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Id: biblio-1278443
Autor: Suhandono, Sony; Kusuma, Subhan Hadi; Meitha, Karlia.
Título: Characterization and Production of Rhamnolipid Biosurfactant in Recombinant Escherichia coli Using Autoinduction Medium and Palm Oil Mill Effluent
Fonte: Braz. arch. biol. technol;64:e21200301, 2021. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: LPDP (Indonesia Endowment Fund for Education).
Resumo: Abstract Rhamnolipid is a potent biodegradable surfactant, which frequently used in pharmaceutical and environmental industries, such as enhanced oil recovery and bioremediation. This study aims to engineer Escherichia coli for the heterologous host production of rhamnolipid, to characterize the rhamnolipid product, and to optimize the production using autoinduction medium and POME (palm oil mill effluent). The construction of genes involved in rhamnolipid biosynthesis was designed in two plasmids, pPM RHLAB (mono-rhamnolipid production plasmid) and pPM RHLABC (di-rhamnolipid production plasmid). The characterization of rhamnolipid congeners and activity using high-resolution mass spectrometry (HRMS) and critical micelle concentration (CMC). In order to estimate rhamnolipid yield, an oil spreading test was performed. HRMS and CMC result show E. coli pPM RHLAB mainly produced mono-rhamnolipid (Rha-C14:2) with 900 mg/L and 35.4 mN/m of CMC and surface tension value, whereas E. coli pPM RHLABC mainly produced di-rhamnolipid (Rha-Rha-C10) with 300 mg/L and 34.3 mN/m of CMC and surface tension value, respectively. The optimum condition to produce rhamnolipid was at 20 h cultivation time, 37 oC, and pH 7. In this condition, the maximum rhamnolipid yield of 1245.68 mg/L using autoinduction medium and 318.42 mg/L using 20% (v/v) of POME. In conclusion, the characteristics of the rhamnolipid by recombinant E. coli is very promising to be used in industries as the most economical way of producing rhamnolipid.
Descritores: Óleo de Palmeira
Escherichia coli
Fenômenos Eletromagnéticos
-Glicosilação
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: biblio-1250254
Autor: Wang, Xiaoli; Xiao, Qian; Zhu, Yudan; Qi, Hong; Qu, Dongxiao; Yao, Yu; Jia, Yuxiang; Guo, Jingkan; Cheng, Jiwei; Ji, Yonghua; Li, Guoyi; Tao, Jie.
Título: Glycosylation of ß1 subunit plays a pivotal role in the toxin sensitivity and activation of BK channels
Fonte: J. venom. anim. toxins incl. trop. dis;27:e20200182, 2021. tab, graf, ilus.
Idioma: en.
Projeto: National Natural Science Foundation of China; . 82074162; . Youth Talent Promotion Project of China Association of Chinese Medicine; . Shanghai Municipal Commission of Health and Family Planning Fund; . Project for Capacity Promotion of Putuo District Clinical Special Disease; . Science and Technology Innovation Project of Putuo District Health System.
Resumo: The accessory ß1 subunits, regulating the pharmacological and biophysical properties of BK channels, always undergo post-translational modifications, especially glycosylation. To date, it remains elusive whether the glycosylation contributes to the regulation of BK channels by ß1 subunits. Methods: Herein, we combined the electrophysiological approach with molecular mutations and biochemical manipulation to investigate the function roles of N-glycosylation in ß1 subunits. Results: The results show that deglycosylation of ß1 subunits through double-site mutations (ß1 N80A/N142A or ß1 N80Q/N142Q) could significantly increase the inhibitory potency of iberiotoxin, a specific BK channel blocker. The deglycosylated channels also have a different sensitivity to martentoxin, another BK channel modulator with some remarkable effects as reported before. On the contrary to enhancing effects of martentoxin on glycosylated BK channels under the presence of cytoplasmic Ca2+, deglycosylated channels were not affected by the toxin. However, the deglycosylated channels were surprisingly inhibited by martentoxin under the absence of cytoplasmic Ca2+, while the glycosylated channels were not inhibited under this same condition. In addition, wild type BK (α+ß1) channels treated with PNGase F also showed the same trend of pharmacological results to the mutants. Similar to this modulation of glycosylation on BK channel pharmacology, the deglycosylated forms of the channels were activated at a faster speed than the glycosylated ones. However, the V1/2 and slope were not changed by the glycosylation. Conclusion: The present study reveals that glycosylation is an indispensable determinant of the modulation of ß1-subunit on BK channel pharmacology and its activation. The loss of glycosylation of ß1 subunits could lead to the dysfunction of BK channel, resulting in a pathological state.(AU)
Descritores: Glicosilação
Peptídeo-N4-(N-acetil-beta-glucosaminil) Asparagina Amidase
Mutação
-Farmacologia
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


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Id: biblio-886788
Autor: SANTOS, GABRIEL F DOS; TAKAHASHI, JACQUELINE A.
Título: A New Acetylcholinesterase Inhibitor from Green Glycosylation of Trachyloban-19-oic Acid by Mucor plumbeus
Fonte: An. acad. bras. ciênc;89(3,supl):1961-1969, 2017. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: ABSTRACT The in vitro metabolism of a widespread natural product, trachyloban-19-oic acid (1), by the fungal species Mucor plumbeus was studied in a sucrose-yeast liquid medium. Two products were isolated, and their structures were determined by spectroscopic means as 7β-hydroxytrachyloban-19-oic acid (5) and trachyloban-19-O-β-D-glucopyranosyl ester (6). To the best of our knowledge, compound 6 is herein reported by the first time in the literature. These compounds were assayed for acetylcholinesterase inhibition along with some related compounds. Compound 6 showed the highest acetylcholinesterase inhibitory activity at 10000 µg/mL among the tested compounds, a result (92.89%) comparable to the activity of the positive control, galanthamine (94.21%). Therefore, biotransformation of the natural product 1 by M. plumbeus produced a novel compound with potential as a new lead to develop anti-Alzheimer medicines.
Descritores: Inibidores da Colinesterase/metabolismo
Meios de Cultura/química
Diterpenos/metabolismo
Mucor/metabolismo
-Glicosilação
Extratos Vegetais
Biotransformação
Inibidores da Colinesterase/química
Diterpenos/química
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: biblio-943439
Autor: Bastos, Lilian Gonçalves dos Reis.
Título: Progênies derivadas de células de câncer colorretal que sobrevivem à radioterapia apresentamum aumento do potencial migratório e invasivo e desenvolvem um fenótipo EMT-like / [Progenies derived from colorectal cancer cells that survive radiation therapy show an increased migratory and invasive potential and develop an EMT-like phenotype].
Fonte: Rio de Janeiro; s.n; 2014. ilus.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Instituto Nacional de Câncer José Alencar Gomes da Silva para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: A radioterapia constitui uma das principais terapias adjuvantes para o tratamento de câncer colorretal em pacientes com estadiamento avançado. Porém, o esquema de fracionamento dedoses pode permitir a repopulação de células tumorais sobreviventes ao tratamento e o reaparecimento do tumor, a progressão tumoral e a ocorrência de metástases tardias. Nesteestudo, foram analisados os efeitos transgeneracionais induzidos pela radioterapia na progênie derivadas de células de câncer colorretal sobreviventes ao tratamento e avaliado o quanto a radiação poderia induzir um fenótipo mais agressivo nessas progênies. Os resultados mostraram que essas células apresentam uma radiorresistência diferencial entre si, e que as células mais radiorresistentes formam progênies com aumento da expressão da proteína survivina, aquisição de uma morfologia aberrante, desorganização das junções celulares e do citoesqueleto de actina. Também foi observado que a progênie derivada de células HT-29 sobreviventes à radiação apresentam um aumento do potencial migratório invasivo, bem como um aumento da atividade de TCF-LEF, seguido do aumento da expressão demarcadores mesenquimais e redução de E-caderina...

Radiotherapy remains a major approach to adjuvant therapy for patients with advanced colorectal cancer. However, radiotherapy fractionation schedules frequently allow for the repopulation of surviving tumors cells and tumor recurrence, neoplastic progression andsubsequent metastasis. In this study, we analyzed the transgenerational effects induced by radiation on the progeny derived from irradiated parental cells of colorectal cancer andevaluated whether the radiation could increase the malignant features of radiotherapysurvivors cells. Our results showed that these cells displayed a differential radioresistance andthat the most radioresistant progeny had a direct correlation with increased survivin expression, acquisition of an aberrant morphology, disturbance of the cell-cell adhesion contacts and actin cytoskeleton disorganization. We also observed that the progeny that werederived from irradiated HT-29 cells displayed an increased migratory and invasiveness potential as well as increased Wnt/β-catenin-dependent TCF/LEF activity followed by anupregulation of mesenchymal markers and downregulation of E-cadherin...
Descritores: Neoplasias Colorretais/genética
Neoplasias Colorretais/radioterapia
Glicosilação
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Tipo de Publ: Estudo de Avaliação
Responsável: BR440.1 - Biblioteca Geraldo Matos de Sá . Hospital do Câncer I
BR440.1


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Id: biblio-1052695
Autor: Ramírez Stieben, Luis Agustín; Brance, María Lorena.
Título: Mecanismos involucrados en la fragilidad ósea en diabetes mellitus / Mechanisms involved in the bone fragility in diabetes mellitus
Fonte: Actual. osteol;14(3):205-218, sept. - dic. 2018. ilus., graf..
Idioma: es.
Resumo: La diabetes es una enfermedad crónica asociada con importantes comorbilidades. El sistema esquelético parece ser un objetivo adicional de daño mediado por diabetes. Se acepta que la diabetes tipo 1 y tipo 2 se asocian con un mayor riesgo de fractura ósea. Varios estudios han demostrado que los cambios metabólicos causados por la diabetes pueden influir en el metabolismo óseo disminuyendo la calidad y la resistencia del hueso. Sin embargo, los mecanismos subyacentes no se conocen por completo pero son multifactoriales y, probablemente, incluyen los efectos de la obesidad, hiperglucemia, estrés oxidativo y acumulación de productos finales de glicosilación avanzada. Estos darían lugar a un desequilibrio de varios procesos y sistemas: formación de hueso, resorción ósea, formación y entrecruzamiento de colágeno. Otros factores adicionales como la hipoglucemia inducida por el tratamiento, ciertos medicamentos antidiabéticos con un efecto directo sobre el metabolismo óseo y mineral, así como una mayor propensión a las caídas, contribuirían al aumento del riesgo de fracturas en pacientes con diabetes mellitus. Esta revisión tiene como objetivo describir los mecanismos fisiopatológicas subyacentes a la fragilidad ósea en pacientes diabéticos. (AU)

Diabetes is a chronic disease associated with important comorbidities. The skeletal system seems to be an additional target of diabetes mediated damage. It is accepted that type 1 and type 2 diabetes are associated with an increased risk of bone fracture. Several studies have shown that metabolic changes caused by diabetes can influence bone metabolism by decreasing bone quality and resistance. However, the underlying mechanisms are not completely known but they are multifactorial and probably include the effects of obesity, hyperglycemia, oxidative stress and accumulation of advanced glycosylation end products. These would lead to an imbalance of several processes and systems: bone formation, bone resorption, formation and collagen crosslinking. Other additional factors such as treatment-induced hypoglycemia, certain antidiabetic medications with a direct effect on bone and mineral metabolism, as well as an increased propensity for falls, would contribute to the increased risk of fractures in patients with diabetes mellitus. This review aims to describe the pathophysiological mechanisms underlying bone fragility in diabetic patients. (AU)
Descritores: Osteogênese Imperfeita/fisiopatologia
Diabetes Mellitus/fisiopatologia
-Osteogênese Imperfeita/metabolismo
Osteogênese Imperfeita/tratamento farmacológico
Osteoporose/diagnóstico
Osso e Ossos/metabolismo
Glicosilação
Fatores de Risco
Estresse Oxidativo
Diabetes Mellitus/metabolismo
Diabetes Mellitus/epidemiologia
Diabetes Mellitus Tipo 1/complicações
Diabetes Mellitus Tipo 2/complicações
Fraturas Ósseas/complicações
Fraturas Ósseas/prevenção & controle
Hiperglicemia/complicações
Hipoglicemia/induzido quimicamente
Hipoglicemiantes/efeitos adversos
Obesidade/complicações
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Pessoa de Meia-Idade
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: AR2.1 - Biblioteca Central


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Id: biblio-1021894
Autor: Bensusan, Teresa.
Título: Patogenia. Factores de riesgo en Diabetes Mellitus / Pathogenesis. Risk factors in diabetes mellitus
Fonte: Rev. Soc. Argent. Diabetes;53(1):32-33, Ene.-Abr. 2019.
Idioma: es.
Resumo: La interacción entre uroepitelio y uropatógeno, base de la patogenia de las infecciones del tracto urinario (ITUs), puede derivar en la eliminación bacteriana por parte de la célula huésped o la invasión y multiplicación bacteriana. Dentro de la célula huésped los uropatógenos pueden perturbar las defensas y resistir el tratamiento antibiótico. En pacientes con diabetes, especialmente con enfermedad renal por diabetes, se ha demostrado una reducción de la capacidad de inhibición de la adherencia bacteriana al uroepitelio, por ende mayor posibilidad de invasión bacteriana. La glicosilación de todos los elementos del sistema inmune, incluida la menor liberación de factores como las interleuquinas a nivel urinario y la alteración del vaciamiento vesical por neuropatía autonómica, favorecen el desarrollo de este tipo de infecciones

Interaction between urothelium and uropathogen, the basis of the pathogenesis of urinary tract infections (UTIs), can lead to bacterial elimination by the host cell or bacterial invasion and multiplication. Inside the host cell, uropathogens can impair defenses and resist antibiotic treatment. In patients with diabetes, especially diabetes-related kidney disease, a reduction in the inhibition capacity of bacterial adherence to the urothelium has been demonstrated; therefore, a highest chance of bacterial invasion. The glycosylation of all elements of the immune system, including the lower release of factors such as interleukins at the urinary level and the impairment of bladder emptying by autonomic neuropathy, enhance the development of this type of infections
Descritores: Glicosilação
Diabetes Mellitus
Escherichia coli Uropatogênica
Uroplaquinas
Responsável: AR423.1 - Biblioteca


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Id: biblio-899422
Autor: Gudowska, Monika; Gindzienska-Sieskiewicz, Ewa; Gruszewska, Ewa; Cylwik, Bogdan; Sierakowski, Stanislaw; Szmitkowski, Maciej; Chrostek, Lech.
Título: Independence of carbohydrate-deficient isoforms of transferrin and cyclic citrullinated peptides in rheumatoid arthritis / Independência de isoformas de transferrina deficiente em carboidrato e peptídeos citrulinados cíclicos na artrite reumatoide
Fonte: Rev. bras. reumatol;57(3):185-189, May-June 2017. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: ABSTRACT Objective: The aim of this study was to assess the relationship between the two types of posttranslational modifications of proteins in RA: glycosylation on the example of carbohydrate-deficient transferrin and citrullination by means of autoantibodies to cyclic citrullinated peptides. Methods: The study was carried out in 50 RA patients. CDT was measured using N Latex CDT immunonephelometric test, the results were presented in absolute and relative units. Anti-CCP were measured using the chemiluminescent method and rheumatoid factor by immunoturbidimetric method. Results: 80% of RA patients were positive for anti-CCP, 70% for RF and 62% for both, anti-CCP and RF. The level of %CDT was significantly elevated, but absolute CDT level was not changed. The mean absolute CDT concentration was higher in anti-CCP positive patients than that in anti-CCP negative. CDT (absolute and relative concentration) did not correlate with anti-CCP and RF. However, serum RF significantly correlated with anti-CCP. %CDT did not correlate with anti-CCP, but absolute level correlated with anti-CCP only in anti-CCP negative and RF negative patients. CDT did not correlate with RF, but solely with anti-CCP in anti-CCP negative patients. Anti-CCP correlated with DAS 28 only in anti-CCP negative RA, but CDT (absolute and relative units) correlated with DAS 28 in all patients and in anti-CCP positive RA. Conclusions: These results suggest that the changes in CDT and anti-CCP concentrations are not associated with oneself and indicate on the independence of these posttranslational modifications in rheumatoid arthritis. Only the alterations in transferrin glycosylation reflected the activity of RA.

RESUMO Objetivo: Avaliar a relação entre os dois tipos de modificações pós-translacionais de proteínas na AR: glicosilação no caso da transferrina deficiente em carboidrato (TDC) e citrulinação por meio dos anticorpos no caso do antipeptídeo citrulinado cíclico (anti-CCP). Métodos: O estudo foi feito em 50 pacientes com AR. A TDC foi medida com o teste imunonefelométrico N Latex CDT e os resultados foram apresentados em unidades absolutas e relativas. O anti-CCP foi mensurado com o método quimioluminescente e o fator reumatoide (FR) pelo método imunoturbidimétrico. Resultados: Dos pacientes com AR, 80% foram positivos para anti-CCP, 70% para FR e 62% para ambos (anti-CCP e FR). A percentagem de transferrina total (%TDC) esteve significativamente elevada, mas o nível absoluto de TDC não esteve alterado. A concentração média de TDC absoluta foi maior nos pacientes anti-CCP positivos do que naqueles anti-CCP negativos. A TDC (concentração absoluta e relativa) não se correlacionou com o anti-CCP e o FR. No entanto, o FR sérico se correlacionou significativamente com o anti-CCP. O percentual de TDC não se correlacionou com o anti-CCP, mas seu nível absoluto se correlacionou com o anti-CCP apenas em pacientes FR negativos e anti-CCP negativos. A TDC não se correlacionou com o FR, somente com o anti-CCP em pacientes anti-CCP negativos. O anti-CCP se correlacionou com o DAS 28 apenas nos pacientes com AR anti-CCP negativos, mas a TDC (unidades absolutas e relativas) se correlacionou com o DAS 28 quando considerados todos os pacientes com AR e em pacientes com AR anti-CCP positivos. Conclusões: Esses resultados sugerem que as alterações na TDC e as concentrações de anti-CCP não estão associadas e indicam a independência dessas modificações pós-translacionais na artrite reumatoide. Apenas as alterações na glicosilação da transferrina refletem a atividade da AR.
Descritores: Peptídeos Cíclicos/imunologia
Artrite Reumatoide/imunologia
Fator Reumatoide/sangue
Transferrina/análogos & derivados
Anticorpos Anti-Proteína Citrulinada/sangue
Citrulinação
-Índice de Gravidade de Doença
Glicosilação
Transferrina/metabolismo
Biomarcadores/sangue
Estudos de Casos e Controles
Pessoa de Meia-Idade
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Adulto
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: biblio-1049943
Autor: Pena Júnior, Carlos Eduardo.
Título: Efeito das glicosilações sobre a estrutura e dinâmica da celulase Cel7A de Trichoderma reesei / Effect of glycosylations on the structure and dynamics of Cel7A cellulase from Trichoderma reesei.
Fonte: Rio de Janeiro; s.n; 2019. xiv, 152 p. ilus.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Instituto Oswaldo Cruz para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: Celulases fúngicas têm sido usadas para degradar a biomassa lignocelulósica para a produção de bioetanol. Celulases industriais como Cel7A de Trichoderma reesei (TrCel7A) são críticas neste processo. A compreensão da estrutura e dinâmica é crucial para a reengenharia da atividade celulolítica. Esta enzima é formada por dois domínios ligados por um linker flexível e altamente glicosilado. No entanto, a flexibilidade do linker tem dificultado a determinação da estrutura completa da Cel7A. Assim, na ausência de dados experimentais de alta resolução, aplicamos a modelagem integrativa para construir um modelo da enzima completa. Em seguida, estudamos os efeitos da glicosilação na estrutura e dinâmica da apo TrCel7A por meio de simulações. A análise da dinâmica essencial mostrou que a O-glicosilação no linker levou à estabilização da dinâmica global da proteína. Os glicanos O-ligados parecem restringir a distribuição dos ângulos diedros desta região, selecionando conformações mais alongadas. Além da flexibilidade reduzida, os movimentos interdomínios funcionais foram preservados no sistema glicosilado. Em contraste, observamos grande plasticidade conformacional na ausência de glicosilação, mas os domínios funcionais frequentemente colapsaram. Nós relatamos aqui evidências de que a flexibilidade dirigida no linker de Cel7A por mutações pontuais, incluindo modificações de sítios de glicosilação, poderia ser uma estratégia promissora para melhorar a atividade da celulase. (AU)
Descritores: Trichoderma
Glicosilação
Mutagênese Insercional
Celulases
Limites: Humanos
Responsável: BR15.1 - Biblioteca de Ciências Biomédicas


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Id: biblio-1051141
Autor: Troiano, Jéssica Antonini.
Título: Avaliação de mecanismos de modificação pós-traducional da óxido nítrico sintase endotelial (eNOS) associados a biodisponibilidade do óxido nítrico em artérias de ratas espontaneamente hipertensas (SHR) ao final da prenhez / Evaluation of post-translational modification mechanisms of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) associated with the nitric oxide bioavailability in arteries from spontaneously hypertensive rats (SHR) in the end of pregnancy.
Fonte: Araçatuba; s.n; 2019. 115 p. graf, ilus, tab.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade Estadual Paulista "Julio de Mesquita Filho". Faculdade de Odontologia de Araçatuba para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: A redução da reatividade vascular à fenilefrina (PE) em aorta de ratas espontaneamente hipertensas (SHR) ao final da prenhez é dependente de maior produção e/ou maior biodisponibilidade de óxido nítrico (NO), consequente do aumento da fosforilação da enzima óxido nítrico sintase endotelial (eNOS) via PI3K/Akt. A glicosilação do tipo N-acetil-glucosamina (O-GlcNAc) é uma modificação pós-traducional que compete com a fosforilação pelos mesmos sítios de ligação nas proteínas. A O-GlcNAcilação da eNOS em serina1177 leva a redução da sua atividade enquanto a fosforilação leva a sua ativação. Além destes mecanismos, a interação da eNOS com outras proteínas é capaz de regular positiva ou negativamente a sua atividade. O objetivo deste trabalho foi analisar possíveis alterações nos mecanismos de modificação pós-traducional que controlam a ativação da eNOS os quais poderiam contribuir para maior ativação e maior biodisponibilidade de NO observada em artérias de ratas prenhes. Foram avaliados o conteúdo proteico O-GlcNAc e também expressão das enzimas que participam desta modificação, O-GlcNAc transferase (OGT) e O-GlcNAcase (OGA) por Western Blotting e a atividade da OGA por ensaio bioquímico em aorta e em artéria mesentérica (2º ou 3º ramo) de ratas não prenhes (NP) e prenhes (P), normotensas (Wistar) e SHR. Ensaios de Western Blotting foram realizados também para análise da expressão das seguintes proteínas: Cav-1, p-Cav-1, CaM e Hsp90. Realizamos a contagem do número de cavéolas endoteliais da aorta e da artéria mesentérica na presença ou ausência da metil-ß-ciclodextrina (dextrina, 10 mmol/L) por microscopia eletrônica. Em estudos funcionais, avaliamos a participação da enzima OGA, pela inibição com PugNAc (100 µmol/L) e das cavéolas, utilizando um desorganizador de cavéolas, a dextrina (10 ou 20 mmol/L), na menor reatividade vascular à PE observada em aortas de ratas P. Observamos que o conteúdo de proteínas O-GlcNAciladas estava diminuído em aorta e em leito mesentérico de ratas Wistar P e SHR P. Apesar da expressão da OGT e da OGA não estar alterada, a atividade da OGA foi aumentada em aorta e leito mesentérico de ratas Wistar P, mas, encontra-se diminuída em aorta e aumentada em leito mesentérico de SHP P. A incubação com PugNAc reverteu a reduzida reatividade à PE em aorta e artéria mesentérica de ratas Wistar P mas este efeito não foi observado em vasos SHR P, demonstrando que a OGA parece ter um papel importante na redução da O-GlcNAcilação de proteínas vasculares em Wistar P. Em vasos incubados com PugNAc, a remoção do endotélio ou a incubação com L-NAME, não alterou significativamente a reatividade à PE. Juntos estes resultados sugerem que a maior atividade da eNOS observada em vasos de Wistar P, fica prejudicada na presença do PugNAc, e depende da atividade da OGA. Como não houve alteração da resposta contrátil à PE em vasos de SHR P incubados com PugNAc, possivelmente um mecanismo diferente, envolvendo a menor atividade da OGT, ocorre nestas artérias para a redução da O-GlcNAcilação da eNOS. A desorganização das cavéolas por meio da dextrina causou aumento de contração à PE e redução de potência da ACh em aortas de Wistar NP e SHR NP, porém não houve alteração em aortas de ratas Wistar P e SHR P. A dextrina não alterou o número de cavéolas em artérias de Wistar P e SHR P quando comparado com ratas NP. SHR NP apresentam um reduzido número de cavéolas das aortas em relação a Wistar NP bem como expressão reduzida de Cav-1, p-Cav-1 e CaM. A prenhez não foi capaz de alterar a expressão da Cav-1, CaM e Hsp90 em aorta e leito mesentérico de ratas normotensas e hipertensas. Estes resultados sugerem que a prenhez não altera a expressão das proteínas Cav-1, CaM e Hsp90 e possivelmente a interação com a eNOS em aorta e artérias mesentéricas de ratas normotensas e hipertensas. Em conclusão, entre os mecanismos estudados de modificação pós-traducional da eNOS, a redução da O-GlcNAcilação da eNOS, por mecanismos que envolvem a atividade da OGA e possivelmente da OGT, favoreceria a fosforilação da eNOS e consequente maior biodisponibilidade de NO, contribuindo desta forma para modulação da resposta contrátil da PE nas artérias de ratas P(AU)

Reduction of vascular reactivity to phenylephrine (PE) in aorta of spontaneously hypertensive rats (SHR) at the end of pregnancy is dependent on higher production and/or higer bioavailability of nitric oxide (NO), as a consequence of increased endothelial nitric oxide synthase enzyme (eNOS) phosphorylation, by PI3K/Akt. Glycosylation with O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) is a post-translational modification that competes with phosphorylation by the same binding sites in proteins. O-GlcNAcylation of eNOS on serine site leads to a reduction in its activity while eNOS phosphorylation leads to its activation. In addition to these mechanisms, the interaction of eNOS with other proteins is able to regulate positively or negatively its activity. The objective of this study was to analyze possible changes in the mechanisms of post-translational modification that control the eNOS activation, which could contribute to its the greater activation and greater bioavailability of NO observed in arteries of pregnant rats. The O-GlcNAc-protein content and also the enzymes expression that participate in this modification, O-GlcNAc transferase (OGT) and O-GlcNAcase (OGA) was assessed by Western Blotting, and OGA activity were evaluated by biochemical assay in the aorta and in the artery mesenteric (2nd or 3rd branch) of non-pregnant (NP) and pregnant (P), normotensive rats (Wistar) and SHR. Western Blotting assays were also performed for expression analysis of the following proteins: Cav-1, p-Cav-1, CaM and Hsp90. We performed the counting of the number of endothelial caveolae in the aorta and the mesenteric artery in the presence or absence of methyl-ß-cyclodextrin (dextrin, 10 mmol/L) by electronic microscopy. In functional studies, we evaluated the participation of the OGA enzyme, by inhibition with PugNAc (100 µmol/L) and of the caveolae, using a caveolae disassembler, dextrin (10 or 20 mmol/L), in the reduced vascular reactivity observed in aortas or mesenteric arteries of P rats. We observed that the content of O-GlcNAcylated proteins was decreased in the aorta and in the mesenteric bed of Wistar P and SHR P rats. Although OGT and OGA expression is not altered, OGA activity was increased in the aorta and mesenteric bed of Wistar P rats but was decreased in the aorta and increased in the mesenteric bed of SHP P. Incubation with PugNAc reversed the reduced reactivity to PE in the aorta and mesenteric artery of Wistar P but this effect was not observed in SHR P arteries, demonstrating that OGA appears to play an important role in reducing O-GlcNAcylation of vascular proteins in Wistar P. In arteries incubated with PugNAc, endothelial removal or incubation with L-NAME did not significantly alter reactivity to PE. Together, these results suggest that the greater eNOS activity observed in Wistar P vessels was impaired in the presence of PugNAc, and it depends on OGA activity. As there was no change in the contractile response to PE in SHR P arteries incubated with PugNAc, possibly a different mechanism, involving the lower activity of OGT, occurs in these vessels for the reduction of O-GlcNAcylation of eNOS. Dextrin caused increased contraction of PE and decreased ACh potency in Wistar NP and SHR NP aortas, but there was no change in aortas of Wistar P and SHR P. Dextrin did not alter the number of cavelae in Wistar P and SHR P arteries compared to NP rats. SHR NP showed a lower number of caveolae than to NP Wistar as well reduced expression of Cav-1 and CaM. Pregnancy was not able to alter the expression of Cav-1, CaM and Hsp90 in the aorta and mesenteric bed of normotensive and hypertensive rats. These results suggest that pregnancy does not alter the expression of Cav-1, CaM and Hsp90 proteins and possibly interaction with eNOS in the aorta and mesenteric arteries of normotensive and hypertensive rats. In conclusion, among the studied mechanisms of post-translational modification of eNOS, the reduction of O-GlcNAcylation of eNOS, by mechanisms that involve OGA activity and possibly OGT, would favor eNOS phosphorylation and consequent greater NO bioavailability, contributing in this way for modulation of the contractile response to PE in the arteries of P rats(AU)
Descritores: Aorta
Óxido Nítrico Sintase
Hipertensão
-Glicosilação
Calmodulina
Ratos Wistar
Proteínas de Choque Térmico HSP90
Caveolina 1
Artérias Mesentéricas
Limites: Animais
Feminino
Gravidez
Responsável: BR186.1 - Biblioteca Honório Monteiro
BR186.1


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Id: lil-623770
Autor: Roitt, Ivan M; Cooke, Anne.
Título: The nature of autoantigens
Fonte: Mem. Inst. Oswaldo Cruz;82(supl.2):105-109, 1987. tab, graf.
Idioma: en.
Conferência: Apresentado em: International Symposium on Immunomodulators: Biology and Therapeutic Applications, Rio de Janeiro, Apr. 26-30, 1987.
Resumo: 1. Autoimmunity in deisease is driven by autoantigen; 2. Cell surface molecules may stimulate autoreactive T-helpers if call II MHC is expressed; special factors may predispose to the ease of class II induction; 3. Soluble autoantigens may be focussed by primed B-cells and processed for presentation to T-cell; 4. autoantigenicity may be influenced by metabolic events: (a) Poorly iodinated thyroglobulin does not induce thyroiditis; (b) IgG rheumatoid arthritis has galactose deficient Fc oligosaccharides. Glycosylation defects may prove to have wide implications.
Descritores: Doenças Autoimunes/imunologia
Doenças Autoimunes/prevenção & controle
-Autoantígenos/análise
Glicosilação
Antígenos de Superfície/análise
Limites: Humanos
Responsável: BR1.1 - BIREME



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