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Carvalho, Antônio Carlos Campos de
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Id: biblio-887981
Autor: José, Vitória Santório de São; Monnerat, Gustavo; Guerra, Barbara; Paredes, Bruno Dias; Kasai-Brunswick, Tais Hanae; Carvalho, Antonio Carlos Campos de; Medei, Emiliano.
Título: Bone-Marrow-Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSC) from Diabetic and Nondiabetic Rats Have Similar Therapeutic Potentials / Células Estromais Mesenquimais (CEM) Derivadas de Medula Óssea de Ratos com e sem Diabetes têm Potencial Terapêutico Similar
Fonte: Arq. bras. cardiol;109(6):579-589, Dec. 2017. graf.
Idioma: en.
Resumo: Abstract Background: Diabetes mellitus is a severe chronic disease leading to systemic complications, including cardiovascular dysfunction. Previous cell therapy studies have obtained promising results with the use bone marrow mesenchymal stromal cells derived from healthy animals (MSCc) in diabetes animal models. However, the ability of MSC derived from diabetic rats to improve functional cardiac parameters is still unknown. Objectives: To investigate whether bone-marrow-derived MSC from diabetic rats (MSCd) would contribute to recover metabolic and cardiac electrical properties in other diabetic rats. Methods: Diabetes was induced in Wistar rats with streptozotocin. MSCs were characterized by flow cytometry, morphological analysis, and immunohistochemistry. Cardiac electrical function was analyzed using recordings of ventricular action potential. Differences between variables were considered significant when p < 0.05. Results: In vitro properties of MSCc and MSCd were evaluated. Both cell types presented similar morphology, growth kinetics, and mesenchymal profile, and could differentiate into adipogenic and osteogenic lineages. However, in an assay for fibroblast colony-forming units (CFU-F), MSCd formed more colonies than MSCc when cultured in expansion medium with or without hydrocortisone (1 µM). In order to compare the therapeutic potential of the cells, the animals were divided into four experimental groups: nondiabetic (CTRL), diabetic (DM), diabetic treated with MSCc (DM + MSCc), and diabetic treated with MSCd (DM + MSCd). The treated groups received a single injection of MSC 4 weeks after the development of diabetes. MSCc and MSCd controlled hyperglycemia and body weight loss and improved cardiac electrical remodeling in diabetic rats. Conclusions: MSCd and MSCc have similar in vitro properties and therapeutic potential in a rat model of diabetes induced with streptozotocin.

Resumo Fundamentos: O diabetes mellitus é uma doença crônica grave que leva a complicações sistêmicas, como a disfunção cardiovascular. Estudos anteriores de terapia celular obtiveram resultados promissores com utilização de células estromais mesenquimais (CEM) derivadas de medula óssea de animais saudáveis (CEMc) em modelos de animais diabéticos. No entanto, a capacidade das CEM derivadas de ratos diabéticos em melhorar parâmetros cardíacos funcionais é ainda desconhecida. Objetivos: Investigar se CEM derivadas de medula óssea de ratos diabéticos (CEMd) poderiam contribuir para a recuperação metabólica e de propriedades elétricas cardíacas em outros ratos também com diabetes. Métodos: O diabetes foi induzido em ratos Wistar com estreptozotocina. As CEM foram caracterizadas por citometria de fluxo, análise morfológica e imunohistoquímica. A função elétrica cardíaca foi analisada através de registro do potencial de ação ventricular. As diferenças entre as variáveis foram consideradas significativas quando p < 0,05. Resultados: As propriedades in vitro das CEMc e CEMd foram avaliadas. Ambos os tipos celulares apresentaram morfologia, cinética de crescimento e perfil mesenquimal semelhante, e puderam ser diferenciadas em linhagens adipogênica e osteogênica. No entanto, em ensaios para unidades formadoras de colônias de fibroblastos (UFC-F), as CEMd formaram mais colônias em comparação às CEMc quando cultivadas em meio com ou sem hidrocortisona (1 µM). Para comparar o potencial terapêutico das células, os animais foram divididos em quatro grupos experimentais: não diabéticos (CTRL), diabéticos (DM), diabéticos tratados com CEMc (DM + CEMc) e diabéticos tratados com CEMd (DM + CEMd). Os grupos tratados receberam uma única injeção de CEM 4 semanas após o estabelecimento do diabetes. Ambas CEMc e CEMd controlaram a hiperglicemia e a perda de peso corporal e melhoraram o remodelamento elétrico cardíaco em ratos com diabetes. Conclusão: As CEMd e CEMc possuem propriedades in vitro e potencial terapêutico semelhante em um modelo de rato com diabetes induzido por estreptozotocina. (Arq Bras Cardiol. 2017; 109(6):579-589)
Descritores: Transplante de Células-Tronco Mesenquimais
Diabetes Mellitus Experimental/induzido quimicamente
Células-Tronco Mesenquimais/citologia
Terapia Baseada em Transplante de Células e Tecidos
Cardiopatias/etiologia
Cardiopatias/terapia
-Glicemia/metabolismo
Diferenciação Celular
Células Cultivadas
Ratos Wistar
Células-Tronco Mesenquimais/metabolismo
Limites: Animais
Masculino
Ratos
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Id: biblio-983943
Autor: Chae, Dong-Sik; Lee, Chang Youn; Lee, Jiyun; Seo, Hyang-Hee; Choi, Chong-Hyuk; Lee, Seahyoung; Hwang, Ki-Chul.
Título: Priming stem cells with protein kinase C activator enhances early stem cell-chondrocyte interaction by increasing adhesion molecules
Fonte: Biol. Res;51:41, 2018. graf.
Idioma: en.
Projeto: Korea Ministry of Science, ICT and Future Planning; . Ministry of Health & Welfare; . Catholic Kwandong University International St. Mary's Hospital.
Resumo: BACKGROUND: Osteoarthritis (OA) can be defined as degradation of articular cartilage of the joint, and is the most common degenerative disease. To regenerate the damaged cartilage, different experimental approaches including stem cell therapy have been tried. One of the major limitations of stem cell therapy is the poor post-transplantation survival of the stem cells. Anoikis, where insufficient matrix support and adhesion to extracellular matrix causes apoptotic cell death, is one of the main causes of the low post-transplantation survival rate of stem cells. Therefore, enhancing the initial interaction of the transplanted stem cells with chondrocytes could improve the therapeutic efficacy of stem cell therapy for OA. Previously, protein kinase C activator phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)- induced increase of mesenchymal stem cell adhesion via activation of focal adhesion kinase (FAK) has been reported. In the present study, we examine the effect PMA on the adipose-derived stem cells (ADSCs) adhesion and spreading to culture substrates, and further on the initial interaction between ADSC and chondrocytes. RESULTS: PMA treatment increased the initial adhesion of ADSC to culture substrate and cellular spreading with increased expression of adhesion molecules, such as FAK, vinculin, talin, and paxillin, at both RNA and protein level. Priming of ADSC with PMA increased the number of ADSCs attached to confluent layer of cultured chondrocytes compared to that of untreated ADSCs at early time point (4 h after seeding). CONCLUSION: Taken together, the results of this study suggest that priming ADSCs with PMA can increase the initial interaction with chondrocytes, and this proof of concept can be used to develop a non-invasive therapeutic approach for treating OA. It may also accelerate the regeneration process so that it can relieve the accompanied pain faster in OA patients. Further in vivo studies examining the therapeutic effect of PMA pretreatment of ADSCs for articular cartilage damage are required.
Descritores: Células-Tronco/efeitos dos fármacos
Proteína Quinase C/farmacologia
Cartilagem Articular/citologia
Condrócitos/citologia
-Adesão Celular
Comunicação Celular
Diferenciação Celular
Sobrevivência Celular
Western Blotting
Técnicas de Cultura de Células
Condrócitos/efeitos dos fármacos
Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa
Limites: Humanos
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Id: biblio-1011428
Autor: Feng, Yubin; Hua, Xiaoxiao; Niu, Ruowen; Du, Yan; Shi, Congjian; Zhou, Renpeng; Chen, Fei-Hu.
Título: ROS play an important role in ATPR inducing differentiation and inhibiting proliferation of leukemia cells by regulating the PTEN/PI3K/AKT signaling pathway
Fonte: Biol. Res;52:26, 2019. graf.
Idioma: en.
Projeto: National Major Scientific and Technological Special Project.
Resumo: BACKGROUND: Acute myeloid leukemia (AML) is an aggressive and mostly incurable hematological malignancy with frequent relapses after an initial response to standard chemotherapy. Therefore, novel therapies are urgently required to improve AML clinical outcomes. 4-Amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinate (ATPR), a novel all-trans retinoic acid (ATRA) derivative designed and synthesized by our team, has been proven to show biological anti-tumor characteristics in our previous studies. However, its potential effect on leukemia remains unknown. The present research aims to investigate the underlying mechanism of treating leukemia with ATPR in vitro. METHODS: In this study, the AML cell lines NB4 and THP-1 were treated with ATPR. Cell proliferation was analyzed by the CCK-8 assay. Flow cytometry was used to measure the cell cycle distribution and cell differentiation. The expression levels of cell cycle and differentiation-related proteins were detected by western blotting and immunofluorescence staining. The NBT reduction assay was used to detect cell differentiation. RESULTS: ATPR inhibited cell proliferation, induced cell differentiation and arrested the cell cycle at the G0/G1 phase. Moreover, ATPR treatment induced a time-dependent release of reactive oxygen species (ROS). Additionally, the PTEN/PI3K/Akt pathway was downregulated 24 h after ATPR treatment, which might account for the anti-AML effects of ATPR that result from the ROS-mediated regulation of the PTEN/PI3K/AKT signaling pathway. CONCLUSIONS: Our observations could help to develop new drugs targeting the ROS/PTEN/PI3K/Akt pathway for the treatment of AML.
Descritores: Retinoides/farmacologia
Espécies Reativas de Oxigênio/metabolismo
Antineoplásicos/farmacologia
-Fluorimunoensaio
Leucemia Mieloide Aguda
Transdução de Sinais
Regulação para Baixo
Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos
Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos
Fosfatidilinositol 3-Quinases/metabolismo
Linhagem Celular Tumoral
Proliferação de Células/efeitos dos fármacos
PTEN Fosfo-Hidrolase/efeitos dos fármacos
PTEN Fosfo-Hidrolase/metabolismo
Proteínas Proto-Oncogênicas c-akt/efeitos dos fármacos
Proteínas Proto-Oncogênicas c-akt/metabolismo
Limites: Humanos
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Id: biblio-1001554
Autor: Jaafari-Ashkavandi, Zohreh; Ashraf, Mohammad Javad; Abbaspoorfard, Ali Asghar.
Título: Overexpression of CDC7 in malignant salivary gland tumors correlates with tumor differentiation / Superexpressão de CDC7 em tumores malignos de glândulas salivares correlaciona-se com a diferenciação dos tumores
Fonte: Braz. j. otorhinolaryngol. (Impr.);85(2):144-149, Mar.-Apr. 2019. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: University of Medical Science.
Resumo: Abstract Introduction: Cell division cycle-7 protein is a serine/threonine kinase that has a basic role in cell cycle regulation and is a potential prognostic or therapeutic target in some human cancers. Objectives: This study investigated the expression of cell division cycle-7 protein in benign and malignant salivary gland tumors and also its correlation with clinicopathologic factors. Methods: Immunohistochemical expression of cell division cycle-7 was evaluated in 46 cases, including 15 adenoid cystic carcinoma, 12 mucoepidermoid carcinoma, 14 pleomorphic adenoma, and 5 normal salivary glands. Cell division cycle-7 expression rate and intensity were compared statistically. Results: The protein was expressed in almost all tumors. The intensity and mean of cell division cycle-7 expression were higher in malignant tumors in comparison with pleomorphic adenomas (p = 0.000). The protein expression was correlated with tumor grades (p = 0.000). Conclusions: The present study demonstrated cell division cycle-7 overexpression in malignant salivary gland tumors in comparison with pleomorphic adenomas, and also a correlation with tumor differentiation. Therefore, this protein might be a potential prognostic and therapeutic target for salivary gland tumors.

Resumo Introdução: A cell division cycle-7 é uma serina/treonina quinase que tem um papel básico na regulação do ciclo celular e é um potencial marcador prognóstico ou terapêutico em alguns tipos de câncer humano. Objetivos: Este estudo investigou a expressão de cell division cycle-7 em tumores de glândulas salivares benignos e malignos e também sua correlação com fatores clínico-patológicos. Método: A expressão imuno-histoquímica de cell division cycle-7 foi avaliada em 46 casos, incluindo 15 carcinomas adenoide císticos, 12 carcinomas mucoepidermoides, 14 adenomas pleomórficos e 5 glândulas salivares normais. A taxa de expressão e a intensidade da proteína cell division cycle-7 foram comparadas estatisticamente. Resultados: A proteína foi expressa em quase todos os tumores. A intensidade e a média da expressão de cell division cycle-7 foram maiores em tumores malignos em comparação com adenoma pleomórfico (p = 0,000). A expressão da proteína foi correlacionada com os graus do tumor (p = 0,000). Conclusões: O presente estudo demonstrou a superexpressão de cell division cycle-7 em tumores malignos de glândulas salivares quando comparada com o adenoma pleomórfico, além de uma correlação com a diferenciação de tumores. Portanto, essa proteína pode ser um potencial marcador prognóstico e terapêutico para tumores de glândulas salivares.
Descritores: Neoplasias das Glândulas Salivares/patologia
Proteínas Serina-Treonina Quinases/análise
Carcinoma Mucoepidermoide/patologia
Carcinoma Adenoide Cístico/patologia
Adenoma Pleomorfo/patologia
Proteínas de Ciclo Celular/análise
-Prognóstico
Valores de Referência
Imuno-Histoquímica
Biomarcadores Tumorais/análise
Estudos de Casos e Controles
Diferenciação Celular
Estudos Transversais
Estudos Retrospectivos
Limites: Humanos
Masculino
Feminino
Adulto
Pessoa de Meia-Idade
Idoso
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Id: biblio-1019587
Autor: Dufner-Almeida, Luiz Gustavo; Cruz, Dayane Bernardino da; Mingroni Netto, Regina Célia; Batissoco, Ana Carla; Oiticica, Jeanne; Salazar-Silva, Rodrigo.
Título: Stem-cell therapy for hearing loss: are we there yet? / Terapia com células-tronco para perda auditiva: já chegamos lá?
Fonte: Braz. j. otorhinolaryngol. (Impr.);85(4):520-529, July-Aug. 2019. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo; . Centro de Pesquisa sobre o Genoma Humano e Células-Tronco; . Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico; . Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior; . PROEX.
Resumo: Abstract Introduction: Mammalian hair cells and auditory neurons do not show regenerative capacity. Hence, damage to these cell types is permanent and leads to hearing loss. However, there is no treatment that re-establishes auditory function. Regenerative therapies using stem cells represent a promising alternative. Objective: This article aims to review the current literature about the main types of stem cells with potential for application in cell therapy for sensorineural hearing loss, the most relevant experiments already performed in animals, as well as the advances that have been recently made in the field. Methods: Research included the databases PubMed/MEDLINE, Web of Science, Science Direct and SciELO, as well as gray literature. Search strategy included the following main terms: "stem cells", "hair cells" and "auditory neurons". Additionally, the main terms were combined with the following secondary terms: "mesenchymal", "iPS", "inner ear", "auditory". The research was conducted independently by three researchers. Results: Differentiation of stem cells into hair cells and auditory neurons has a high success rate, reaching up to 82% for the first and 100% for the latter. Remarkably, these differentiated cells are able to interact with hair cells and auditory neurons of cochlear explants through formation of new synapses. When transplanted into the cochlea of animals with hearing loss, auditory restoration has been documented to date only in deafferented animals. Conclusion: Advances have been more prominent in cases of auditory neuropathy, since partial improvement of auditory nerve conditions through cell-based therapy may increase the number of patients who can successfully receive cochlear implants.

Resumo Introdução: Nos mamíferos, as células ciliadas e os neurônios auditivos não apresentam capacidade regenerativa. Assim, os danos a esses tipos celulares são permanentes e levam à perda auditiva. Contudo, como não há tratamento que restabeleça a função auditiva, as terapias regenerativas utilizando células-tronco representam uma alternativa promissora. Objetivo: Este artigo tem como objetivo revisar a literatura atual sobre os principais tipos de células-tronco com potencial para aplicação em terapia celular para perda auditiva sensorioneural, os experimentos mais relevantes já realizados em animais, bem como os avanços obtidos recentemente nessa área. Método: As pesquisas incluíram as bases de dados PubMed/MEDLINE, Web of Science, Science Direct e SciELO, além da literatura cinza. A estratégia de busca incluiu os seguintes termos principais: "stem cells", "hair cells" e "auditory neurons". Além disso, os termos principais foram combinados com os seguintes termos secundários: "mesenchymal", "iPS", "inner ear" e "auditory". A pesquisa foi realizada de forma independente por três pesquisadores. Resultados: A diferenciação de células-tronco em células ciliadas e neurônios auditivos têm alta taxa de sucesso, chegando a 82% para o primeiro caso e 100% para o segundo. Notavelmente, essas células diferenciadas são capazes de interagir com células ciliadas e neurônios auditivos de explantes cocleares através da formação de novas sinapses. Quando transplantadas para a cóclea de animais com perda auditiva, a restauração da função auditiva foi observada, até o momento, apenas em animais com ablação do VIII nervo craniano. Conclusão: Os avanços têm sido mais proeminentes em casos de neuropatia auditiva. A melhora parcial das condições do nervo auditivo por meio de terapia baseada em células-tronco pode aumentar o número de pacientes candidatos a receber implantes cocleares com sucesso.
Descritores: Transplante de Células-Tronco
Perda Auditiva Neurossensorial/terapia
-Diferenciação Celular
Nervo Coclear/citologia
Células Ciliadas Auditivas
Limites: Humanos
Animais
Tipo de Publ: Revisão
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Id: biblio-1053221
Autor: Wang, Lamei; Ma, Sen; Ding, Qiang; Wang, Xiaolong; Chen, Yulin.
Título: CRISPR/Cas9-mediated MSTN gene editing induced mitochondrial alterations in C2C12 myoblast cells
Fonte: Electron. j. biotechnol;40:30-39, July. 2019. ilus, graf.
Idioma: en.
Projeto: National Natural Science Foundation of China; . National Key Research and Development Program; . Key Research Program of Shaanxi Province.
Resumo: Background: Myostatin (MSTN) negatively regulates muscle mass and is a potent regulator of energy metabolism. However, MSTN knockout have affect mitochondrial function. This research assessed the mitochondrial energy metabolism of Mstn−/+ KO cells, and wondered whether the mitochondria biogenesis are affected. Results: In this study, we successfully achieved Mstn knockout in skeletal muscle C2C12 cells using a CRISPR/Cas9 system and measured proliferation and differentiation using the Cell-Counting Kit-8 assay and qPCR, respectively. We found that MSTN dysfunction could promote proliferation and differentiation compared with the behaviour of wild-type cells. Moreover, Mstn KO induced an increase in KIF5B expression. The mitochondrial content was significantly increased in Mstn KO C2C12 cells, apparently associated with the increases in PGC-1α, Cox1, Cox2, ND1 and ND2 expression. However, no differences were observed in glucose consumption and lactate production. Interestingly, Mstn KO C2C12 cells showed an increase in IL6 and a decrease in TNF-1α levels. Conclusion: These findings indicate that MSTN regulates mitochondrial biogenesis and metabolism. This gene-editing cells provided favourable evidence for animal breeding and metabolic diseases.
Descritores: Miostatina/genética
Mitocôndrias/genética
Mitocôndrias/metabolismo
-Biogênese de Organelas
Immunoblotting
Diferenciação Celular
Músculo Esquelético/citologia
Músculo Esquelético/metabolismo
Mioblastos/citologia
Mioblastos/metabolismo
MicroRNAs
Proliferação de Células
Sistemas CRISPR-Cas
Citometria de Fluxo
Edição de Genes
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Laus, José Luiz
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Id: biblio-888124
Autor: Aldrovani, Marcela; Filezio, Marcella Rosa; Laus, José Luiz.
Título: A supramolecular look at microenvironmental regulation of limbal epithelial stem cells and the differentiation of their progeny / Uma visão supramolecular sobre a regulação microambiental de células tronco epiteliais limbais e a diferenciação de sua progênie
Fonte: Arq. bras. oftalmol;80(4):268-272, July-Aug. 2017. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: FAPESP; . CNPq.
Resumo: ABSTRACT Various approaches have been taken to improve our knowledge of the microenvironmental regulation of limbal epithelial stem cells. Researchers have extensively investigated the roles of growth factors, survival factors, cytokines, enzymes, and permeable molecules secreted by the limbal cells. However, recent evidence suggests that stem cell fate (i.e., self-renewal or differentiation) can also be influenced by biophysical and mechanical cues related to the supramolecular organization and the liquid crystalline (mesophase) nature of the stromal extracellular matrix. These cues can be sensed by stem cells and transduced into intracellular biochemical and functional responses, a process known as mechanotransduction. The objective of this review is to offer perspectives on the supramolecular microenvironmental regulation of limbal epithelial stem cells and the differentiation of their progeny.

RESUMO Muitas abordagens têm sido utilizadas para ampliar entendimentos sobre a regulação microambiental das células tronco epiteliais limbais. Neste contexto, pesquisadores têm exaustivamente investigado a participação de fatores de crescimento, fatores de sobrevida, citocinas, enzimas e moléculas permeáveis secretadas pelas células limbais. Entretanto, evidências recentes sugerem que o destino (ie. autorrenovação ou recrutamento para a via de diferenciação) das células tronco também sofre influência de estímulos biofísicos ou mecânicos relacionados à organização supramolecular e à natureza liquido-cristalina (mesofases) da matriz extracelular estromal. Esses estímulos podem ser percebidos e traduzidos pelas células tronco em sinais bioquímicos que geram respostas funcionais, através de um processo designado de mecanotransdução. Objetiva-se, com a presente revisão, oferecer ao leitor perspectivas supramoleculares sobre a regulação microambiental das células tronco epiteliais limbais e a diferenciação de sua progênie.
Descritores: Células-Tronco/fisiologia
Diferenciação Celular/fisiologia
Limbo da Córnea/citologia
Epitélio Anterior/citologia
Mecanotransdução Celular/fisiologia
Matriz Extracelular/fisiologia
-Epitélio Anterior/fisiologia
Nicho de Células-Tronco/fisiologia
Limites: Humanos
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Texto completo SciELO Chile
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Id: biblio-1089074
Autor: Zhu, Zhiwei; Ma, Yueyue; Li, Yuan; Li, Pengfei; Cheng, Zhixue; Li, Huifeng; Zhang, Lihuan; Tang, Zhongwei.
Título: The comprehensive detection of miRNA, lncRNA, and circRNA in regulation of mouse melanocyte and skin development
Fonte: Biol. Res;53:04, 2020. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: Key Research and Development Project of Shanxi Province; . Program for the Top Young Innovative Talents of Shanxi Agricultural University; . National Natural Science Foundation of China.
Resumo: BACKGROUND: Pigmentation development, is a complex process regulated by many transcription factors during development. With the development of the RNA sequencing (RNA-seq), non-coding RNAs, such as miRNAs, lncRNAs, and circRNAs, are found to play an important role in the function detection of related regulation factors. In this study, we provided the expression profiles and development of ncRNAs related to melanocyte and skin development in mice with black coat color skin and mice with white coat color skin during embryonic day 15 (E15) and postnatal day 7 (P7). The expression profiles of different ncRNAs were detected via RNA-seq and also confirmed by the quantitative real-time PCR (qRT-PCR) method. GO and KEGG used to analyze the function the related target genes. RESULTS: We identified an extensive catalogue of 206 and 183 differently expressed miRNAs, 600 and 800 differently expressed lncRNAs, and 50 and 54 differently expressed circRNAs, respectively. GO terms and pathway analysis showed the target genes of differentially expressed miRNA and lncRNA. The host genes of circRNA were mainly enriched in cellular process, single organism process. The target genes of miRNAs were mainly enriched in chromatin binding and calcium ion binding in the nucleus. The function of genes related to lncRNAs are post translation modification. The competing endogenous RNA (ceRNA) network of lncRNAs and circRNAs displays a complex interaction between ncRNA and mRNA related to skin development, such as Tcf4 , Gnas , and Gpnms related to melanocyte development. CONCLUSIONS: The ceRNA network of lncRNA and circRNA displays a complex interaction between ncRNA and mRNA related to skin development and melanocyte development. The embryonic and postnatal development of skin provide a reference for further studies on the development mechanisms of ncRNA during pigmentation.
Descritores: Pele/embriologia
Pigmentação da Pele/genética
Perfilação da Expressão Gênica
MicroRNAs/genética
RNA Longo não Codificante/genética
Melanócitos
-Diferenciação Celular
Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
Limites: Animais
Camundongos
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Rosa, Adalberto Luiz
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Id: biblio-1090765
Autor: LOPES, Helena Bacha; SOUZA, Alann Thaffarell Portilho; FREITAS, Gileade Pereira; ELIAS, Carlos Nelson; ROSA, Adalberto Luiz; BELOTI, Marcio Mateus.
Título: Effect of focal adhesion kinase inhibition on osteoblastic cells grown on titanium with different topographies
Fonte: J. appl. oral sci;28:e20190156, 2020. graf.
Idioma: en.
Projeto: FAPESP; . FAPESP; . FAPESP.
Resumo: Abstract Objective The present study aimed to investigate the participation of focal adhesion kinases (FAK) in interactions between osteoblastic cells and titanium (Ti) surfaces with three different topographies, namely, untreated (US), microstructured (MS), and nanostructured (NS). Methodology Osteoblasts harvested from the calvarial bones of 3-day-old rats were cultured on US, MS and NS discs in the presence of PF-573228 (FAK inhibitor) to evaluate osteoblastic differentiation. After 24 h, we evaluated osteoblast morphology and vinculin expression, and on day 10, the following parameters: gene expression of osteoblastic markers and integrin signaling components, FAK protein expression and alkaline phosphatase (ALP) activity. A smooth surface, porosities at the microscale level, and nanocavities were observed in US, MS, and NS, respectively. Results FAK inhibition decreased the number of filopodia in cells grown on US and MS compared with that in NS. FAK inhibition decreased the gene expression of Alp, bone sialoprotein, osteocalcin, and ALP activity in cells grown on all evaluated surfaces. FAK inhibition did not affect the gene expression of Fak, integrin alpha 1 ( Itga1 ) and integrin beta 1 ( Itgb1 ) in cells grown on MS, increased the gene expression of Fak in cells grown on NS, and increased the gene expression of Itga1 and Itgb1 in cells grown on US and NS. Moreover, FAK protein expression decreased in cells cultured on US but increased in cells cultured on MS and NS after FAK inhibition; no difference in the expression of vinculin was observed among cells grown on all surfaces. Conclusions Our data demonstrate the relevance of FAK in the interactions between osteoblastic cells and Ti surfaces regardless of surface topography. Nanotopography positively regulated FAK expression and integrin signaling pathway components during osteoblast differentiation. In this context, the development of Ti surfaces with the ability to upregulate FAK activity could positively impact the process of implant osseointegration.
Descritores: Osteoblastos/efeitos dos fármacos
Sulfonas/farmacologia
Titânio/química
Quinolonas/farmacologia
Proteína-Tirosina Quinases de Adesão Focal/antagonistas & inibidores
-Osteoblastos/fisiologia
Sulfonas/química
Propriedades de Superfície
Microscopia Eletrônica de Varredura
Transdução de Sinais
Expressão Gênica
Integrinas/análise
Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos
Células Cultivadas
Osseointegração/efeitos dos fármacos
Ratos Wistar
Quinolonas/química
Proliferação de Células/efeitos dos fármacos
Proteína-Tirosina Quinases de Adesão Focal/análise
Proteína-Tirosina Quinases de Adesão Focal/química
Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
Limites: Animais
Responsável: BR28.1 - Serviço de Biblioteca e Documentação Professor Doutor Antônio Gabriel Atta


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Id: biblio-950491
Autor: Xiong, Yunfan; Liu, Ying; Ge, Jian.
Título: Induction of pluripotent stem cells by reprogramming human ocular fibroblasts under xeno-free conditions / Indução de células-tronco pluripotentes pela reprogramação de fibroblastos oculares humanos sob condições xeno-livre
Fonte: Arq. bras. oftalmol;81(5):376-383, Sept.-Oct. 2018. tab, graf.
Idioma: en.
Projeto: National Natural Science Foundation of China.
Resumo: ABSTRACT Purposes: To develop an efficient and xeno-free standard eye-derived induced pluripotent stem cell reprogramming protocol for use during induced pluripotent stem cell-based cell therapies in treating retinal degenerative diseases and to compare the relative effectiveness of both animal- and non-animal-derived culture systems in the generation of induced pluripotent stem cells. Methods: Primary cultured human pterygium fibroblasts and human Tenon's capsule fibroblasts were induced to induced pluripotent stem cells using a non-in­tegrated virus under two xeno-free systems; as part of this study, a traditional non-xeno-free reprogramming system was also assessed. Induced pluripotent stem cell clones were selected and counted by live staining. Reprogramming efficiencies were evaluated between the fibroblasts and among different culture systems. In a series of experiments, such as PCR and immunofluorescence staining, the induced pluripotent stem cells were characterized. Results: Human pterygium fibroblast- and human Tenon's capsule fibroblast-derived induced pluripotent stem cells were successfully established using different reprogramming systems, under which they exhibited properties of induced pluripotent stem cells. Reprogramming efficiencies of induced pluripotent stem cells using the cell therapy system, the traditional system, and the E6/E8 system were 0.014%, 0.028%, and 0.001%, respectively, and those of human pterygium fibroblast- and human Tenon's capsule fibroblast-derived induced pluripotent stem cells-using the aforementioned systems-were 0.018% and 0.017%, respectively. Conclusions: Sendai virus facilitates induced pluripotent stem cell reprogramming of ocular fibroblasts-both human pterygium and human Tenon's capsule fibroblasts being safe and efficient for induced pluripotent stem cell reprogramming. Although the reprogramming efficiencies of ocular-derived induced pluripotent stem cells under xeno-free conditions were not superior to those observed using the traditional reprogramming system, the cell therapy system reprogramming system is a good option when induced pluripotent stem cells are to be induced under xeno-free conditions.

RESUMO Objetivos: Desenvolver um protocolo padrão, eficiente e xeno-livre, para a reprogramação de células-tronco pluripotentes induzidas, que possa ser usado durante as terapias de células-tronco pluripotentes induzidas para o tratamento de doenças degenerativas da retina, e comparar a eficácia relativa de sistemas de cultivo de origem animal e de origem não animal na geração de células-tronco pluripotentes induzidas. Métodos: Cultivos primários de fibroblastos de pterígio humano e de fibroblastos da cápsula de Tenon humanos foram induzidos a células-tronco pluripotentes induzidas usando um vírus não integrado sob dois sistemas xeno-livres; um sistema tradicional de reprogramação não xeno-livre também foi avaliado como parte deste estudo. Os clones de células-tronco pluripotentes induzidas foram selecionados e contados por coloração de células vivas. As eficiências de reprogramação foram avaliadas entre os diferentes fibroblastos e entre os diferentes sistemas de cultivo. Uma série de experimentos, como o PCR e a coloração por imunofluorescência, foram conduzidos para caracterizar as células-tronco pluripotentes induzidas. Resultados: Célu­las-tronco pluripotentes induzidas derivadas de fibroblastos de pterígio humano e fibroblastos da cápsula de Tenon humanos foram estabelecidas com sucesso sob diferentes sistemas de reprogramação e exibiram propriedades de células-tronco pluripotentes induzidas. As eficiências de reprogramação das células-tronco pluripotentes induzidas usando o sistema de terapia celular, o sistema tradicional e o sistema E6/E8 foram 0,014, 0,028% e 0,001%, respectivamente. Além disso, as efi­ciências de reprogramação de células-tronco pluripotentes induzidas derivadas de fibroblastos de pterígio humano e de fibroblastos da cápsula de Tenon humanos usando todos os sistemas acima foram de 0,018% e 0,017%, respectivamente. Conclusões: O vírus Sendai pode ser usado para facilitar a reprogramação de fibroblastos oculares pelas células-tronco pluripotentes induzidas. Tanto os fibroblastos de pterígio humano quanto os fibroblastos da cápsula de Tenon humanos são seguros e eficientes para a reprogramação de células-tronco pluripotentes induzidas. Embora as eficiências de reprogramação das células-tronco pluripotentes induzidas de origem ocular sob condições xeno-livres não tenham sido superiores às eficiências observadas para o sistema tradicional de reprogramação, o sistema de reprogramação sistema de terapia celular é uma boa opção para a indução de células-tronco pluripotentes induzidas sob condições xeno-livres.
Descritores: Pterígio/patologia
Técnicas de Cultura de Células/métodos
Olho/citologia
Reprogramação Celular/fisiologia
Células-Tronco Pluripotentes Induzidas/citologia
Fibroblastos/citologia
-Diferenciação Celular/fisiologia
Transdiferenciação Celular
Limites: Humanos
Tipo de Publ: Estudo Comparativo
Responsável: BR1.1 - BIREME



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