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[PMID]:28470608
[Au] Autor:Raran-Kurussi S; Cherry S; Zhang D; Waugh DS
[Ad] Endereço:Macromolecular Crystallography Laboratory, Center for Cancer Research, National Cancer Institute at Frederick, B, Frederick, MD, 21702-1201, USA.
[Ti] Título:Removal of Affinity Tags with TEV Protease.
[So] Source:Methods Mol Biol;1586:221-230, 2017.
[Is] ISSN:1940-6029
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Although affinity tags are highly effective tools for the expression and purification of recombinant proteins, they generally need to be removed prior to structural and functional studies. This chapter describes a simple method for overproducing a soluble form of a stable variant of tobacco etch virus (TEV) protease in Escherichia coli and a protocol for purifying it to homogeneity so that it can be used as a reagent for removing affinity tags from recombinant proteins by site-specific endoproteolysis. Further, we cleave a model substrate protein (MBP-NusG) in vitro using the purified TEV protease to illustrate a protease cleavage protocol that can be employed for simple pilot experiments and large-scale protein preparations.
[Mh] Termos MeSH primário: Cromatografia de Afinidade/métodos
Endopeptidases/genética
Endopeptidases/isolamento & purificação
Escherichia coli/genética
Potyvirus/enzimologia
[Mh] Termos MeSH secundário: Clonagem Molecular/métodos
Endopeptidases/metabolismo
Escherichia coli/metabolismo
Proteínas de Escherichia coli/genética
Proteínas de Escherichia coli/metabolismo
Proteínas Ligantes de Maltose/genética
Proteínas Ligantes de Maltose/metabolismo
Fatores de Alongamento de Peptídeos/genética
Fatores de Alongamento de Peptídeos/metabolismo
Proteólise
Proteínas Recombinantes de Fusão/genética
Proteínas Recombinantes de Fusão/isolamento & purificação
Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo
Solubilidade
Fatores de Transcrição/genética
Fatores de Transcrição/metabolismo
Regulação para Cima
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Escherichia coli Proteins); 0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (NusG protein, E coli); 0 (Peptide Elongation Factors); 0 (Recombinant Fusion Proteins); 0 (Transcription Factors); EC 3.4.- (Endopeptidases); EC 3.4.- (TEV protease)
[Em] Mês de entrada:1802
[Cu] Atualização por classe:180220
[Lr] Data última revisão:
180220
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170505
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1007/978-1-4939-6887-9_14


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[PMID]:29223155
[Au] Autor:Grunina TM; Demidenko AV; Lyaschuk AM; Poponova MS; Galushkina ZM; Soboleva LA; Cherepushkin SA; Polyakov NB; Grumov DA; Solovyev AI; Zhukhovitsky VG; Boksha IS; Subbotina ME; Gromov AV; Lunin VG; Karyagina AS
[Ad] Endereço:Gamaleya National Research Center of Epidemiology and Microbiology, Ministry of Health of the Russian Federation, Moscow, 123098, Russia. alexander.v.gromov@gmail.com.
[Ti] Título:Recombinant Human Erythropoietin with Additional Processable Protein Domains: Purification of Protein Synthesized in Escherichia coli Heterologous Expression System.
[So] Source:Biochemistry (Mosc);82(11):1285-1294, 2017 Nov.
[Is] ISSN:1608-3040
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Three variants of human recombinant erythropoietin (rhEPO) with additional N-terminal protein domains were obtained by synthesis in an Escherichia coli heterologous expression system. These domains included (i) maltose-binding protein (MBP), (ii) MBP with six histidine residues (6His) in N-terminal position, (iii) s-tag (15-a.a. oligopeptide derived from bovine pancreatic ribonuclease A) with N-terminal 6His. Both variants of the chimeric protein containing MBP domain were prone to aggregation under nondenaturing conditions, and further purification of EPO after the domain cleavage by enterokinase proved to be impossible. In the case of 6His-s-tag-EPO chimeric protein, the products obtained after cleavage with enterokinase were successfully separated by column chromatography, and rhEPO without additional domains was obtained. Results of MALDI-TOF mass spectrometry showed that after refolding 6His-s-tag-EPO formed a structure similar to that of one of native EPO with two disulfide bonds. Both 6His-s-tag-EPO and rhEPO without additional protein domains purified after proteolysis possessed the same biological activity in vitro in the cell culture.
[Mh] Termos MeSH primário: Eritropoetina/biossíntese
Eritropoetina/isolamento & purificação
Escherichia coli/metabolismo
Proteínas Recombinantes de Fusão/biossíntese
[Mh] Termos MeSH secundário: Cromatografia
Enteropeptidase/metabolismo
Eritropoetina/genética
Escherichia coli/genética
Expressão Gênica
Histidina
Seres Humanos
Proteínas Ligantes de Maltose/química
Proteínas Ligantes de Maltose/genética
Oligopeptídeos
Fragmentos de Peptídeos
Conformação Proteica
Domínios Proteicos
Proteínas Recombinantes de Fusão/genética
Proteínas Recombinantes de Fusão/isolamento & purificação
Ribonuclease Pancreático/química
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (EPO protein, human); 0 (His-His-His-His-His-His); 0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (Oligopeptides); 0 (Peptide Fragments); 0 (Recombinant Fusion Proteins); 11096-26-7 (Erythropoietin); 4QD397987E (Histidine); EC 3.1.27.5 (Ribonuclease, Pancreatic); EC 3.4.21.9 (Enteropeptidase)
[Em] Mês de entrada:1801
[Cu] Atualização por classe:180103
[Lr] Data última revisão:
180103
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:171211
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1134/S0006297917110062


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[PMID]:28963004
[Au] Autor:Han Y; Guo W; Su B; Guo Y; Wang J; Chu B; Yang G
[Ad] Endereço:College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, Henan Province, PR China.
[Ti] Título:High-level expression of soluble recombinant proteins in Escherichia coli using an HE-maltotriose-binding protein fusion tag.
[So] Source:Protein Expr Purif;142:25-31, 2018 Feb.
[Is] ISSN:1096-0279
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Recombinant proteins are commonly expressed in prokaryotic expression systems for large-scale production. The use of genetically engineered affinity and solubility enhancing fusion proteins has increased greatly in recent years, and there now exists a considerable repertoire of these that can be used to enhance the expression, stability, solubility, folding, and purification of their fusion partner. Here, a modified histidine tag (HE) used as an affinity tag was employed together with a truncated maltotriose-binding protein (MBP; consisting of residues 59-433) from Pyrococcus furiosus as a solubility enhancing tag accompanying a tobacco etch virus protease-recognition site for protein expression and purification in Escherichia coli. Various proteins tagged at the N-terminus with HE-MBP(Pyr) were expressed in E. coli BL21(DE3) cells to determine expression and solubility relative to those tagged with His6-MBP or His6-MBP(Pyr). Furthermore, four HE-MBP(Pyr)-fused proteins were purified by immobilized metal affinity chromatography to assess the affinity of HE with immobilized Ni . Our results showed that HE-MBP(Pyr) represents an attractive fusion protein allowing high levels of soluble expression and purification of recombinant protein in E. coli.
[Mh] Termos MeSH primário: Escherichia coli/genética
Histidina/genética
Proteínas Ligantes de Maltose/genética
Oligopeptídeos/genética
Proteínas Recombinantes de Fusão/genética
Trissacarídeos/metabolismo
[Mh] Termos MeSH secundário: Cromatografia de Afinidade/métodos
Clonagem Molecular
Endopeptidases/química
Escherichia coli/metabolismo
Expressão Gênica
Histidina/isolamento & purificação
Histidina/metabolismo
Proteínas Ligantes de Maltose/metabolismo
Oligopeptídeos/isolamento & purificação
Oligopeptídeos/metabolismo
Plasmídeos/química
Plasmídeos/metabolismo
Ligação Proteica
Estabilidade Proteica
Pyrococcus furiosus/química
Pyrococcus furiosus/metabolismo
Proteínas Recombinantes de Fusão/biossíntese
Proteínas Recombinantes de Fusão/isolamento & purificação
Solubilidade
Trissacarídeos/química
Trissacarídeos/isolamento & purificação
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (His-His-His-His-His-His); 0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (Oligopeptides); 0 (Recombinant Fusion Proteins); 0 (Trisaccharides); 4QD397987E (Histidine); 639K0T34IK (maltotriose); EC 3.4.- (Endopeptidases); EC 3.4.- (TEV protease)
[Em] Mês de entrada:1711
[Cu] Atualização por classe:171128
[Lr] Data última revisão:
171128
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:171001
[St] Status:MEDLINE


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[PMID]:28862749
[Au] Autor:Khalili Yazdi A; Namjoshi S; Hackett J; Ghonaim N; Shilton BH
[Ad] Endereço:Department of Biochemistry, University of Western Ontario, London, Canada.
[Ti] Título:Characterization of a polypeptide-binding site in the DEAD Motor of the SecA ATPase.
[So] Source:FEBS Lett;591(20):3378-3390, 2017 Oct.
[Is] ISSN:1873-3468
[Cp] País de publicação:England
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:We coupled peptides from a CNBr digest of signal-sequenceless maltose-binding protein (MBP) to a surface plasmon resonance chip. SecA-N95, SecA-N68, and SecA-DM (which consists of only the DEAD Motor domains NBD1 and NBD2) bound to the immobilized peptides; ADP weakened the binding. SecA-DM, which lacks the 'preprotein cross-linking domain' (PPXD), displayed the most extensive binding, while an MBP-PPXD chimera showed no binding, demonstrating that the PPXD does not contribute to the binding. We characterized the sequence specificity using oriented peptide libraries; these results enabled synthesis of a 20-residue peptide that was used to recapitulate the results obtained with MBP-derived peptides. This study shows that there is a promiscuous and nucleotide-modulated peptide-binding site in the DEAD Motor domains of SecA.
[Mh] Termos MeSH primário: Adenosina Trifosfatases/química
Proteínas de Bactérias/química
Escherichia coli/metabolismo
Proteínas Ligantes de Maltose/química
Biblioteca de Peptídeos
Canais de Translocação SEC/química
Thermus thermophilus/metabolismo
[Mh] Termos MeSH secundário: Adenosina Trifosfatases/genética
Adenosina Trifosfatases/metabolismo
Sequência de Aminoácidos
Proteínas de Bactérias/genética
Proteínas de Bactérias/metabolismo
Sítios de Ligação
Clonagem Molecular
Cristalografia por Raios X
Escherichia coli/genética
Expressão Gênica
Interações Hidrofóbicas e Hidrofílicas
Cinética
Proteínas Ligantes de Maltose/genética
Proteínas Ligantes de Maltose/metabolismo
Modelos Moleculares
Mutação
Plasmídeos/química
Plasmídeos/metabolismo
Ligação Proteica
Domínios e Motivos de Interação entre Proteínas
Estrutura Secundária de Proteína
Proteínas Recombinantes de Fusão/química
Proteínas Recombinantes de Fusão/genética
Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo
Canais de Translocação SEC/genética
Canais de Translocação SEC/metabolismo
Eletricidade Estática
Especificidade por Substrato
Termodinâmica
Thermus thermophilus/genética
[Pt] Tipo de publicação:LETTER
[Nm] Nome de substância:
0 (Bacterial Proteins); 0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (Peptide Library); 0 (Recombinant Fusion Proteins); 0 (SEC Translocation Channels); 119129-39-4 (SecA protein, Bacteria); EC 3.6.1.- (Adenosine Triphosphatases)
[Em] Mês de entrada:1710
[Cu] Atualização por classe:171031
[Lr] Data última revisão:
171031
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170902
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1002/1873-3468.12832


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[PMID]:28820969
[Au] Autor:Henry KA; Kandalaft H; Lowden MJ; Rossotti MA; van Faassen H; Hussack G; Durocher Y; Kim DY; Tanha J
[Ad] Endereço:Human Health Therapeutics Portfolio, National Research Council Canada, 100 Sussex Drive, Ottawa, Ontario, K1A 0R6, Canada.
[Ti] Título:A disulfide-stabilized human V single-domain antibody library is a source of soluble and highly thermostable binders.
[So] Source:Mol Immunol;90:190-196, 2017 Oct.
[Is] ISSN:1872-9142
[Cp] País de publicação:England
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:We have previously shown that incorporation of a second intradomain disulfide linkage into camelid V H and human V /V single-domain antibodies confers increased thermostability. Here, we explored the effects of introducing an additional disulfide linkage, formed between Cys48 and Cys64 (Kabat numbering), into a phage-displayed synthetic human V library. In comparison to an identical library bearing only the highly conserved Cys23-Cys88 disulfide linkage, the disulfide-stabilized V library tolerated a similar degree of randomization but retained a higher level of functional diversity after selection with protein L. Both libraries yielded soluble, antigen-specific V s that recognized a model antigen (maltose-binding protein) with similar affinities, in the micromolar range; however, the disulfide-stabilized antigen-specific V s were much more thermostable (average ΔT ∼10°C) than non-disulfide-stabilized V s. This work provides proof-of-concept for building synthetic antibody libraries using disulfide-constrained immunoglobulin domains, thus avoiding pitfalls of post-hoc disulfide linkage engineering such as impaired antigen binding and reduced expression yield.
[Mh] Termos MeSH primário: Cadeias Leves de Imunoglobulina/imunologia
Região Variável de Imunoglobulina/imunologia
Proteínas Ligantes de Maltose/imunologia
Biblioteca de Peptídeos
Engenharia de Proteínas/métodos
Anticorpos de Domínio Único/imunologia
[Mh] Termos MeSH secundário: Sequência de Aminoácidos
Afinidade de Anticorpos/imunologia
Técnicas de Visualização da Superfície Celular
Dissulfetos/química
Seres Humanos
Cadeias Leves de Imunoglobulina/química
Região Variável de Imunoglobulina/química
Ressonância de Plasmônio de Superfície
Biologia Sintética
Temperatura Ambiente
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Disulfides); 0 (Immunoglobulin Light Chains); 0 (Immunoglobulin Variable Region); 0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (Peptide Library); 0 (Single-Domain Antibodies)
[Em] Mês de entrada:1711
[Cu] Atualização por classe:171107
[Lr] Data última revisão:
171107
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170819
[St] Status:MEDLINE


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[PMID]:28583805
[Au] Autor:Yang A; Hacheney I; Wu YW
[Ad] Endereço:Chemical Genomics Centre of the Max Planck Society, Otto-Hahn-Str. 15, 44227 Dortmund, Germany; Max-Planck-Institute of Molecular Physiology, Otto-Hahn-Str. 11, 44227 Dortmund, Germany; Institute of Chemical Biology and Precision Therapy, Zhongshan School of Medicine, Sun Yat-Sen University, Guangzhou, Guangdong, China.
[Ti] Título:Semisynthesis of autophagy protein LC3 conjugates.
[So] Source:Bioorg Med Chem;25(18):4971-4976, 2017 Sep 15.
[Is] ISSN:1464-3391
[Cp] País de publicação:England
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Autophagy is a conserved catabolic process involved in the elimination of proteins, organelles and pathogens. Autophagosome formation is the key process in autophagy. Lipidated Atg8/LC3 proteins that are conjugated to phosphatidylethanolamine (PE) play a key role in autophagosome biogenesis. To understand the function of Atg8/LC3-PE in autophagosome formation and host-pathogen interaction requires preparation and structural manipulation of lipidated Atg8/LC3 proteins. Herein, we report the semisynthesis of LC3 proteins and mutants with modifications of different PE fragments or lipids using native chemical ligation and aminolysis approaches.
[Mh] Termos MeSH primário: Família da Proteína 8 Relacionada à Autofagia/síntese química
Proteínas Associadas aos Microtúbulos/síntese química
[Mh] Termos MeSH secundário: Sequência de Aminoácidos
Família da Proteína 8 Relacionada à Autofagia/análise
Cinética
Proteínas Ligantes de Maltose/metabolismo
Proteínas Associadas aos Microtúbulos/análise
Fosfatidiletanolaminas/química
Espectrometria de Massas por Ionização por Electrospray
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Autophagy-Related Protein 8 Family); 0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (Microtubule-Associated Proteins); 0 (Phosphatidylethanolamines); 39382-08-6 (phosphatidylethanolamine)
[Em] Mês de entrada:1710
[Cu] Atualização por classe:171009
[Lr] Data última revisão:
171009
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170607
[St] Status:MEDLINE


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[PMID]:28576616
[Au] Autor:Kurashige N; Fuchida H; Tabata S; Uchinomiya S; Ojida A
[Ad] Endereço:Graduate School of Pharmaceutical Sciences, Kyushu University, 3-1-1, Maidashi, Higashi-ku, Fukuoka 812-8582, Japan.
[Ti] Título:Discovery of highly reactive peptide tag by ELISA-type screening for specific cysteine conjugation.
[So] Source:Bioorg Med Chem Lett;27(15):3486-3489, 2017 08 01.
[Is] ISSN:1464-3405
[Cp] País de publicação:England
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:We report the discovery of a highly reactive peptide tag for the specific cysteine conjugation of proteins. Screening of cysteine-containing peptides using ELISA-type screening yielded a 19-amino acid tag (DCPPPDDAADDAADDAADD), named DCP3 tag, which enabled the rapid and selective labeling of the tag-fused protein with a synthetic zinc complex on the surface of living cells.
[Mh] Termos MeSH primário: Cisteína/química
Imagem Óptica
Peptídeos/química
Proteínas/análise
[Mh] Termos MeSH secundário: Sequência de Aminoácidos
Complexos de Coordenação/química
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/métodos
Células HEK293
Seres Humanos
Proteínas Ligantes de Maltose/análise
Imagem Óptica/métodos
Receptores Acoplados a Proteínas-G/análise
Zinco/química
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE; RESEARCH SUPPORT, NON-U.S. GOV'T
[Nm] Nome de substância:
0 (Coordination Complexes); 0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (Peptides); 0 (Proteins); 0 (Receptors, G-Protein-Coupled); J41CSQ7QDS (Zinc); K848JZ4886 (Cysteine)
[Em] Mês de entrada:1708
[Cu] Atualização por classe:171125
[Lr] Data última revisão:
171125
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170604
[St] Status:MEDLINE


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[PMID]:28541524
[Au] Autor:McNiff ML; Chadwick JS
[Ad] Endereço:Department of Pharmaceutical Chemistry, University of Kansas, 2093 Constant Ave, Lawrence, KS 66047.
[Ti] Título:Metal-bound claMP Tag inhibits proteolytic cleavage.
[So] Source:Protein Eng Des Sel;30(6):467-475, 2017 Jun 01.
[Is] ISSN:1741-0134
[Cp] País de publicação:England
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Biologics can be an improvement to small molecule drugs, providing high specificity for an identified target, lowering toxicity and limiting side effects. To achieve effective delivery, the biologic must have sufficient time to reach the target tissue. A prolonged half-life in the circulating environment is desired, but often serum stability is limited by proteases. Proteolysis in the serum causes degradation and inactivation as the biologic is fragmented and more rapidly cleared from the body. To improve the circulating half-life, large, hydrophilic polymers may be conjugated or stable fusion tags may be engineered to increase the effective size of the peptide and to hinder degradation by proteases. Improved resistance to proteases is essential for effective delivery. Here, a proof of concept study is presented using a metal-binding tripeptide tag known as the claMP Tag to create an inline conjugate and the ability of the tag to inhibit proteolysis was examined.
[Mh] Termos MeSH primário: Oligopeptídeos/química
Oligopeptídeos/metabolismo
Engenharia de Proteínas/métodos
Proteínas Recombinantes de Fusão/química
Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo
[Mh] Termos MeSH secundário: Densitometria
Eletroforese em Gel de Poliacrilamida
Escherichia coli/genética
Concentração de Íons de Hidrogênio
Proteínas Ligantes de Maltose/química
Proteínas Ligantes de Maltose/genética
Proteínas Ligantes de Maltose/metabolismo
Níquel/química
Níquel/metabolismo
Oligopeptídeos/genética
Estabilidade Proteica
Proteólise
Proteínas Recombinantes de Fusão/genética
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (Oligopeptides); 0 (Recombinant Fusion Proteins); 7OV03QG267 (Nickel)
[Em] Mês de entrada:1709
[Cu] Atualização por classe:170920
[Lr] Data última revisão:
170920
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170526
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1093/protein/gzx030


  9 / 1564 MEDLINE  
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[PMID]:28369115
[Au] Autor:Lee SB; Park SK; Kim YS
[Ad] Endereço:Wide River Institute of Immunology, Seoul National University College of Medicine, Hongcheon, Gangwon-do, South Korea.
[Ti] Título:Maltose binding protein-fusion enhances the bioactivity of truncated forms of pig myostatin propeptide produced in E. coli.
[So] Source:PLoS One;12(4):e0174956, 2017.
[Is] ISSN:1932-6203
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:Myostatin (MSTN) is a potent negative regulator of skeletal muscle growth. MSTN propeptide (MSTNpro) inhibits MSTN binding to its receptor through complex formation with MSTN, implying that MSTNpro can be a useful agent to improve skeletal muscle growth in meat-producing animals. Four different truncated forms of pig MSTNpro containing N-terminal maltose binding protein (MBP) as a fusion partner were expressed in E. coli, and purified by the combination of affinity chromatography and gel filtration. The MSTN-inhibitory capacities of these proteins were examined in an in vitro gene reporter assay. A MBP-fused, truncated MSTNpro containing residues 42-175 (MBP-Pro42-175) exhibited the same MSTN-inhibitory potency as the full sequence MSTNpro. Truncated MSTNpro proteins containing either residues 42-115 (MBP-Pro42-115) or 42-98 (MBP-Pro42-98) also exhibited MSTN-inhibitory capacity even though the potencies were significantly lower than that of full sequence MSTNpro. In pull-down assays, MBP-Pro42-175, MBP-Pro42-115, and MBP-Pro42-98 demonstrated their binding to MSTN. MBP was removed from the truncated MSTNpro proteins by incubation with factor Xa to examine the potential role of MBP on MSTN-inhibitory capacity of those proteins. Removal of MBP from MBP-Pro42-175 and MBP-Pro42-98 resulted in 20-fold decrease in MSTN-inhibitory capacity of Pro42-175 and abolition of MSTN-inhibitory capacity of Pro42-98, indicating that MBP as fusion partner enhanced the MSTN-inhibitory capacity of those truncated MSTNpro proteins. In summary, this study shows that MBP is a very useful fusion partner in enhancing MSTN-inhibitory potency of truncated forms of MSTNpro proteins, and MBP-fused pig MSTNpro consisting of amino acid residues 42-175 is sufficient to maintain the full MSTN-inhibitory capacity.
[Mh] Termos MeSH primário: Proteínas Ligantes de Maltose/genética
Proteínas Ligantes de Maltose/metabolismo
Miostatina/antagonistas & inibidores
Proteínas Recombinantes de Fusão/genética
Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo
[Mh] Termos MeSH secundário: Sequência de Aminoácidos
Animais
Escherichia coli/genética
Escherichia coli/metabolismo
Carne/análise
Desenvolvimento Muscular/genética
Desenvolvimento Muscular/fisiologia
Músculo Esquelético/crescimento & desenvolvimento
Miostatina/metabolismo
Ligação Proteica
Suínos
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (Myostatin); 0 (Recombinant Fusion Proteins)
[Em] Mês de entrada:1709
[Cu] Atualização por classe:170912
[Lr] Data última revisão:
170912
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170404
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1371/journal.pone.0174956


  10 / 1564 MEDLINE  
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Texto completo
[PMID]:28293065
[Au] Autor:Jiang L; Liu G; Ni W; Zhang N; Jie J; Xie F; Tai G
[Ad] Endereço:Department of Immunology, College of Basic Medical Science, Jilin University, Changchun 130021, China.
[Ti] Título:The Combination of MBP and BCG-Induced Dendritic Cell Maturation through TLR2/TLR4 Promotes Th1 Activation In Vitro and Vivo.
[So] Source:Mediators Inflamm;2017:1953680, 2017.
[Is] ISSN:1466-1861
[Cp] País de publicação:United States
[La] Idioma:eng
[Ab] Resumo:To explore whether TLR2/TLR4 could be involved in the maturation of dendritic cells and polarization of CD4 T cells induced by dendritic cells stimulated with MBP and BCG, in vitro and in vivo experiments using TLR2 or TLR4 mice were employed. MBP and BCG elevated CD80, CD86 and MHC class II expressed on dendritic cells and increased IL-12 protein, induced DC maturation, and indirectly promoted Th1 activation. Moreover, MBP and BCG upregulated costimulatory molecules on DCs in a TLR2- and TLR4-dependent manner. The levels of IFN- , IL-4, and IL-10 in CD4 T cells cocultured with dendritic cells from different types of mice were determined with ELISPOT or ELISA method. TLR2/TLR4 is important in the maturation and activation of dendritic cells and the activation of Th1 cells induced by stimulation with MBP and BCG. In conclusion, TLR2 and TLR4 play an important role in the upregulation of costimulatory molecules and MHC class II molecules on dendritic cells and the activation of Th1 cells induced by stimulation with MBP and BCG. The results above indicate that the combination of MBP and BCG induced the maturation and activation of dendritic cells and promoted Th1 activation via TLR2/TLR4.
[Mh] Termos MeSH primário: Células Dendríticas/metabolismo
Proteínas Ligantes de Maltose/farmacologia
Mycobacterium bovis/fisiologia
Células Th1/metabolismo
Receptor 2 Toll-Like/metabolismo
Receptor 4 Toll-Like/metabolismo
[Mh] Termos MeSH secundário: Animais
Linfócitos T CD4-Positivos/metabolismo
Citometria de Fluxo
Interferon gama/metabolismo
Interleucina-10/metabolismo
Interleucina-4/metabolismo
Camundongos
Camundongos Endogâmicos C57BL
Camundongos Knockout
[Pt] Tipo de publicação:JOURNAL ARTICLE
[Nm] Nome de substância:
0 (Maltose-Binding Proteins); 0 (Toll-Like Receptor 2); 0 (Toll-Like Receptor 4); 130068-27-8 (Interleukin-10); 207137-56-2 (Interleukin-4); 82115-62-6 (Interferon-gamma)
[Em] Mês de entrada:1706
[Cu] Atualização por classe:170605
[Lr] Data última revisão:
170605
[Sb] Subgrupo de revista:IM
[Da] Data de entrada para processamento:170316
[St] Status:MEDLINE
[do] DOI:10.1155/2017/1953680



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