación de injertos de queratinocitos para pacientes hospitalizados a distancia del laboratorio de cultivo
Descritores: Técnicas de Cultura de Órgãos
Queratinócitos/transplante
Transplante de Pele
-Cirurgia Geral
Venezuela
Limites: Seres Humanos
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: VE1.1 - Biblioteca Humberto Garcia Arocha


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Id: lil-497222
Autor: Cristovam, Priscila Cardoso; Glória, Maria Aparecida da; Melo, Gustavo Barreto; Gomes, José Álvaro Pereira.
Título: Importância do co-cultivo com fibroblastos de camundongo 3T3 para estabelecer cultura de suspensão de células epiteliais do limbo humano / Importance of 3T3 feeder layer to establish epithelial cultures from cell suspension obtained from corneo-scleral rims
Fonte: Arq. bras. oftalmol;71(5):689-694, set.-out. 2008. ilus, tab.
Idioma: pt.
Resumo: OBJETIVO: Avaliar a importância da presença de células 3T3 para estabelecer cultura de suspensão de células epiteliais do limbo obtido de rimas córneo-esclerais. MÉTODOS: Rimas de diferentes doadores tiveram seus estroma posterior e endotélio removidos (n=6). Cada rima foi dividida em três segmentos iguais, que foram colocados em cultura em três diferentes condições: um segmento foi colocado na placa de cultura com o lado epitelial para cima (Grupo A). Os dois segmentos restantes foram tripsinizados e a suspensão de células obtida foi cultivada com (Grupo B) ou sem (Grupo C) células 3T3 irradiadas. As células foram mantidas em meio de cultura "supplemental hormonal epithelial médium" (SHEM), a migração epitelial e a formação de clones nos grupos A, B e C foram avaliadas pela microscopia de contraste de fase e por coloração pela rodamina B. Os resultados foram comparados estatisticamente. RESULTADOS: O crescimento de células epiteliais foi observado em 4/6 rimas (Grupo A). Todas as suspensões de células epiteliais que foram cultivadas com células 3T3 (Grupo B) formaram clones. Nenhuma adesão ou formação de clones verdadeiros (holo ou meroclones) foi observada na cultura de células que foi cultivada sem 3T3 (Grupo C) (p=0,009). CONCLUSÕES: Suspensão de células epiteliais límbicas obtidas de rimas córneo-esclerais no modelo utilizado precisa ser cultivada com células 3T3 para formar clones e estabelecer colônias epiteliais com perspectivas para uso terapêutico na reconstrução da superfície ocular.

PURPOSE: To evaluate the importance of the presence of 3T3 fibroblasts for establishing limbal epithelial cultures from cell suspension obtained from corneo-scleral rims (CSR). METHODS: Corneo-scleral rims from different donors (n=6) had their posterior stroma and endothelium stripped away. Each corneo-scleral rim was divided into three equal segments that were set up in tissue culture in three different conditions: one of the segments was placed with the epithelial side up on the bottom of a 6-well culture plate (Group A). The other two fragments were trypsinized and the obtained cell suspension was cultured with (Group B) or without (Group C) irradiaded 3T3 cells. The cells were cultured in supplemental hormonal epithelial medium (SHEM), the epithelial migration and clone formation in groups A, B and C were evaluated with phase contrast microscopy and rodamine B staining. RESULTS: Epithelial cell growth was observed in 4/6 rims (Group A). All epithelial cell suspensions that were cultured with 3T3 cells (Group B) formed clones. No adhesion or true clone formation (holo- or meroclones) was observed in the cell suspensions that were cultivated without 3T3 (Group C) (p=0.009). CONCLUSIONS: Epithelial cell suspension obtained from corneo-scleral rims in this model needs to be cultivated with 3T3 cells in order to form clones and establish limbal epithelial cell colonies with the potential to be used for ocular surface reconstruction.
Descritores: Células Epiteliais/citologia
Epitélio Anterior/citologia
Limbo da Córnea/citologia
-ABATTOIRSTABATTOIRS CELLS
Proliferação Celular
Técnicas de Cocultura
Técnicas de Cultura de Órgãos
Fenótipo
Fatores de Tempo
Limites: Adulto
Animais
Feminino
Seres Humanos
Masculino
Camundongos
Meia-Idade
Responsável: BR1.1 - BIREME



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