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[PMID]:29324815
[Au] Autor:Yerabham ASK; Müller-Schiffmann A; Ziehm T; Stadler A; Köber S; Indurkhya X; Marreiros R; Trossbach SV; Bradshaw NJ; Prikulis I; Willbold D; Weiergräber OH; Korth C
[Ad] Endereço:Department of Neuropathology, Heinrich Heine University Düsseldorf, Düsseldorf, Germany.
[Ti] Título:Biophysical insights from a single chain camelid antibody directed against the Disrupted-in-Schizophrenia 1 protein.
[So] Source:PLoS One;13(1):e0191162, 2018.
[Is] ISSN:1932-6203
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Accumulating evidence suggests an important role for the Disrupted-in-Schizophrenia 1 (DISC1) protein in neurodevelopment and chronic mental illness. In particular, the C-terminal 300 amino acids of DISC1 have been found to mediate important protein-protein interactions and to harbor functionally important phosphorylation sites and disease-associated polymorphisms. However, long disordered regions and oligomer-forming subdomains have so far impeded structural analysis. VHH domains derived from camelid heavy chain only antibodies are minimal antigen binding modules with appreciable solubility and stability, which makes them well suited for the stabilizing proteins prior to structural investigation. Here, we report on the generation of a VHH domain derived from an immunized Lama glama, displaying high affinity for the human DISC1 C region (aa 691-836), and its characterization by surface plasmon resonance, size exclusion chromatography and immunological techniques. The VHH-DISC1 (C region) complex was also used for structural investigation by small angle X-ray scattering analysis. In combination with molecular modeling, these data support predictions regarding the three-dimensional fold of this DISC1 segment as well as its steric arrangement in complex with our VHH antibody.
[Mh] Termos MeSH primário: Camelídeos Americanos/imunologia
Proteínas do Tecido Nervoso/imunologia
Anticorpos de Cadeia Única/química
[Mh] Termos MeSH secundário: Sequência de Aminoácidos
Animais
Complexo Antígeno-Anticorpo/química
Complexo Antígeno-Anticorpo/genética
Reações Antígeno-Anticorpo
Fenômenos Biofísicos
Camelídeos Americanos/genética
Mapeamento de Epitopos
Feminino
Seres Humanos
Cadeias Pesadas de Imunoglobulinas/química
Cadeias Pesadas de Imunoglobulinas/genética
Camundongos
Modelos Moleculares
Proteínas do Tecido Nervoso/química
Proteínas do Tecido Nervoso/genética
Fragmentos de Peptídeos/química
Fragmentos de Peptídeos/genética
Fragmentos de Peptídeos/imunologia
Domínios e Motivos de Interação entre Proteínas
Espalhamento a Baixo Ângulo
Anticorpos de Cadeia Única/genética
Ressonância de Plasmônio de Superfície
Difração de Raios X
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE; RESEARCH SUPPORT, NON-U.S. GOV'T
[Nm] Nome de substância:
0 (Antigen-Antibody Complex); 0 (DISC1 protein, human); 0 (Disc1 protein, mouse); 0 (Immunoglobulin Heavy Chains); 0 (Nerve Tissue Proteins); 0 (Peptide Fragments); 0 (Single-Chain Antibodies)
[Em] Mês de entrada:1802
[Cu] Atualização por classe:180220
[Lr] Data última revisão:
180220
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:180112
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1371/journal.pone.0191162


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[PMID]:29307854
[Au] Autor:Pallotti S; Pediconi D; Subramanian D; Molina MG; Antonini M; Morelli MB; Renieri C; La Terza A
[Ad] Endereço:School of Bioscience and Veterinary Medicine, University of Camerino, Via Gentile III da Varano, 62032 Camerino, (MC), Italy. Electronic address: stefano.pallotti@unicam.it.
[Ti] Título:Evidence of post-transcriptional readthrough regulation in FGF5 gene of alpaca.
[So] Source:Gene;647:121-128, 2018 Mar 20.
[Is] ISSN:1879-0038
[Cp] País de publicação:Netherlands
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Two different phenotypes are described in alpaca, identified as suri and huacaya, which differ in the type of fleece. The huacaya fleece is characterized by compact, soft and highly crimped fibers, while the suri fleece is longer, straight, less-crimped and lustrous. In our study, the Fibroblast growth factor 5 (FGF5) was investigated as a possible candidate gene for hair length in alpaca (Vicugna pacos). As previously identified in other mammals, our results show that the alpaca FGF5 gene gives rise to a short (FGF5S) and a long (FGF5) isoform. Interestingly, in the long isoform, we observed a point mutation (i.e., a transition C>T at position 499 downstream of the ATG codon) that is able to generate a premature termination codon (PTC). The highly conserved nucleotide and amino acid sequence after PTC suggested a readthrough event (RT) that was confirmed by western blot analysis. The analysis of cDNA sequence revealed motifs and structures of mRNA undergoing RT. In fact, the event is positively influenced by particular signals harbored by the transcript. To the best of our knowledge, this is the first case of a readthrough event on PTC reported for the FGF5 gene and the first case of this translational mechanism in alpaca.
[Mh] Termos MeSH primário: Fator 5 de Crescimento de Fibroblastos/genética
Processamento Pós-Transcricional do RNA/genética
[Mh] Termos MeSH secundário: Sequência de Aminoácidos
Animais
Camelídeos Americanos
Códon sem Sentido/genética
DNA Complementar/genética
Regulação da Expressão Gênica/genética
Cabelo/metabolismo
Fenótipo
Mutação Puntual/genética
Isoformas de Proteínas/genética
RNA Mensageiro/genética
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Codon, Nonsense); 0 (DNA, Complementary); 0 (Protein Isoforms); 0 (RNA, Messenger); 129653-64-1 (Fibroblast Growth Factor 5)
[Em] Mês de entrada:1802
[Cu] Atualização por classe:180209
[Lr] Data última revisão:
180209
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:180109
[St] Status:MEDLINE


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[PMID]:28471361
[Au] Autor:Duhoo Y; Roche J; Trinh TTN; Desmyter A; Gaubert A; Kellenberger C; Cambillau C; Roussel A; Leone P
[Ad] Endereço:Centre National de la Recherche Scientifique, Architecture et Fonction des Macromolécules Biologiques, UMR 7257, Marseille, France.
[Ti] Título:Camelid nanobodies used as crystallization chaperones for different constructs of PorM, a component of the type IX secretion system from Porphyromonas gingivalis.
[So] Source:Acta Crystallogr F Struct Biol Commun;73(Pt 5):286-293, 2017 May 01.
[Is] ISSN:2053-230X
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:PorM is a membrane protein that is involved in the assembly of the type IX secretion system (T9SS) in Porphyromonas gingivalis, a major bacterial pathogen that is responsible for periodontal disease in humans. In the context of structural studies of PorM to better understand T9SS assembly, four camelid nanobodies were selected, produced and purified, and their specific interaction with the N-terminal or C-terminal part of the periplasmic domain of PorM was investigated. Diffracting crystals were also obtained, and the structures of the four nanobodies were solved by molecular replacement. Furthermore, two nanobodies were used as crystallization chaperones and turned out to be valuable tools in the structure-determination process of the periplasmic domain of PorM.
[Mh] Termos MeSH primário: Proteínas de Bactérias/química
Chaperonas Moleculares/química
Porphyromonas gingivalis/química
Anticorpos de Domínio Único/química
[Mh] Termos MeSH secundário: Sequência de Aminoácidos
Animais
Proteínas de Bactérias/genética
Proteínas de Bactérias/metabolismo
Sistemas de Secreção Bacterianos/genética
Sistemas de Secreção Bacterianos/metabolismo
Sítios de Ligação
Camelídeos Americanos/imunologia
Camelus/imunologia
Clonagem Molecular
Cristalização
Cristalografia por Raios X
Escherichia coli/genética
Escherichia coli/metabolismo
Expressão Gênica
Vetores Genéticos/química
Vetores Genéticos/metabolismo
Cinética
Modelos Moleculares
Chaperonas Moleculares/biossíntese
Chaperonas Moleculares/isolamento & purificação
Biblioteca de Peptídeos
Porphyromonas gingivalis/metabolismo
Ligação Proteica
Conformação Proteica em alfa-Hélice
Conformação Proteica em Folha beta
Domínios e Motivos de Interação entre Proteínas
Proteínas Recombinantes/química
Proteínas Recombinantes/genética
Proteínas Recombinantes/metabolismo
Alinhamento de Sequência
Homologia de Sequência de Aminoácidos
Anticorpos de Domínio Único/biossíntese
Anticorpos de Domínio Único/isolamento & purificação
Termodinâmica
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Bacterial Proteins); 0 (Bacterial Secretion Systems); 0 (Molecular Chaperones); 0 (Peptide Library); 0 (Recombinant Proteins); 0 (Single-Domain Antibodies)
[Em] Mês de entrada:1712
[Cu] Atualização por classe:171204
[Lr] Data última revisão:
171204
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170505
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1107/S2053230X17005969


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[PMID]:28994409
[Au] Autor:Hansen SB; Laursen NS; Andersen GR; Andersen KR
[Ad] Endereço:Department of Molecular Biology and Genetics, Aarhus University, Gustav Wieds Vej 10C, 8000 Aarhus, Denmark.
[Ti] Título:Introducing site-specific cysteines into nanobodies for mercury labelling allows de novo phasing of their crystal structures.
[So] Source:Acta Crystallogr D Struct Biol;73(Pt 10):804-813, 2017 Oct 01.
[Is] ISSN:2059-7983
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:The generation of high-quality protein crystals and the loss of phase information during an X-ray crystallography diffraction experiment represent the major bottlenecks in the determination of novel protein structures. A generic method for introducing Hg atoms into any crystal independent of the presence of free cysteines in the target protein could considerably facilitate the process of obtaining unbiased experimental phases. Nanobodies (single-domain antibodies) have recently been shown to promote the crystallization and structure determination of flexible proteins and complexes. To extend the usability of nanobodies for crystallographic work, variants of the Nb36 nanobody with a single free cysteine at one of four framework-residue positions were developed. These cysteines could be labelled with fluorophores or Hg. For one cysteine variant (Nb36-C85) two nanobody structures were experimentally phased using single-wavelength anomalous dispersion (SAD) and single isomorphous replacement with anomalous signal (SIRAS), taking advantage of radiation-induced changes in Cys-Hg bonding. Importantly, Hg labelling influenced neither the interaction of Nb36 with its antigen complement C5 nor its structure. The results suggest that Cys-Hg-labelled nanobodies may become efficient tools for obtaining de novo phase information during the structure determination of nanobody-protein complexes.
[Mh] Termos MeSH primário: Cisteína/química
Mercúrio/química
Anticorpos de Domínio Único/química
[Mh] Termos MeSH secundário: Animais
Camelídeos Americanos
Complemento C5/imunologia
Cristalização
Cristalografia por Raios X
Seres Humanos
Modelos Moleculares
Conformação Proteica
Anticorpos de Domínio Único/imunologia
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Complement C5); 0 (Single-Domain Antibodies); FXS1BY2PGL (Mercury); K848JZ4886 (Cysteine)
[Em] Mês de entrada:1711
[Cu] Atualização por classe:171101
[Lr] Data última revisão:
171101
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:171011
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1107/S2059798317013171


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[PMID]:28939787
[Ti] Título:Northern Ireland disease surveillance report, April to June 2017.
[So] Source:Vet Rec;181(12):315-318, 2017 Sep 21.
[Is] ISSN:2042-7670
[Cp] País de publicação:England
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Parasitic pneumonia in cowsLeptospirosis in a calfNecrotising mastitis in ewes due to infectionCongenital goitre in ovine fetuses pneumonia in growing pigsCircovirus and infection in pigeons These are among matters discussed in the Northern Ireland animal disease surveillance quarterly report for April to June 2017.
[Mh] Termos MeSH primário: Doenças dos Animais/epidemiologia
Vigilância de Evento Sentinela/veterinária
[Mh] Termos MeSH secundário: Animais
Doenças das Aves/epidemiologia
Camelídeos Americanos
Bovinos
Doenças dos Bovinos/epidemiologia
Columbidae
Feminino
Doenças dos Cavalos/epidemiologia
Cavalos
Irlanda do Norte/epidemiologia
Aves Domésticas
Doenças das Aves Domésticas/epidemiologia
Gravidez
Ovinos
Doenças dos Ovinos/epidemiologia
Suínos
Doenças dos Suínos/epidemiologia
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Em] Mês de entrada:1709
[Cu] Atualização por classe:170929
[Lr] Data última revisão:
170929
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170924
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1136/vr.j4370


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[PMID]:28883105
[Ti] Título:Disease surveillance in England and Wales, August 2017.
[So] Source:Vet Rec;181(10):257-260, 2017 Sep 09.
[Is] ISSN:2042-7670
[Cp] País de publicação:England
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Current and emerging issues: psoroptic mange in cattleHighlights from the scanning surveillance networkUpdate on international disease threatsAfrican swine fever in eastern Europe and the risk to the UKThese are among matters discussed in the Animal and Plant Health Agency's (APHA's) disease surveillance report for August 2017.
[Mh] Termos MeSH primário: Doenças dos Animais/epidemiologia
Surtos de Doenças/veterinária
Vigilância de Evento Sentinela/veterinária
[Mh] Termos MeSH secundário: Animais
Animais Selvagens
Camelídeos Americanos
Bovinos
Doenças dos Bovinos/epidemiologia
Doenças Transmissíveis Emergentes/veterinária
Inglaterra/epidemiologia
Feminino
Doenças dos Cavalos/epidemiologia
Cavalos
Internacionalidade
Aves Domésticas
Doenças das Aves Domésticas/epidemiologia
Gravidez
Ovinos
Doenças dos Ovinos/epidemiologia
Suínos
Doenças dos Suínos/epidemiologia
País de Gales/epidemiologia
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Em] Mês de entrada:1709
[Cu] Atualização por classe:170918
[Lr] Data última revisão:
170918
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170909
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1136/vr.j4173


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[PMID]:28859147
[Au] Autor:Cappa F; Campos V; Giannoni S; Andino N
[Ad] Endereço:INTERBIODES (Interacciones Biológicas del Desierto), Facultad Ciencias Exactas, Físicas y Naturales (Universidad Nacional de San Juan), San Juan, Argentina.
[Ti] Título:The effects of poaching and habitat structure on anti-predator behavioral strategies: A guanaco population in a high cold desert as case study.
[So] Source:PLoS One;12(8):e0184018, 2017.
[Is] ISSN:1932-6203
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:The effects of poaching on wildlife have been widely studied in conservation biology and can be heterogeneous, particularly on ungulates. These effects can be estimated through different methodologies whose use depends on several conditions such as Flight-initiation distance (FID). Our objectives were: 1- to evaluate whether poaching affects the FID and group structure of a guanaco (Lama guanicoe) population in a high cold desert in San Juan (Argentina); 2- to assess whether habitat structure (slope and vegetation cover) influences FID and group structure in this population. The study area included a site with poaching (unprotected area), and a site without poaching (protected area). We recorded 100 groups of guanacos: 70 in the protected and 30 in the unprotected area. FID and group size were greater in the unprotected than in the protected area, whereas proportions of group categories (with offspring, without offspring and solitary) were similar between areas. Besides, in relation to habitat structure, FID increased when vegetation cover decreased. On the other hand, FID and group size were not affected by slope. Our study shows that guanacos respond to poaching pressure as do other ungulate species, and that other factors such as vegetation cover also affect this behavior. Managers should be aware when interpreting FID due to its relation to habitat structure; the guanaco appears to assume greater risk (lower FID) in areas with high vegetation cover.
[Mh] Termos MeSH primário: Comportamento Animal/fisiologia
Camelídeos Americanos/fisiologia
Comportamento de Escolha
Conservação dos Recursos Naturais
Herbivoria/fisiologia
[Mh] Termos MeSH secundário: Animais
Argentina
Camelídeos Americanos/psicologia
Clima Desértico
Ecossistema
Feminino
Masculino
Poaceae/crescimento & desenvolvimento
Densidade Demográfica
Dinâmica Populacional
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Em] Mês de entrada:1710
[Cu] Atualização por classe:171016
[Lr] Data última revisão:
171016
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170901
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1371/journal.pone.0184018


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[PMID]:28847875
[Au] Autor:Taylor SD; Baird AN; Weil AB; Ruple A
[Ad] Endereço:Department of Veterinary Clinical Sciences, College of Veterinary Medicine, Purdue University, West Lafayette, Indiana, USA.
[Ti] Título:Evaluation of three intravenous injectable anaesthesia protocols in healthy adult male alpacas.
[So] Source:Vet Rec;181(12):322, 2017 Sep 21.
[Is] ISSN:2042-7670
[Cp] País de publicação:England
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Few studies have investigated the effects of intravenous injectable anaesthesia in alpacas. The objective of this study was to evaluate three intravenous injectable anaesthesia protocols in healthy adult alpacas exposed to noxious stimulation. A prospective randomised crossover study was done using six healthy adult male alpacas. Cardiopulmonary variables including heart rate, respiratory rate, mean arterial pressure, end-tidal pCO and haemoglobin oxygen saturation were collected immediately after and every two minutes following induction of each of three anaesthesia protocols in six male castrated alpacas. A hoof tester was used to apply consistent pressure every two minutes after induction and the response was recorded. Time from induction to muscle contraction and leg withdrawal were recorded, as well as time from induction to extubation, sternal recumbency and standing. There was no significant difference in duration of anaesthesia or cardiopulmonary variables among the three anaesthesia protocols. Total duration of anaesthesia was approximately 20 minutes for each protocol. Hypoxaemia and mild hypercarbia were common among all protocols. Induction and recovery scores were excellent.
[Mh] Termos MeSH primário: Anestesia Intravenosa/veterinária
Anestésicos Intravenosos/farmacologia
Camelídeos Americanos
[Mh] Termos MeSH secundário: Anestésicos Intravenosos/administração & dosagem
Animais
Protocolos Clínicos
Estudos Cross-Over
Diazepam/administração & dosagem
Diazepam/farmacologia
Quimioterapia Combinada/métodos
Quimioterapia Combinada/veterinária
Ketamina/administração & dosagem
Ketamina/farmacologia
Masculino
Propofol/administração & dosagem
Propofol/farmacologia
Estudos Prospectivos
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE; RANDOMIZED CONTROLLED TRIAL
[Nm] Nome de substância:
0 (Anesthetics, Intravenous); 690G0D6V8H (Ketamine); Q3JTX2Q7TU (Diazepam); YI7VU623SF (Propofol)
[Em] Mês de entrada:1709
[Cu] Atualização por classe:170929
[Lr] Data última revisão:
170929
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170830
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1136/vr.104085


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[PMID]:28842484
[Au] Autor:Barta ML; Shearer JP; Arizmendi O; Tremblay JM; Mehzabeen N; Zheng Q; Battaile KP; Lovell S; Tzipori S; Picking WD; Shoemaker CB; Picking WL
[Ad] Endereço:From the Department of Pharmaceutical Chemistry, University of Kansas, Lawrence, Kansas 66047.
[Ti] Título:Single-domain antibodies pinpoint potential targets within invasion plasmid antigen D of the needle tip complex for inhibition of type III secretion.
[So] Source:J Biol Chem;292(40):16677-16687, 2017 Oct 06.
[Is] ISSN:1083-351X
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Numerous Gram-negative pathogens infect eukaryotes and use the type III secretion system (T3SS) to deliver effector proteins into host cells. One important T3SS feature is an extracellular needle with an associated tip complex responsible for assembly of a pore-forming translocon in the host cell membrane. spp. cause shigellosis, also called bacillary dysentery, and invade colonic epithelial cells via the T3SS. The tip complex of contains invasion plasmid antigen D (IpaD), which initially regulates secretion and provides a physical platform for the translocon pore. The tip complex represents a promising therapeutic target for many important T3SS-containing pathogens. Here, in an effort to further elucidate its function, we created a panel of single-VH domain antibodies (VHHs) that recognize distinct epitopes within IpaD. These VHHs recognized the tip complex and modulated the infectious properties of Moreover, structural elucidation of several IpaD-VHH complexes provided critical insights into tip complex formation and function. Of note, one VHH heterodimer could reduce hemolytic activity by >80%. Our observations along with previous findings support the hypothesis that the hydrophobic translocator (IpaB in ) likely binds to a region within the tip protein that is structurally conserved across all T3SS-possessing pathogens, suggesting potential therapeutic avenues for managing infections by these pathogens.
[Mh] Termos MeSH primário: Antígenos de Bactérias/imunologia
Proteínas de Bactérias/imunologia
Sistemas de Secreção Bacterianos/imunologia
Epitopos/imunologia
Shigella flexneri/imunologia
Anticorpos de Cadeia Única/imunologia
[Mh] Termos MeSH secundário: Animais
Antígenos de Bactérias/genética
Proteínas de Bactérias/genética
Sistemas de Secreção Bacterianos/genética
Camelídeos Americanos
Evolução Molecular Direcionada
Epitopos/genética
Shigella flexneri/genética
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Antigens, Bacterial); 0 (Bacterial Proteins); 0 (Bacterial Secretion Systems); 0 (Epitopes); 0 (IpaD protein, Shigella flexneri); 0 (Single-Chain Antibodies)
[Em] Mês de entrada:1710
[Cu] Atualização por classe:171012
[Lr] Data última revisão:
171012
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170827
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1074/jbc.M117.802231


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Texto completo
[PMID]:28731329
[Au] Autor:Schenck S; Kunz L; Sahlender D; Pardon E; Geertsma ER; Savtchouk I; Suzuki T; Neldner Y; Stefanic S; Steyaert J; Volterra A; Dutzler R
[Ad] Endereço:Department of Biochemistry, University of Zurich , Winterthurerstrasse 190, 8057 Zurich, Switzerland.
[Ti] Título:Generation and Characterization of Anti-VGLUT Nanobodies Acting as Inhibitors of Transport.
[So] Source:Biochemistry;56(30):3962-3971, 2017 Aug 01.
[Is] ISSN:1520-4995
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:The uptake of glutamate by synaptic vesicles is mediated by vesicular glutamate transporters (VGLUTs). The central role of these transporters in excitatory neurotransmission underpins their importance as pharmacological targets. Although several compounds inhibit VGLUTs, highly specific inhibitors were so far unavailable, thus limiting applications to in vitro experiments. Besides their potential in pharmacology, specific inhibitors would also be beneficial for the elucidation of transport mechanisms. To overcome this shortage, we generated nanobodies (Nbs) by immunization of a llama with purified rat VGLUT1 and subsequent selection of binders from a phage display library. All identified Nbs recognize cytosolic epitopes, and two of the binders greatly reduced the rate of uptake of glutamate by reconstituted liposomes and subcellular fractions enriched with synaptic vesicles. These Nbs can be expressed as functional green fluorescent protein fusion proteins in the cytosol of HEK cells for intracellular applications as immunocytochemical and biochemical agents. The selected binders thus provide valuable tools for cell biology and neuroscience.
[Mh] Termos MeSH primário: Depressores do Sistema Nervoso Central/farmacologia
Córtex Cerebral/efeitos dos fármacos
Moduladores de Transporte de Membrana/farmacologia
Modelos Moleculares
Proteínas do Tecido Nervoso/antagonistas & inibidores
Neurônios/efeitos dos fármacos
Anticorpos de Domínio Único/farmacologia
Proteína Vesicular 1 de Transporte de Glutamato/antagonistas & inibidores
[Mh] Termos MeSH secundário: Animais
Transporte Biológico/efeitos dos fármacos
Camelídeos Americanos
Células Cultivadas
Depressores do Sistema Nervoso Central/química
Depressores do Sistema Nervoso Central/metabolismo
Córtex Cerebral/citologia
Córtex Cerebral/metabolismo
Embrião de Mamíferos/citologia
Ácido Glutâmico/metabolismo
Proteínas de Fluorescência Verde/química
Proteínas de Fluorescência Verde/genética
Proteínas de Fluorescência Verde/metabolismo
Células HEK293
Seres Humanos
Moduladores de Transporte de Membrana/química
Moduladores de Transporte de Membrana/metabolismo
Camundongos
Proteínas do Tecido Nervoso/química
Proteínas do Tecido Nervoso/genética
Proteínas do Tecido Nervoso/metabolismo
Neurônios/citologia
Neurônios/metabolismo
Biblioteca de Peptídeos
Ratos
Proteínas Recombinantes de Fusão/química
Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo
Anticorpos de Domínio Único/química
Anticorpos de Domínio Único/genética
Anticorpos de Domínio Único/metabolismo
Transmissão Sináptica/efeitos dos fármacos
Vesículas Sinápticas/efeitos dos fármacos
Vesículas Sinápticas/metabolismo
Proteína Vesicular 1 de Transporte de Glutamato/química
Proteína Vesicular 1 de Transporte de Glutamato/genética
Proteína Vesicular 1 de Transporte de Glutamato/metabolismo
[Pt] Tipo de publicação:COMPARATIVE STUDY; JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Central Nervous System Depressants); 0 (Membrane Transport Modulators); 0 (Nerve Tissue Proteins); 0 (Peptide Library); 0 (Recombinant Fusion Proteins); 0 (Single-Domain Antibodies); 0 (Slc17a7 protein, rat); 0 (Vesicular Glutamate Transport Protein 1); 147336-22-9 (Green Fluorescent Proteins); 3KX376GY7L (Glutamic Acid)
[Em] Mês de entrada:1708
[Cu] Atualização por classe:170811
[Lr] Data última revisão:
170811
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170722
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1021/acs.biochem.7b00436



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