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Id: lil-391397
Autor: Ortega de López, Mariemmna.
Título: Control fisiológico en una fusión moa::lac de escherichia coli K12: cinéticas de expresión bajo diferentes condiciones de cultivo / Control fisiologic in the funsions moa:: lac of escherichia coli K12 cinetic of expression a low diferent condition of cultive
Fonte: Medula;6(1/4):5-14, ene.-dic. 1997. tab.
Idioma: es.
Resumo: La biosintesis del molibdocofactor, MoCo, en Escherichia coli requiere productos codificados por los genes mol (moa. mob. mod. moe. mog. molR) y es insensible a los factores fisiológicos que inducen la biosíntesis de la molibdoenzima NRA. En el presente trabajo se construyó una fusión de operón estabilizada moa::lac y se estudiaron los efectos de difentes factores fisiológicos sobre su expresión transcripcional, en un medio sintético, estimando la biosíntesis acumulativa de la ßGal. En cultivos de fase estacionaria prolongada, la expresión de la fusión presentó el patrón de regulación siguiente. Ocurrió aún en ausencia de algún inductor exógeno y fue relativamente insensible a los controles que regulan la inducción de la NRA. Incrementó bajo condiciones aeróbicas frente a las anaeróbicas. Incrementó con casaminoácidos en anaerobiosis, pero disminuyó en aerobiosis. Disminuyó por crecimiento con glucosa. En las cinéticas de expresión, se observó que un cultivo creciendo constantemente en aerobiosis mostró un patrón bifásico de inducción y los niveles incrementaron durante la fase exponencial, parecido a la biosíntesis del MoCo; además se confirmaron los efectos modulares, mediados por la glucosa, las condiciones de aeración y la edad del cultivo. Se propone la necesidad de circuitos de control acoplados para un balance adecuado entre la expresión del operón moa y la biosíntesis del MoCo.
Descritores: Escherichia coli
Genes
Óperon Lac
-Venezuela
Tipo de Publ: Revisão
Responsável: VE1.1 - Biblioteca Humberto Garcia Arocha


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Texto completo SciELO Brasil
Azevedo, J. L
Coutinho, L. L
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Id: lil-290407
Autor: Ribeiro, L. A; Mariani, P. D. S. C; Azevedo, J. L; Rech, E. L; Schmidt, G. S; Coutinho, L. L.
Título: A biolistic process for in vitro gene transfer into chicken embryos
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;34(9):1115-1124, Sept. 2001. ilus, tab.
Idioma: en.
Projeto: FAPESP; . EMBRAPA/CNPSA; . CNPq.
Resumo: Chicken embryos kept in culture medium were bombarded using a high helium gas pressure biolistic device. To optimize the factors that affect transformation efficiency, the lacZ gene under control of the human cytomegalovirus immediate early enhancer/promoter was used as a reporter gene. There was an inverse relationship between survival rate and transformation efficiency. The best conditions obtained for high embryo survival and high transformation efficiency were achieved with 800 psi helium gas pressure, 500 mmHg vacuum, gold particles, an 8 cm DNA-coated microparticle flying distance to the embryo and embryo placement 0.5 cm from the center of the particle dispersion cone. Under these conditions, transformation efficiency was 100 percent, survival rate 25 percent and the number of expression units in the embryo body cells ranged from 100 to 1,000. Expression of green fluorescent protein was also detected in embryos bombarded under optimal conditions. Based on the results obtained, the biolistic process can be considered an efficient method for the transformation of chicken embryos and therefore can be used as a model system to study transient gene expression and tissue-specific promoters
Descritores: Biolística
Técnicas de Transferência de Genes
Técnicas In Vitro
-beta-Galactosidase/metabolismo
Expressão Gênica
Genes Reporter
Hélio
Indicadores e Reagentes/metabolismo
Óperon Lac
Proteínas Luminescentes/metabolismo
Plasmídeos
Pressão
Limites: Animais
Embrião de Galinha
Tipo de Publ: Research Support, Non-U.S. Gov't
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-195171
Autor: Robeson, James; Llorens, E; Godoy, S. V.
Título: Wide host range plasmid probe for the heterologous transmission of escherichia coli lac genes
Fonte: Bol. micol;11(1/2):87-93, jul.-dic. 1996. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: El operon lac de escherichia coli, es un sistema genético que ha sido útil para elucidar principios básicos de variación y expresión genética y para la construcción de cepas microbianas de proyección industrial. En este contexto, hemos derivado por clonación in vivo, un plasmidio de amplio rango de hospedero (pUCV3), que contiene los genes lac de e. coli, los cuales pueden ser ahora transmitidos con facilidad a todos los microorganismos capaces de incorporar replicones IncPa, grupo de compatibilidad al que pertenece pUCV3. Como ejemplo este plasmidio fue transmitido a bacterias marinas y a cytophaga johsonae, microorganismos en los cuales se apreció la expresión regulada del sistema lac. En consecuencia, pUCV3, puede ser usado como sonda para evaluar en comportamiento del operón lac en variados transfondos genéticos microbianos
Descritores: Sondas de DNA/genética
Escherichia coli/genética
Óperon Lac/genética
-Clonagem Molecular
Plasmídeos/genética
Responsável: CL2.1 - Biblioteca de Medicina


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Texto completo SciELO Brasil
Castilho, B. A
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Id: lil-191348
Autor: Magalhäes, V. D; Castilho, B. A.
Título: Mini-Mu insertions in the tetracycline resistence determinant from proteus mirabilis
Fonte: Braz. j. med. biol. res = Rev. bras. pesqui. méd. biol;30(3):363-7, Mar. 1997. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: The inducible tetracycline resistance determinant isolated from Proteus mirabilis cloned into the plasmid pACYC177 was mutagenized by insertion of a mini-Mu-lac phage in order to define the regions in the cloned sequences encoding the structural and regulatory proteins. Three different types of mutants were obtained: one lost the resistance phenotype and became Lac+; another expressed the resistance at lowerlevels and constitutively; the third was still dependent on induction but showed a lower minimal inhibitory concentration. The mutant phenotypes and the locations of the insertions indicate that the determinant is composed of a repressor gene and a structural gene which are not transcribed divergently as are other known tetracycline determinants isolated from Gram-negative bacteria.
Descritores: Bacteriófago mu/genética
Óperon Lac
Plasmídeos/genética
Proteus mirabilis/citologia
Resistência a Tetraciclina/genética
Limites: Animais
Responsável: BR1.1 - BIREME


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Id: lil-105388
Autor: Porco, Antonieta; Istúriz, Tomás.
Título: Selection of lacZ operon fusions in genes of gluconate metabolism in E. coli: Characterization of A gntT::lacZ fusion / Selección de fusiones lacZ de operon en genes del metabolismo del gluconato en E.coli: Caracterización de una fusión gntT::lacZ
Fonte: Acta cient. venez;42(5):270-5, 1991. ilus, tab.
Idioma: en.
Resumo: The initial steps involved in the utilization of gluconate by E.coli, its incorporation into the cell and susequent phosphorylation to gluconate 6-phosphate, conform two system that duplicate activities. These system, GntI and GntII, are specified by two sets of genes distinctly regulated and located respectively at the malA-asd (75 min) and fdp-valS (96 min) regions of the bacterial chromosome. The precence of duplicate activities in the metabolism of gluconates of E.coli, has made difficult the study of the expression and participation of the GntI and GntII system. In order to advance in these respec, the phage *placMu53 was used to select operon gnt::lacZ fusion in a E.coli strain (edd-zwf), (gnd-his), lac. Here we report the study of a gntT::lacZ fusion. This transductan allowed to differentiate the inducible expresion of the gntT and gntU genes. its characteristic, in agreement with previous report, support the central role of the gntT gene in this metabolism
Descritores: Escherichia coli/genética
Genes Bacterianos
Marcadores Genéticos
Gluconatos/metabolismo
Óperon Lac
-Escherichia coli/crescimento & desenvolvimento
Marcadores Genéticos
Cinética
Biossíntese de Proteínas
Responsável: VE1.1 - Biblioteca Humberto Garcia Arocha



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