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Id: biblio-839339
Autor: Wanderley, Maria Carolina de Albuquerque; Duarte Neto, José Manoel Wanderley; Lima Filho, José Luiz de; Lima, Carolina de Albuquerque; Teixeira, José António Couto; Porto, Ana Lúcia Figueiredo.
Título: Collagenolytic enzymes produced by fungi: a systematic review
Fonte: Braz. j. microbiol;48(1):13-24, Jan.-Mar. 2017. tab, graf.
Idioma: en.
Resumo: Abstract Specific proteases capable of degrading native triple helical or denatured collagen have been required for many years and have a large spectrum of applications. There are few complete reports that fully uncover production, characterization and purification of fungi collagenases. In this review, authors searched through four scientific on line data bases using the following keywords (collagenolytic OR collagenase) AND (fungi OR fungus OR fungal) AND (production OR synthesis OR synthesize) AND (characterization). Scientific criteria were adopted in this review to classify found articles by score (from 0 to 10). After exclusion criteria, 21 articles were selected. None obtained the maximum of 10 points defined by the methodology, which indicates a deficiency in studies dealing simultaneously with production, characterization and purification of collagenase by fungi. Among microorganisms studied the non-pathogenic fungi Penicillium aurantiogriseum and Rhizoctonia solani stood out in volumetric and specific collagenase activity. The only article found that made sequencing of a true collagenase showed 100% homology with several metalloproteinases fungi. A clear gap in literature about collagenase production by fungi was verified, which prevents further development in the area and increases the need for further studies, particularly full characterization of fungal collagenases with high specificity to collagen.
Descritores: Colágeno/metabolismo
Colagenases/metabolismo
Fungos/metabolismo
-Especificidade por Substrato
Colágeno/química
Colagenases/isolamento & purificação
Colagenases/biossíntese
Colagenases/química
Meios de Cultura
Ativação Enzimática
Proteólise
Fungos/classificação
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: biblio-1024562
Autor: Lampugnani, Camila; Was, Mykaella Zanatta; Montanhini, Maike Taís Maziero; Nero, Luis Augusto; Bersot, Luciano dos Santos.
Título: Quantification of psychrotrophic bacteria and molecular identification of Pseudomonas fluorescens in refrigerated raw milk / Quantificação de bactérias psicrotróficas e identificação molecular de Pseudomonas fluorescens em leite cru refrigerado
Fonte: Arq. Inst. Biol;86:e1212018, 2019. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior.
Resumo: In this study, we investigated the contamination of refrigerated raw milk produced in the western region of Paraná, southern Brazil, with psychrotrophic microorganisms, aiming to assay the proteolytic activity of the isolates and to identify Pseudomonas fluorescens, the main proteolytic species associated with the spoilage of milk products. Raw milk samples from 50 dairy farms were submitted to the counting of psychrotrophic microorganisms, being the microbiota characterized by its mesophilic behavior and proteolytic capacity, besides molecular identification of P. fluorescens. Of the samples evaluated, 94% had psychrotrophic counts ranging from 3 to 7.1 log CFU mL-1, and 48.5% of these showed mesophilic behavior. Of the isolates, 48.0% had proteolytic activity in at least one evaluated temperature (21 and 30°C), and 39.3% had proteolytic activity in both temperatures. Among the 61 isolates submitted to molecular identification by polymerase chain reaction (PCR), 86.8% contained the expression of the 16S gene characteristic for P. fluorescens. In this study, we demonstrated that P. fluorescens is the most prevalent psychrotrophic bacteria species in raw refrigerated milk and their proteolytic ability poses high risks to the dairy industry.(AU)

No presente estudo, investigamos a contaminação do leite cru refrigerado produzido na região oeste do Paraná, sul do Brasil, com micro-organismos psicrotróficos, visando testar a atividade proteolítica dos isolados e identificar Pseudomonas fluorescens, a principal espécie proteolítica associada à deterioração de produtos lácteos. Amostras de leite cru de 50 fazendas leiteiras foram submetidas à contagem de micro-organismos psicrotróficos, caracterizando-se a microbiota por seu comportamento mesofílico e sua capacidade proteolítica, além de identificação molecular de P. fluorescens. Entre as amostras avaliadas, 94% apresentaram contagem psicrotrófica variando de 3 a 7,1 log UFC mL-1 e 48,5% destas apresentaram comportamento mesofílico. Entre os isolados, 48,0% apresentaram atividade proteolítica em pelo menos uma das temperaturas testadas (21 e 30°C) e 39,3% apresentaram atividade proteolítica em ambas as temperaturas. Entre os 61 isolados sub-metidos à identificação molecular por reação em cadeia da polimerase (PCR), 86,8% continham expressão do gene 16S característico de P. fluorescens. Neste estudo, demonstramos que P. fluorescens é a espécie de bactérias psicrotróficas mais prevalente em leite refrigerado cru e sua capacidade proteolítica promove elevados riscos de deterioração para a indústria de laticínios.(AU)
Descritores: Pseudomonas fluorescens
Leite
Proteólise
-Bactérias
Contaminação de Alimentos
Reação em Cadeia da Polimerase
Alimentos Resfriados
Responsável: BR1942.1 - NID - Biblioteca - Núcleo de Informação e Documentação


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Id: lil-747176
Autor: Fiorati, Regina Celia; Elui, Valeria Meirelles Carril.
Título: Social determinants of health, inequality and social inclusion among people with disabilities / Determinantes sociais da saúde, iniquidades e inclusão social entre pessoas com deficiência / Determinantes sociales de la salud, iniquidades e inclusión social entre personas con deficiencia
Fonte: Rev. latinoam. enferm;23(2):329-336, Feb-Apr/2015. graf.
Idioma: en.
Projeto: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo.
Resumo: OBJECTIVE: to analyze the socio-familial and community inclusion and social participation of people with disabilities, as well as their inclusion in occupations in daily life. METHOD: qualitative study with data collected through open interviews concerning the participants' life histories and systematic observation. The sample was composed of ten individuals with acquired or congenital disabilities living in the region covered by a Family Health Center. The social conception of disability was the theoretical framework used. Data were analyzed according to an interpretative reconstructive approach based on Habermas' Theory of Communicative Action. RESULTS: the results show that the socio-familial and community inclusion of the study participants is conditioned to the social determinants of health and present high levels of social inequality expressed by difficult access to PHC and rehabilitation services, work and income, education, culture, transportation and social participation. CONCLUSION: there is a need to develop community-centered care programs in cooperation with PHC services aiming to cope with poverty and improve social inclusion. .

OBJETIVO: analisar a inclusão sociofamiliar e comunitária e a participação social de pessoas com deficiência, bem como sua inserção em ocupações na vida cotidiana. MÉTODO: estudo qualitativo, com coleta de dados por meio de entrevistas abertas sobre história de vida e observação sistemática. A amostra foi composta por dez pessoas com deficiência, adquirida ou congênita, moradoras de região adstrita a um Núcleo de Saúde da Família. O referencial teórico foi a concepção social da deficiência. Os dados foram analisados segundo abordagem interpretativa reconstrutiva, fundamentada no referencial da Teoria da Ação Comunicativa de Habermas. RESULTADOS: os resultados evidenciaram que a inclusão sociofamiliar e comunitária dos sujeitos do estudo condiciona-se a determinantes sociais da saúde, apresentando índices de iniquidades sociais, expressos pela dificuldade de acesso a serviços de Atenção Primária à Saúde e de reabilitação, trabalho e renda, educação, cultura, transporte e participação social. CONCLUSÃO: conclui-se a necessidade da elaboração de programas de atenção centrados na comunidade, voltados ao enfrentamento da pobreza e à inclusão social, em articulação com serviços de Atenção Primaria à Saúde. .

OBJETIVO: analizar la inclusión social familiar y comunitaria, y la participación social de personas con deficiencia, así como su inserción en ocupaciones en la vida cotidiana. MÉTODO: estudio cualitativo, con recolección de datos por medio de entrevistas abiertas sobre historia de vida y por observación sistemática. La muestra estuvo compuesta por diez personas con deficiencia, adquirida o congénita, habitantes de una región adscrita a un Núcleo de Salud de la Familia. El referencial teórico fue la concepción social de la deficiencia. Los datos fueron analizados según abordaje interpretativo reconstructivo, fundamentado en el referencial de la Teoría de la Acción Comunicativa de Habermas. RESULTADOS: los resultados evidenciaron que la inclusión social familiar y comunitaria de los sujetos del estudio se condiciona a determinantes sociales de la salud, presentando índices de iniquidades sociales, expresados por la dificultad de acceso a servicios de Atención Primaria de la Salud y de rehabilitación, trabajo y renta, educación, cultura, transporte y participación social. CONCLUSIÓN: se concluye que existe la necesidad de elaborar programas de atención centrados en la comunidad, dirigidos al enfrentamiento de la pobreza y a la inclusión social, en articulación con servicios de Atención Primaria a la Salud. .
Descritores: Antineoplásicos/farmacologia
Proteínas de Choque Térmico HSP90/metabolismo
Lactonas/farmacologia
/tratamento farmacológico
NEUROFIBROMATOSIS TEMEFOS/tratamento farmacológico
Oximas/farmacologia
-Linhagem Celular Tumoral
Proliferação de Células
Proteínas de Choque Térmico HSP90/antagonistas & inibidores
Camundongos Nus
Camundongos Transgênicos
/metabolismo
NEUROFIBROMATOSIS TEMEFOS/metabolismo
Proteólise
Transcriptoma/efeitos dos fármacos
Ensaios Antitumorais Modelo de Xenoenxerto
Limites: Humanos
Animais
Feminino
Camundongos
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: biblio-888967
Autor: Manfredi, LH; Paula-Gomes, S; Zanon, NM; Kettelhut, IC.
Título: Myostatin promotes distinct responses on protein metabolism of skeletal and cardiac muscle fibers of rodents
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;50(12):e6733, 2017. graf.
Idioma: en.
Projeto: FAPESP; . CNPq.
Resumo: Myostatin is a novel negative regulator of skeletal muscle mass. Myostatin expression is also found in heart in a much less extent, but it can be upregulated in pathological conditions, such as heart failure. Myostatin may be involved in inhibiting protein synthesis and/or increasing protein degradation in skeletal and cardiac muscles. Herein, we used cell cultures and isolated muscles from rats to determine protein degradation and synthesis. Muscles incubated with myostatin exhibited an increase in proteolysis with an increase of Atrogin-1, MuRF1 and LC3 genes. Extensor digitorum longus muscles and C2C12 myotubes exhibited a reduction in protein turnover. Cardiomyocytes showed an increase in proteolysis by activating autophagy and the ubiquitin proteasome system, and a decrease in protein synthesis by decreasing P70S6K. The effect of myostatin on protein metabolism is related to fiber type composition, which may be associated to the extent of atrophy mediated effect of myostatin on muscle.
Descritores: Fibras Musculares Esqueléticas/efeitos dos fármacos
Fibras Musculares Esqueléticas/metabolismo
Miócitos Cardíacos/efeitos dos fármacos
Miócitos Cardíacos/metabolismo
Miostatina/farmacologia
Proteínas Musculares/efeitos dos fármacos
Proteínas Musculares/metabolismo
-Fosforilação/efeitos dos fármacos
Fosforilação/fisiologia
Fatores de Tempo
Tirosina/efeitos dos fármacos
Tirosina/metabolismo
Expressão Gênica
Células Cultivadas
Western Blotting
Reprodutibilidade dos Testes
Ratos Wistar
Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
Proteólise/efeitos dos fármacos
Limites: Animais
Masculino
Tipo de Publ: Estudo de Avaliação
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: biblio-1016095
Autor: Fitriani, Dewi; Rohman, M Saifur; Prijambada, Irfan D.
Título: Proteolytic activity of recombinant DegP from Chromohalobacter salexigens BKL5
Fonte: Electron. j. biotechnol;29:7-12, sept. 2017. ilus, graf, tab.
Idioma: en.
Resumo: Background: DegP is a serine protease that specifically cleaves and refolds unfolding proteins in the periplasmic space of the cells. To date, there is no information regarding DegP from halophilic bacteria. Chromohalobacter salexigens BKL5 is a moderately halophilic bacterium that has the ability to grow in a media containing more than 15% salt. Therefore, the objectives of this work were to clone and overexpress DegP-encoding gene from C. salexigens BKL5 and characterize its biochemical properties. Results: DegP-encoding gene was overexpressed in Escherichia coli BL21(DE3) CodonPlus in an active form. SDS-PAGE analysis showed that the molecular weight of the recombinant DegP was 45 kDa. Size-exclusion chromatography analysis suggested that recombinant DegP was present in two multimeric states, hexameric and dodecameric, with molecular weights of 297.9 and 579.12 kDa, respectively. Both conformations were enzymatically active when casein was used as substrate for enzymatic assay. Circular dichroism analysis showed that recombinant DegP was composed of 0.21­0.29 helical content, which was comparable to the helical content in the crystal structure of E. coli DegP. The basic/acidic residue ratio of recombinant DegP was 0.56, which was slightly higher than that of DegP from extreme halophiles (average, 0.45) but significantly lower than that of DegP from nonhalophiles (average, 0.94). Conclusions: Recombinant DegP from C. salexigens BKL5 showed proteolytic activity when ß-casein was used as a substrate. In silico analysis indicated that recombinant DegP had characteristics similar to those of halophilic proteins depending on its amino acid composition.
Descritores: Serina Endopeptidases/genética
Proteínas Periplásmicas/genética
Chromohalobacter/enzimologia
Proteólise
Proteínas de Choque Térmico/genética
-Proteínas Recombinantes
Serina Endopeptidases/metabolismo
Caseínas
Cromatografia em Gel
Dicroísmo Circular
Clonagem Molecular
Proteínas Periplásmicas/metabolismo
Eletroforese em Gel de Poliacrilamida
Escherichia coli
Salinidade
Chromohalobacter/genética
Proteínas de Choque Térmico/metabolismo
Peso Molecular
Responsável: CL1.1 - Biblioteca Central


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Id: biblio-998712
Autor: Bürger, Karina Paes; Rossi, Gabriel Augusto Marques; Vidal, Ana Maria Centola; Grisolio, Ana Paula Rodomilli; Gonçalves, Ana Carolina Siqueira.
Título: Proteólise da κ-caseína em leite e bebida láctea UAT durante o período de validade comercial / κ-casein proteolysis during the shelf-life of UHT milk and milk beverage
Fonte: Rev. bras. ciênc. vet;22(3-4):220-223, jul.-dez.2015. il..
Idioma: pt.
Resumo: A proteólise do leite e da bebida láctea UAT durante a estocagem é um dos fatores mais importantes na determinação da validade comercial desses. O teor de glicomacropeptídeos (GMP) é um marcador das ações proteolíticas no leite, pois é capaz de indicar indiretamente a integridade da κ-caseína. Assim, no presente trabalho, objetivou-se avaliar a proteólise da κ-caseína do leite e da bebida láctea UAT ao longo do período de validade. Foram avaliadas 60 amostras de cinco diferentes marcas comerciais de cada produto através do método espectrofotométrico para quantificação de ácido siálico. Para o leite UAT foi observado o intervalo entre 3,83 e 15,27 µg de ácido siálico/mL no início do período de validade (D0), 5,95 a 17,16 µg de ácido siálico/mL 60 dias após o início do período (D60) e 6,54 a 21,11 µg de ácido siálico/mL no final do período, ou seja, 120 dias após (D120) a produção. Já para as bebidas lácteas foram observados intervalos entre 11,12 e 24,25; 15,74 e 24,73 e 17,19 e 26,49 µg de ácido siálico/mL para o dia inicial, 60 e 120 dias do período de validade, respectivamente. Os valores obtidos para o índice proteolítico do leite e bebida láctea UAT aumentaram gradativamente ao longo do período de validade dos produtos, sendo tal diferença detectável a partir de sessenta dias. Não foi observada influência da abertura da embalagem na proteólise da k-caseína.

The UHT milk and milk beverage proteolysis during storage is the major factor that limits the shelf-life of these products. The GMP content has assumed importance because it can indirectly indicate the integrity of κ-casein in milk. So, this study focused on evaluates the κ-casein proteolysis in UHT milk and milk beverage during the shelf-life. 60 samples obtained of five different brands of each product were evaluated by spectrophotometric assay for quantifying acid sialic. For UHT milk was observed the values ranging from 3.83 to 15.27 µg acid sialic/ml at the begin of the shelf-life, from 5.95 to 17.16 mg sialic acid/ml at the middle of the period (60 days after the production) and 6.54 to 21.11 mg sialic acid/ml at the end of shelf-life (120 days). For milk beverages were observed ranges between 11.12 to 24.25, 15.74 to 24.73 µg of sialic acid/ml and from 17.19 to 26.49 mg sialic acid/ml respectively for the beginning, 60 and 120 days of the shelf-life. The proteolysis rate in UHT milk and milk beverage increased during the shelflife and is detectable after 60 days of the shelf-life. The practice of open the package did not influence the κ-casein proteolysis.
Descritores: Caseínas
Proteólise
-Espectrofotometria
Ácido N-Acetilneuramínico
Responsável: BR409.1 - Biblioteca


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Id: lil-710963
Autor: Alarcón G, Miguel Ángel; López V, Jairo Humberto; Alonso Restrepo M, Diego.
Título: Efecto de la inclusión de una fuente de fibra dietaria sobre la degradación lipídica y proteica de un producto cárnico tipo hamburguesa / Effect of adition of plantain dietary fiber on lipid and protein spoilage in a hamburger-like meat product
Fonte: Rev. chil. nutr;41(1):77-84, mar. 2014. tab.
Idioma: es.
Resumo: A source of dietary fiber obtained from plantain peel (Musa AAB) was characterized in terms of dietary fiber, total phenols and antioxidant capacity in order to generate proposal for use of the byproducts of plantain agribusiness. Thereafter, the effect of the inclusion of the source of dietary fiber was evaluated at levels of0 g, 5.5 g, y 6.5 g (treatment) of adding source of dietary fiber /100 g in a hamburger-type meat product during a time period of 28 days (with sampling on days 0, 7, 14, 21 and 28) on lipid and protein spoilage in terms of malonaldehyde production per gram of meatproduct and volatile nitrogenous bases per 100 g of meat product. Treatments including dietary fiber had no significant effect on lipid degradation (p>0.05) while protein degradation had statistically significant differences (p<0.05), volatile nitrogenous bases values were lower on treatments with 5.5, y 6.5 g of adding source of dietary fiber /100 g in a hamburger. It is concluded that the high fiber source obtained from dietary plantain peels by applied process may be used to increase hamburger's dietary fiber level and to prevent protein degradation.

Con el objetivo de generar una propuesta de aprovechamiento de los subproductos de la agroindustria del plátano, en esta investigación se caracterizó una fuente de fibra dietaria obtenida a partir de cáscara de plátano (Musa AAB) en términos de fibra dietaria, fenoles totales y capacidad antioxidante; posteriormente se evaluó el efecto de la inclusión de la fuente de fibra dietaria a niveles de 0 g, 5,5 g, y 6,5 g de inclusión de la fuente de fibra dietaria /100 g de producto cárnico tipo hamburguesa (tratamientos) durante un periodo de tiempo de 28 días (con muestreos los días 0, 7, 14, 21 y 28) sobre la degradación lipídica y proteica en términos de producción de malonaldehído por gramo de producto cárnico (hamburguesa) y bases nitrogenadas volátiles por cada 100 g de producto cárnico tipo hamburguesa. Los tratamientos con inclusión de fibra dietaria no tuvieron efecto significativo sobre la degradación lipídica (p>0,05) mientras que en la degradación proteica sí se presentaron diferencias estadísticamente significativas (p<0,05) siendo menores los valores de bases nitrogenadas volátiles obtenidos de los tratamientos con 5,5 g, y 6,5 g de inclusión de la fuente de fibra dietaria /100 g de hamburguesa. Se concluye que la fuente de fibra dietaria obtenida a partir de cáscara de plátano mediante el proceso aplicado, puede utilizarse para aumentar el nivel de fibra dietaria en un producto cárnico tipo hamburguesa y para obtener un efecto protector sobre la fracción proteica del producto cárnico.
Descritores: Fibras na Dieta
Peroxidação de Lipídeos
Musa
Proteólise
Produtos da Carne
Antioxidantes
Tipo de Publ: Artigo Clássico
Responsável: CL334.1 - Biblioteca UBO


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Texto completo SciELO Brasil
Cerqueira, M. M. O. P
Leite, M. O
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Id: biblio-888089
Autor: Santos, M. C. M; Cerqueira, M. M. O. P; Leite, M. O; Souza, M. R.
Título: Desenvolvimento de um modelo preditivo para identificação de perda de estabilidade e ocorrência de proteólise em leite UAT / Development of a predicative model for identification of loss of stability and proteolysis occurrence in UHT milk
Fonte: Arq. bras. med. vet. zootec. (Online);70(1):247-253, Jan.-Feb. 2018. tab, graf.
Idioma: pt.
Resumo: Este trabalho se propôs a desenvolver um modelo preditivo para identificação de perda de estabilidade e de sedimentação em leite UAT por determinação da atividade enzimática de aminopeptidase no leite por espectrofotometria. Foram analisadas amostras de leite cru, pasteurizado e UAT após envase durante seis meses, na região Sul do Brasil. Acidez, crioscopia, gordura, extrato seco total, extrato seco desengordurado e densidade foram analisados nos leites cru e pasteurizado. Amostras de leite cru foram ainda submetidas à análise de contagem de psicrotróficos e à atividade de aminopeptidase, e amostras de leite UAT estocadas foram analisadas quanto ao grau de proteólise mediante análises sensoriais e atividade de aminopeptidase. Alterações sensoriais foram observadas em tempos de estocagem menores para amostras originadas de leite cru com contagem de psicrotróficos acima de 107 UFC mL-1. Não houve correlação entre a atividade de aminopeptidase e proteólise e também não foi observada correlação significativa entre os parâmetros físico-químicos e a ocorrência de proteólise no leite estocado. O modelo estudado não foi apto para predizer perda de estabilidade e ocorrência de proteólise no leite UAT.(AU)

The aim of this work was to develop a predictive model for identifying loss of stability and sedimentation in UHT milk by determining the enzymatic activity of aminopeptidasis in milk by spectrophotometry. Samples of raw milk, pasteurized and UHT after filling for 6 months in Southern Brazil were analyzed. Acidity, freezing point, fat, total solids, nonfat solids and density were analyzed in raw and pasteurized milk. Raw milk samples were also subjected to psychrotrophic count analysis and aminopeptidasis activity and UAT samples of stored milk were analyzed for degree of proteolysis through sensory analysis and aminopeptidasis activity. Sensory changes were observed in smaller storage time for samples of raw milk originated with psychrotrophic count above 107 CFU ml-1. There was no correlation between aminopeptidasis activity and proteolysis and there was also no significant correlation between physicochemical parameters and the occurrence of proteolysis in stored milk. The model was unable to predict loss of stability and occurrence of proteolysis in UHT milk.(AU)
Descritores: Aminopeptidases/análise
Leite/enzimologia
Proteólise
-Bovinos
Espectrofotometria
Limites: Animais
Feminino
Bovinos
Responsável: BR68.1 - Biblioteca Virginie Buff D'Ápice


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Id: lil-772887
Autor: Viana, Semiramis Guimaraes Ferraz.
Título: Análise bioquímica e antigênica de trofozoítos de cepas de origem humana de Giardia duodenalis, Lambl (1859), isoladas e axenizadas em Botucatu, SP / Analysis biochemistry and antigenic trophozoites strains of human origin of Giardia duodebalis, Lambi (1859), isolated and axenic in Botucatu, SP.
Fonte: Botucatu; s.n; 1999. 122 p. tab.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade Estadual Paulista para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: Foi realizada a análise de algumas características bioquímicas e antigênicas de duas cepas axênicas de Giardia duodenalis, isoladas em Botucatu, a partir de cistos obtidos de pacientes sintomático (BTU-11) e assintomático (BTU-10), tendo por referência a cepa padrão Portland 1 (P-1), isolada e axenizada nos Estados Unidos. O objetivo desta análise foi o de se investigar diferenças entre as cepas correlacionando-as à forma clínica. Preparações contendo proteínas de membranas, proteínas solúveis (citosol) e lisados de cada cepa foram empregados na eletroforese das proteínas em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), na análise de glicoproteínas pela técnica de Con A blot, na análise antigênica pela técnica de "lmmunoblottinç" e na análise da atividade proteolítica em gel de poliacrilamida copolimerizado com.gelatina. Na análise do perfil eletroforético os padrões de bandas de proteínas das cepas BTU-10 e BTU-11 foram complexos e na maior parte homogêneos; algumas diferenças foram detectadas entre as proteínas de membranas. Várias glicoproteínas foram demonstradas, destacando-se as de 81,72, 59 kDa e a glicoproteína de 62 kDa, detectadas nas preparações de proteínas de membranas e proteínas solúveis, respectivamente. Entre estas glicoproteínas, a de 81 kDa foi detectada apenas entre as proteínas de membranas das cepas BTU-11 e P-1, isoladas de casos sintomáticos. Vários componentes antigênicos foram reconhecidos por anticorpos IgG de coelho pela técnica de "Immunoblotting". Entre estes componentes, as proteínas de 32 kDa, entre as proteínas de membranas e a de 30 kDa, entre as proteínas solúveis, parecem tratar-se de proteínas já caracterizadas como "Giardinas". Antígenos reconhecidos por IgG humana foram identificados apenas entre as proteínas de membranas, destacando-se as bandas de 64,62, 58, 52 e 47 kDa...

In the present investigation, we analysed the biochemical and antigenic characteristics of two axenic strains of Giardia duodenalis, isolated from a symptomatic (BTU-11) and an asymptomatic patient (BTU-10), in the Campus of Botucatu, UNESP. The axenic strain Portland 1 (P-1), isolated in the United States, was used as a reference strain. We aimed at detecting differences between the strains and to correlate them with the clinical presentation. Fractions containing membrane proteins or soluble proteins (cytosol proteins), and Iysates from each strain were tested in sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) for the pattern of proteins, in concanavalin-A blotting for the profile of glycoproteins and in pólyacrylamide gel co-polymerized with gelatin for evaluation of the proteolytic activity. Both Botucatu strains showed a complex and homogeneous electrophoretic pattern of proteins with some differences among membrane proteins. Several glycoproteins (gp) were detected, particularly gp81, 72, 59 kDa and gp62 in the membrane proteins and cytosol proteins, respectively. Gp 81 was demonstrated only in the membrane proteins of the BTU-11 and P-1 strains from symptomatic patients. Many antigenic components were reavealed by anti-Giardia rabbit IgG antibodies in the immunoblotting analysis. Among these components, the membrane protein p32 and cytosol protein p30 corresponded to giardin, as previously demonstrated...
Descritores: Antígenos de Protozoários/análise
Giardia lamblia/isolamento & purificação
Trofozoítos/metabolismo
-Eletroforese/métodos
Giardia/imunologia
Proteólise
Limites: Humanos
Animais
Masculino
Feminino
Adulto
Responsável: BR33.1 - Divisão Técnica de Biblioteca e Documentação


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Id: lil-772878
Autor: Viana, Semiramis Guimaraes Ferraz.
Título: Análise bioquímica e antigênica de trofozoítos de cepas de origem humana de Giardia duodenalis, Lambl (1859), isoladas e axenizadas em Botucatu, SP / Analysis biochemistry and antigenic trophozoites strains of human origin of Giardia duodebalis, Lambi (1859), isolated and axenic in Botucatu, SP.
Fonte: Botucatu; s.n; 1999. 122 p. tab.
Idioma: pt.
Tese: Apresentada a Universidade Estadual Paulista para obtenção do grau de Doutor.
Resumo: Foi realizada a análise de algumas características bioquímicas e antigênicas de duas cepas axênicas de Giardia duodenalis, isoladas em Botucatu, a partir de cistos obtidos de pacientes sintomático (BTU-11) e assintomático (BTU-10), tendo por referência a cepa padrão Portland 1 (P-1), isolada e axenizada nos Estados Unidos. O objetivo desta análise foi o de se investigar diferenças entre as cepas correlacionando-as à forma clínica. Preparações contendo proteínas de membranas, proteínas solúveis (citosol) e lisados de cada cepa foram empregados na eletroforese das proteínas em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), na análise de glicoproteínas pela técnica de Con A blot, na análise antigênica pela técnica de "lmmunoblottinç" e na análise da atividade proteolítica em gel de poliacrilamida copolimerizado com.gelatina. Na análise do perfil eletroforético os padrões de bandas de proteínas das cepas BTU-10 e BTU-11 foram complexos e na maior parte homogêneos; algumas diferenças foram detectadas entre as proteínas de membranas. Várias glicoproteínas foram demonstradas, destacando-se as de 81,72, 59 kDa e a glicoproteína de 62 kDa, detectadas nas preparações de proteínas de membranas e proteínas solúveis, respectivamente. Entre estas glicoproteínas, a de 81 kDa foi detectada apenas entre as proteínas de membranas das cepas BTU-11 e P-1, isoladas de casos sintomáticos. Vários componentes antigênicos foram reconhecidos por anticorpos IgG de coelho pela técnica de "Immunoblotting". Entre estes componentes, as proteínas de 32 kDa, entre as proteínas de membranas e a de 30 kDa, entre as proteínas solúveis, parecem tratar-se de proteínas já caracterizadas como "Giardinas". Antígenos reconhecidos por IgG humana foram identificados apenas entre as proteínas de membranas, destacando-se as bandas de 64,62, 58, 52 e 47 kDa...

In the present investigation, we analysed the biochemical and antigenic characteristics of two axenic strains of Giardia duodenalis, isolated from a symptomatic (BTU-11) and an asymptomatic patient (BTU-10), in the Campus of Botucatu, UNESP. The axenic strain Portland 1 (P-1), isolated in the United States, was used as a reference strain. We aimed at detecting differences between the strains and to correlate them with the clinical presentation. Fractions containing membrane proteins or soluble proteins (cytosol proteins), and Iysates from each strain were tested in sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) for the pattern of proteins, in concanavalin-A blotting for the profile of glycoproteins and in pólyacrylamide gel co-polymerized with gelatin for evaluation of the proteolytic activity. Both Botucatu strains showed a complex and homogeneous electrophoretic pattern of proteins with some differences among membrane proteins. Several glycoproteins (gp) were detected, particularly gp81, 72, 59 kDa and gp62 in the membrane proteins and cytosol proteins, respectively. Gp 81 was demonstrated only in the membrane proteins of the BTU-11 and P-1 strains from symptomatic patients. Many antigenic components were reavealed by anti-Giardia rabbit IgG antibodies in the immunoblotting analysis. Among these components, the membrane protein p32 and cytosol protein p30 corresponded to giardin, as previously demonstrated...
Descritores: Antígenos de Protozoários/análise
Giardia lamblia/isolamento & purificação
Trofozoítos/metabolismo
-Eletroforese/métodos
Giardia/imunologia
Proteólise
Limites: Humanos
Animais
Masculino
Feminino
Adulto
Responsável: BR33.1 - Divisão Técnica de Biblioteca e Documentação



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